本文關鍵詞：GOLPH2的糖基化修飾對于其參與肝癌發(fā)生的影響　出處：《安徽醫(yī)科大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： GOLPH2 糖基化位點突變 肝細胞癌 NF-κB 炎癥小體 脂筏

【摘要】：目的:本研究通過轉染GOLPH2及其糖基化缺失的重組質粒進入肝癌細胞HepG2,進行體外功能學研究(細胞生長與細胞周期),探索GOLPH2的糖基化修飾對肝癌細胞的炎癥通路及膽固醇代謝通路的影響,從而揭示GOLPH2的糖基化修飾對于其功能發(fā)揮的影響。方法:構建GOLPH2的109、144位糖基化位點雙突變質粒,并命名為pcDNA3-Flag-GOLPH2(DM),用脂質體分別轉染GOLPH2 WT(野生型GOLPH2重組質粒)或者DM到肝癌細胞HepG2中,進行細胞生長與細胞周期實驗、NF-κB報告基因實驗、炎癥小體及脂筏的免疫熒光染色實驗。結果:細胞生長與細胞周期實驗表明,與野生型GOLPH2相比,糖基化位點突變GOLPH2會使細胞生長與細胞周期減慢。雙熒光素酶報告基因實驗結果表明,野生型GOLPH2能夠激活HepG2細胞中NF-κB的轉錄活性,而雙糖基化位點突變會使GOLPH2失去此激活作用。免疫熒光實驗檢測發(fā)現(xiàn)野生型GOLPH2促使肝癌細胞HepG2的炎癥小體和脂筏累積,雙糖基化位點突變的GOLPH2則喪失此功能。結論:糖基化修飾對GOLPH2促進肝癌細胞HepG2的生長是必須的;糖基化修飾對GOLPH2激活肝癌細胞HepG2的炎癥通路是必須的;糖基化修飾對GOLPH2誘導肝癌細胞HepG2內(nèi)脂筏累積(膽固醇代謝)是必須的;GOLPH2的糖基化修飾對于其功能發(fā)揮不可或缺。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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