本文關(guān)鍵詞：極低頻電磁場對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞的體外生物效應(yīng)研究

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【摘要】：背景:骨肉瘤(osteosarcoma,OS)是兒童和青少年人群中最常見的非血液學(xué)惡性骨腫瘤,發(fā)病快,死亡率高。傳統(tǒng)的外科治療手段,如肢體離斷術(shù),雖然可以解除患者疼痛,改善生活質(zhì)量,但同時(shí)也給患者帶來了嚴(yán)重的身體傷害和巨大的精神壓力。盡管化療藥物治療也在不斷改善和提高,但是患者的遠(yuǎn)期轉(zhuǎn)移率仍高達(dá)80%,且5年生存率仍難令人滿意。近年來,隨著新興治療方法的不斷發(fā)展,物理治療手段越來越受到大家重視,并開展了一系列的深入研究。極低頻電磁場(ELF-EMF)與腫瘤治療的關(guān)系成為目前研究的熱點(diǎn),從現(xiàn)有的研究成果來看,它在臨床腫瘤學(xué)研究方面顯示出了巨大的潛力。近期的研究結(jié)果表明,特定頻率和強(qiáng)度的電磁場有抑制腫瘤生長的作用。因此,本課題組擬將體外人骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607-F4(以下簡稱為F4細(xì)胞)做為研究對(duì)象,并將其暴露在多組不同頻率、不同強(qiáng)度的脈沖電磁場中,通過觀察細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、侵襲能力等變化來篩選出最佳的電磁“窗口”,即對(duì)F4細(xì)胞作用明顯的電磁場參數(shù),并作為后續(xù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和具體分子機(jī)制研究的電磁場數(shù)據(jù)依據(jù),該課題組得到了國家青年科學(xué)基金項(xiàng)目的資助(61102029)。在我們的實(shí)驗(yàn)研究中,我們建立了磁場實(shí)驗(yàn)組(ELF-EMF組)和同等條件下的對(duì)照組,磁場輻照完成后,采用MTT比色法檢測吸光度(OD值),整理數(shù)據(jù)并采用科學(xué)的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,篩選出兩組抑制F4細(xì)胞增殖明顯的電磁參數(shù),這也證實(shí)了特定頻率和強(qiáng)度的電磁場參數(shù)對(duì)F4細(xì)胞的影響。根據(jù)初步篩選出的兩組參數(shù),重新設(shè)立磁場實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,采用相同的輻照時(shí)間,輻照完成后對(duì)各組的細(xì)胞樣本分別進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測,細(xì)胞周期檢測以及侵襲能力檢測。根據(jù)檢測結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,最后篩選出對(duì)人OS細(xì)胞作用明顯的一組參數(shù)。綜合以上實(shí)驗(yàn)及檢測結(jié)果,我們得出了結(jié)論,即特定頻率、強(qiáng)度的ELF-EMF對(duì)體外F4細(xì)胞的細(xì)胞增殖具有一定的抑制作用、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、影響細(xì)胞周期及降低侵襲能力。我們通過目前實(shí)驗(yàn)獲得了一些數(shù)據(jù),并得出理想的結(jié)論,本課題組的后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究還很多,包括磁場輻照下的動(dòng)物模型制作及具體分子機(jī)制變化研究。實(shí)驗(yàn)一極低頻電磁場對(duì)體外人骨肉瘤細(xì)胞增殖的影響及參數(shù)的初步篩選目的:通過建立ELF-EMF實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,檢測兩組F4細(xì)胞增殖變化,觀察細(xì)胞形態(tài)變化及數(shù)量差異,篩選出兩組抑制結(jié)果明顯的ELF-EMF參數(shù)。方法:正常細(xì)胞培養(yǎng)條件下培養(yǎng)F4細(xì)胞,按照不同磁場頻率5 Hz、15 Hz、30 Hz、40 Hz、50 Hz依次劃分為A~E五組,每組按照不同磁場強(qiáng)度0.1 m T、1 m T、5 m T、10 m T進(jìn)行輻照,每天輻照3小時(shí),連續(xù)輻照3天。輻照完成后,采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法檢測各組細(xì)胞樣本增殖變化,對(duì)吸光度(OD值)進(jìn)行整合分析,并進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,初步篩選出兩組結(jié)果差異明顯的磁場組。結(jié)果:頻率為15 Hz,強(qiáng)度為0.1 m T ELF-EMF較其他磁場組和對(duì)照組所得結(jié)果差異明顯(P0.05);頻率為50 Hz,強(qiáng)度為1 m T的ELF-EMF較其他磁場組和對(duì)照組所得結(jié)果差異明顯(P0.05)。結(jié)論:特定頻率和強(qiáng)度的ELF-EMF對(duì)F4細(xì)胞具有增殖抑制作用,且磁場15 Hz,0.1 m T與磁場50 Hz,1 m T對(duì)F4細(xì)胞增殖抑制作用明顯。實(shí)驗(yàn)二極低頻電磁場對(duì)體外人骨肉瘤細(xì)胞的作用研究及參數(shù)的優(yōu)化目的:通過觀察ELF-EMF對(duì)體外F4細(xì)胞凋亡比例、細(xì)胞周期變化及侵襲能力的影響,進(jìn)一步優(yōu)化ELF-EMF參數(shù)。方法:常規(guī)條件培養(yǎng)F4細(xì)胞,待其生長面積達(dá)到50%時(shí),根據(jù)實(shí)驗(yàn)一結(jié)果重新進(jìn)行磁場分組,即F組(15 Hz,0.1 m T)與G組(50 Hz,1 m T),同時(shí)設(shè)置對(duì)照組,輻照時(shí)間同上。輻照完成后,分別對(duì)各組細(xì)胞樣本進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測,分析細(xì)胞凋亡比例與細(xì)胞周期變化。通過Transwell小室檢測F4細(xì)胞侵襲能力,并進(jìn)行結(jié)晶紫染色,顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)。結(jié)果:F組、G組細(xì)胞凋亡比例高于對(duì)照組,差異具有顯著性(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。F組細(xì)胞周期變化較G組與對(duì)照組明顯,G組與對(duì)照組則無明顯變化。F組與G組穿過Transwell小室的細(xì)胞均少于對(duì)照組,以F組最少,G組次之,差異具有顯著性(P0.05)。結(jié)論:參數(shù)為15 Hz,0.1 m T的ELF-EMF可以更好地誘導(dǎo)F4細(xì)胞凋亡、影響細(xì)胞周期、降低細(xì)胞侵襲能力。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R738.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 孫成群;郭風(fēng)勁;許濤;王俊方;陳安民;;極低頻率電磁場對(duì)離體腫瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用[J];腫瘤防治研究;2007年01期

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本文編號(hào)：1246368