本文關(guān)鍵詞：基于新型單分散空心金納米球SERS tags的癌胚抗原檢測(cè)研究

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【摘要】：肺癌是所有癌癥中死亡率最高的,死亡人數(shù)約占所有癌癥的25%。早期的臨床診斷對(duì)提高癌癥患者生存率和病情預(yù)后分析治療至關(guān)重要。雖然已經(jīng)有許多技術(shù)用于肺癌的檢測(cè),但是它們大多數(shù)是侵入的、昂貴的、費(fèi)時(shí)的并且靈敏度低。最近,一種基于表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)的免疫分析技術(shù)引起科研人員極大興趣,它是通過(guò)抗體修飾在金屬納米顆粒并被用于快速靈敏的生物傳感分析。而這其中最關(guān)鍵的工作就是SERS標(biāo)簽(tags)的構(gòu)建。在本研究中,我們構(gòu)建了一種基于新型空心金納米球的SERS tags,同時(shí)構(gòu)建磁珠捕獲探針當(dāng)作富集基底。基于這種免疫分析的策略,我們能快速靈敏的檢測(cè)濃度在10pg/mL-100ng/mL范圍內(nèi)的CEA。具體工作內(nèi)容如下：(1)通過(guò)種子介導(dǎo)生長(zhǎng)法合成單分散性良好的空心金納米球。在這個(gè)方法中,首先金納米顆粒先在單分散SiO2表面形成SiO2/GNPs結(jié)構(gòu)并作為生長(zhǎng)點(diǎn)繼續(xù)通過(guò)還原法來(lái)沉積金顆粒。隨著越來(lái)越多的Au3-被H2O2還原成Au顆粒,GNPs逐漸變大并形成完整的金納米殼層。最后,通過(guò)氫氟酸腐蝕這種單分散金納米殼的SiO2核就可以形成結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,單分散性良好的空心金納米球。雖然這個(gè)方法相對(duì)較復(fù)雜和耗時(shí),但是所獲得的金納米殼表面光滑且有很好的可控性和可重復(fù)性。對(duì)比拉曼信號(hào)分子4-巰基苯甲酸(4-MBA)修飾的空心金納米球與金納米殼的SERS圖譜,發(fā)現(xiàn)其他條件一樣時(shí),前者在1080 cml處(4-MBA特征峰)的峰值是后者的10倍,表明了該材料有很好的SERS活性。(2)通過(guò)上述種子介導(dǎo)生長(zhǎng)法所制備的單分散空心金納米球當(dāng)作SERS基底來(lái)構(gòu)建SERS tags.首先,四巰基苯甲酸被當(dāng)作拉曼信號(hào)分子標(biāo)記SERS標(biāo)簽(tags),同時(shí)它也是一個(gè)偶聯(lián)劑。其末端的羧基和CEA單克隆抗體上的氨基經(jīng)過(guò)活化后偶聯(lián)。然后二巰基乙醇用來(lái)作為保護(hù)劑封閉SERS tags上其他未結(jié)合位點(diǎn)并防止空心金納米球聚集,最后修飾上CEA單克隆抗體,SERS tags也就成功構(gòu)建了。另外一方面,粒徑超過(guò)1μm的磁性微球先包裹二氧化硅層提高其穩(wěn)定性,然后在其表面修飾CEA多克隆抗體,磁珠捕獲探針同時(shí)也用來(lái)當(dāng)作富集和分離基底。并用紅外光譜等對(duì)空心金納米球SERS tags和磁珠捕獲探針的構(gòu)建過(guò)程進(jìn)行表征。(3)基于表面增強(qiáng)拉曼免疫分析技術(shù),這種CEA單克隆抗體修飾的空心金納米球SERS tags和CEA多克隆抗體修飾的磁性微球被用來(lái)定量檢測(cè)濃度在100 ng/mL到10 pg/mL的CEA。結(jié)果顯示在該濃度范圍內(nèi),檢測(cè)濃度和拉曼信號(hào)強(qiáng)度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。這種探針的檢測(cè)極限比實(shí)心金納米殼SERS tags用于檢測(cè)CEA的極限值低兩個(gè)數(shù)量級(jí)。這表明所制備的單分散空心金納米球是一種理想用于構(gòu)建定量夾心免疫分析的SERS tags材料,并且該探針具有很好臨床癌癥標(biāo)志物診斷的潛在價(jià)值。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1259203