本文關(guān)鍵詞：MiR-192通過(guò)靶向ERCC3和ERCC4蛋白表達(dá)逆轉(zhuǎn)胃癌細(xì)胞順鉑耐藥性的研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究目的胃的惡性腫瘤是臨床診斷中一種常見(jiàn)的疾病,胃癌早期無(wú)明顯癥狀,發(fā)現(xiàn)時(shí)往往為中晚期,而化療是中晚期患者必不可少的。在胃癌化療藥物中,鉑類(lèi)是基礎(chǔ)且重要的一種;然而,鉑類(lèi)原發(fā)或繼發(fā)耐藥是導(dǎo)致胃癌治療失敗的重要原因,探討耐藥機(jī)制、逆轉(zhuǎn)鉑類(lèi)耐藥是目前研究熱點(diǎn)。研究表明:核苷酸切除修復(fù)(NER)是順鉑獲得性耐藥性的重要原因之一;而mi RNA的表達(dá)異常(微RNA)可以通過(guò)多種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的順鉑耐藥性。近期有研究顯示mi R-192在Hep G2.2.15細(xì)胞中可以通過(guò)靶向抑制核苷酸切除修復(fù)途徑中的ERCC3、ERCC4的表達(dá)增強(qiáng)對(duì)順鉑的敏感性。提示mi RNA-192也許可以作為肝癌的治療靶標(biāo);而mi RNA-192在胃癌細(xì)胞中是否可以通過(guò)核苷酸切除修復(fù)途徑調(diào)控順鉑耐藥性還不清楚,值得探討。方法采用彗星實(shí)驗(yàn)的方法檢測(cè)人胃癌細(xì)胞SGC-7901與人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥細(xì)胞株SGC-7901/DDP的DNA損傷修復(fù)的能力,觀察SCGE檢測(cè)圖像的尾長(zhǎng)以評(píng)定DNA的修復(fù)能力。采用real-time PCR檢測(cè)SGC-7901和SGC-7901/DDP mi R-192的表達(dá)水平,利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000將成熟的mi R-192的阻遏物inhibitor、模擬物mimic及陰性對(duì)照組negative control RNA分別轉(zhuǎn)染至SGC-7901和SGC-7901/DDP細(xì)胞,用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC-7901和SGC-7901/DDP中的ERCC3、ERCC4蛋白的表達(dá)水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。采用細(xì)胞劃痕檢測(cè)SGC-7901/DDP和SGC-7901的遷移能力。結(jié)果人胃腺癌SGC-7901/DDP較SGC-7901的SCGE圖像的尾長(zhǎng)短,SGC-7901/DDP的DNA損傷修復(fù)能力比SGC-7901強(qiáng)。mi R-192在SGC-7901中表達(dá)較SGC-7901/DDP增高;分別將mi R-192的mimics和inhibitor轉(zhuǎn)染入SGC-7901/DDP和SGC-7901中,與空白組和陰性對(duì)照組比較ERCC3和ERCC4的蛋白表達(dá)量分別降低和增高,而其細(xì)胞凋亡率則分別增高和降低。通過(guò)用細(xì)胞劃痕的方法觀測(cè)到SGC-7901/DDP較SGC-7901的遷移能力變差。結(jié)論mi R-192通過(guò)上調(diào)NER途徑中的ERCC3和ERCC4表達(dá),增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)能力,從而增加順鉑的耐藥性。SGC-7901/DDP細(xì)胞的遷移能力較其親本細(xì)胞減弱。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 Hiroyuki Yamamoto;Yasushi Adachi;Hiroaki Taniguchi;Hiroaki Kunimoto;Katsuhiko Nosho;Hiromu Suzuki;Yasuhisa Shinomura;;Interrelationship between microsatellite instability and microRNA in gastrointestinal cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2012年22期

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本文編號(hào)：1336660