本文關(guān)鍵詞：激活素A通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)肺腺癌細胞凋亡

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【摘要】：激活素A(activin A)最早是由卵巢中分離的糖蛋白,屬于轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor β,TGFβ)超家族成員,是一種多功能生長和分化因子,具有廣泛的生物學(xué)作用,在胚胎初期形成、造血細胞增殖和分化以及腫瘤細胞凋亡等方面發(fā)揮重要作用。細胞凋亡(apoptosis)又稱程序性細胞死亡(programmed celldeath, PCD),是機體在正常生長發(fā)育或病理狀態(tài)下由相關(guān)基因調(diào)控的一個復(fù)雜性細胞主動性死亡方式,是機體清除老化、受損及突變細胞,維持機體正常發(fā)育所必需的一種重要機制,細胞凋亡異常與機體多種疾病有關(guān),如神經(jīng)性及神經(jīng)發(fā)育相關(guān)性疾病、各種腫瘤的發(fā)生等。細胞凋亡途徑主要分為三種：死亡受體途徑,線粒體途徑及近些年發(fā)現(xiàn)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑。有關(guān)研究顯示激活素A可通過線粒體途徑誘導(dǎo)B細胞凋亡,但激活素A能否通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)肺腺癌細胞凋亡仍缺乏相關(guān)研究報導(dǎo)。本研究以小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞和人肺腺癌細胞系A(chǔ)549細胞為研究對象,探討激活素A對小鼠及人肺腺癌細胞增殖以及凋亡的影響；同時分析小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑相關(guān)蛋白Caspase12,Chop和GADD34的表達：并采用表達GADD34 shRNA慢病毒感染Lewis細胞,建立敲低GADD34基因表達的Lewis細胞系(shGADD34/Lewis),進一步確定激活素A可否通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)肺腺癌細胞凋亡。研究首先采用MTT、BrdU法以及CSFE熒光標(biāo)記法檢測細胞增殖,通過Annexin-V/PI雙染色流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況,結(jié)果顯示,激活素A可以明顯抑制體外培養(yǎng)小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞增殖,誘導(dǎo)Lewis細胞凋亡；研究還顯示激活素A也能抑制人肺腺癌細胞系A(chǔ)549細胞增殖,并誘導(dǎo)A549細胞凋亡。實驗進一步采用RT-PCR檢測小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑相關(guān)蛋白Caspase12、Chop以及GADD34mRNA表達,結(jié)果顯示激活素A作用Lewis細胞12h,可以明顯促進Caspase12、Chop及GADD34 mRNA表達。最后,為了進一步確定激活素A通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)肺腺癌細胞凋亡,實驗采用表達GADD34 shRNA慢病毒感染Lewis細胞,建立敲低GADD34基因表達的Lewis細胞系(shGADD34/Lewis)及對照病毒感染的Lewis細胞系(shcon/Lewis),研究發(fā)現(xiàn)敲低GADD34基因表達可以明顯削弱激活素A對Lewis細胞增殖的抑制作用及誘導(dǎo)細胞凋亡作用。上述結(jié)果表明,激活素A具有抑制小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞和人肺腺癌細胞系A(chǔ)549細胞增殖,以及誘導(dǎo)Lewis細胞及A549細胞凋亡作用；激活素A可以促進小鼠肺腺癌細胞系Lewis細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)急途徑相關(guān)蛋白Caspas12、 Chop和GADD34 mRNA表達；敲低GADD34基因表達可以明顯削弱激活素A對Lewis細胞增殖的抑制作用及誘導(dǎo)細胞凋亡作用。因此,激活素A可以通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)肺腺癌細胞凋亡,提示激活素A具有進一步開發(fā)成誘導(dǎo)肺腺癌凋亡的治療藥物的潛能。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2

【參考文獻】

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1 陳月橋;王麗;武建華;;細胞凋亡信號傳導(dǎo)途徑研究進展[J];中國實用醫(yī)藥;2007年33期

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本文編號：1301698