本文關(guān)鍵詞：YAP對人肺腺癌干細(xì)胞順鉑耐藥的調(diào)控的研究

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【摘要】：研究目的:1、檢測對比A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球中YAP m RNA和蛋白的表達(dá)水平。2、初步探討YAP對A549干細(xì)胞球順鉑耐藥的影響。方法:1、以無血清培養(yǎng)基(serum-free medium,SFM)的方法誘導(dǎo)A549細(xì)胞形成A549細(xì)胞球體。2、以si RNA-YAP轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞和A549干細(xì)胞球來下調(diào)YAP m RNA和蛋白的表達(dá)。3、通過RT-PCR法檢測經(jīng)si RNA轉(zhuǎn)染前后A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球中YAP m RNA的表達(dá)水平。4、通過Western Blot法檢測經(jīng)si RNA轉(zhuǎn)染前后A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球中YAP蛋白的表達(dá)水平。5、在si RNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞48小時(shí)后,加藥組以順鉑處理細(xì)胞24小時(shí)。6、以CCK法檢測各A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球組的增殖抑制率。7、以流式細(xì)胞儀檢測各A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球組的細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:1、RT-PCR、Western Blot法檢測到:(1)A549細(xì)胞中YAP m RNA及蛋白表達(dá)均低于A549干細(xì)胞球(P0.05);(2)si YAP可下調(diào)A549細(xì)胞和A549干細(xì)胞球中YAP m RNA及蛋白的表達(dá)(P0.05);(3)經(jīng)si YAP轉(zhuǎn)染后的A549細(xì)胞和A549干細(xì)胞球中YAP m RNA和蛋白的表達(dá)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、CCK法檢測到:(1)以相同的si RNA和/或順鉑處理后,A549細(xì)胞的增殖抑制率高于A549干細(xì)胞球(P0.05);(2)YAP表達(dá)下調(diào)可使A549細(xì)胞和A549干細(xì)胞球的增殖抑制率較前升高(P0.05);(3)順鉑引起的YAP表達(dá)下調(diào)后的A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球的增殖抑制率均較相應(yīng)的對照細(xì)胞組高(P0.05)3、流式細(xì)胞儀檢測到:(1)以相同的si RNA和/或順鉑處理后,A549細(xì)胞的凋亡率高于A549干細(xì)胞(P0.05);(2)YAP表達(dá)下調(diào)可使A549細(xì)胞和A549干細(xì)胞球的細(xì)胞凋亡率較前增加(P0.05);(3)順鉑引起的YAP表達(dá)下調(diào)后的A549細(xì)胞及A549干細(xì)胞球的凋亡率均較相應(yīng)的對照細(xì)胞組高(P0.05)結(jié)論:1、YAP m RNA及蛋白在A549干細(xì)胞球中的表達(dá)水平高于A549細(xì)胞。2、下調(diào)YAP表達(dá)可降低A549干細(xì)胞球?qū)樸K的耐藥性。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 韓高揚(yáng);趙松;黨麗峰;齊宇;楊洋;劉東雷;張春em;吳愷;;YAP干擾質(zhì)粒的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染肺腺癌細(xì)胞A549的篩選鑒定[J];中國老年學(xué)雜志;2014年16期

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本文編號(hào)：1292197