本文關(guān)鍵詞：黃芪多糖聯(lián)合順鉑對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖的抑制作用及對(duì)Bax、Bcl-2、Caspase-3的影響

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【摘要】：目的:以人肺腺癌A549細(xì)胞為研究對(duì)象,探討黃芪多糖與順鉑對(duì)該細(xì)胞的增殖抑制、周期調(diào)控、誘導(dǎo)凋亡的影響,并對(duì)兩藥聯(lián)合作用的機(jī)制進(jìn)行了初步的研究,從而為非小細(xì)胞肺癌的化療提供新的思路,為以后臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細(xì)胞,取處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)分四組:陰性對(duì)照組;黃芪多糖組;順鉑組;黃芪多糖+順鉑組。MTT法檢測(cè)黃芪多糖、順鉑及兩藥聯(lián)合對(duì)細(xì)胞的增殖影響,并用Q值公式評(píng)估兩藥聯(lián)合的作用效果;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞周期及凋亡率的影響;RT-PCR技術(shù)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的m RNA表達(dá)水平;Western blot檢測(cè)Bax、Bcl-2、Caspase-3的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1、黃芪多糖、順鉑對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖呈時(shí)間-濃度依賴抑制作用;聯(lián)合用藥的增殖抑制作用優(yōu)于單一用藥,兩藥聯(lián)合作用表現(xiàn)為單純相加。2、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)處理48h的A549細(xì)胞,黃芪多糖作用后可出現(xiàn)G1期細(xì)胞阻滯(P0.01);順鉑作用后出現(xiàn)S期細(xì)胞阻滯(P0.01);兩藥物聯(lián)用將細(xì)胞阻滯于G1和S期(P0.01)。黃芪多糖、順鉑均能誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡,且同一作用時(shí)間兩者聯(lián)合的凋亡率高于單一用藥(P0.01)。3、黃芪多糖、順鉑均可促進(jìn)人肺癌A549細(xì)胞Bax、Caspase-3 m RNA表達(dá)和抑制Bcl-2 m RNA表達(dá),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。與單一用藥組比較,黃芪多糖及順鉑聯(lián)合作用效果更強(qiáng),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4、與陰性對(duì)照組比較,黃芪多糖、順鉑均可明顯促進(jìn)人肺癌A549細(xì)胞Bax、Caspase-3蛋白表達(dá),而抑制Bcl-2蛋白表達(dá);與單一藥物組及陰性對(duì)照組比較,黃芪多糖與順鉑聯(lián)合作用效果更強(qiáng),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:黃芪多糖、順鉑具有抑制人肺腺癌A549細(xì)胞增殖及促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用,兩藥聯(lián)合效果明顯增強(qiáng)。黃芪多糖協(xié)同順鉑促人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)制可能與下調(diào)Bcl-2表達(dá)、上調(diào)Bax表達(dá)、增強(qiáng)Caspase-3表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1187678