本文關鍵詞：端粒酶基因多態(tài)性與肝細胞性肝癌預后的相關性分析

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【摘要】：背景與目的原發(fā)性肝癌是嚴重威脅人類健康的常見的惡性腫瘤,90%以上的原發(fā)性肝癌都為肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma HCC)。在中國,HCC居全部癌癥發(fā)病率中的第2位。全球HCC為癌癥死亡率的第一位。HCC的預后較差,即使早期或者腫瘤3cm行手術切除的病人5年的生存率也只有47%到53%,2年的腫瘤復發(fā)率高達55%。隨著腫瘤基因組學和蛋白組學的應用研究進展,越來越多的學者更加關注分子水平危險因素對惡性腫瘤轉移、復發(fā)、生存時間等預后的影響,以期更早制定干預措施,提高肝癌患者生存率。端粒酶是一種逆轉錄酶,能利用自身RNA為模板從頭合成DNA序列,彌補端粒DNA在復制中的丟失,解決末端復制問題,維持端粒長度的穩(wěn)定,賦予細胞無限增殖的能力。端粒失功能或端粒酶激活是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要病理機制,端粒酶基因變異有可能參與到這些機制中,促進腫瘤發(fā)生或對腫瘤發(fā)生起保護作用。因此,可以假設：端粒酶基因變異可能導致端粒酶表達異常、表達調節(jié)異常或端粒酶活性異常,進而改變端粒長度與功能,影響腫瘤發(fā)展及預后。本研究目的為：通過對HCC患者癌組織樣本中端粒酶基因5個SNP位點多態(tài)性的分析,探討這些基因位點變異對肝癌患者手術治療后轉移、復發(fā)、死亡結局的影響,為肝癌患者預后分析與干預提供臨床應用基礎信息。方法1.研究對象的收集與隨訪：收集昆明醫(yī)科大學附屬甘美醫(yī)院就診并病理明確診斷的肝癌患者共84例,收集患者的性別、年齡、腫瘤家族史、乙肝病毒兩對半、丙肝病毒抗體、巴塞羅那肝癌分期、治療措施類型(包括手術切除、酒精注射／射頻、化療栓塞等)等基本信息,電話隨訪患者的術后轉移、復發(fā)或死亡等情況,隨訪時間為2006年7月1日-2015年1月30日。2.選擇AS-PCR方法進行HCC組織樣本中端粒酶基因5個SNP位點多態(tài)性的檢測。自主設計引物,組建并優(yōu)化PCR反應體系及擴增條件,構建出適用于端粒酶基因5個SNP位點多態(tài)性檢測的10個AS-PCR檢測體系,并通過PCR產物測序分析驗證其檢測結果的正確性。3.用經驗證后的AS-PCR方法,對HCC組織樣本進行端粒酶基因5個SNP位點基因多態(tài)性檢測并分析其等位基因和基因型頻率的分布規(guī)律。4.用COX回歸分析方法分析端粒酶基因5個SNP基因與多態(tài)性與預后相關性,探討其在肝細胞性肝癌患者預后中的作用。結果1.84例研究對象中,男性69例,女性15例,平均年齡為49歲,最大為77歲,最小為31歲。獲得隨訪信息的病例有53例；其肝癌組織成功提取DNA病例有59例；既有隨訪病例也有基因多態(tài)性分析的病例有41例,其中,男性33例,女性8例,到隨訪結束時,出現死亡的病例13例,術后復發(fā)5例,轉移6例,刪失值17例。2.AS-PCR優(yōu)化結果,最適退火溫度分別為：SNP位點rs2735940為53℃,rs2736100為61℃,rs2736098為63℃,rs35719940為62.8℃,rs2293607為66.3℃；采用濃度20μm作為最適引物濃度；選擇TaqDNA聚合酶0.25μl(1.25U)為最適酶濃度,成功構建了分別針對野生型引物和突變型引物的AS-PCR反應體系和針對端粒酶基因每個SNP位點引物的退火條件。自主構建的AS-PCR方法對端粒酶基因5個SNP位點多態(tài)性檢測結果與PCR擴增產物測序分析結果一致3.59例HCC組織成功提取DNA的患者中,其癌組織樣本端粒酶基因5個SNP位點基因突變頻率在42%-60%之間。野生基因型頻率在2.4%-24.2%,雜合基因型占51.2%-97.6%；突變純合基因型頻率為0%-34.2%,其中位點rs2736098和rs35719940沒有檢測到突變純合基因型患者。4.到隨訪截止期,既有隨訪病例也有基因多態(tài)性分析的41例HCC患者平均生存時間為24個月,生存率隨著隨訪時間增加而逐漸下降。COX回歸分析結果顯示,以死亡為結局時,SNP位點rs2735940基因突變對死亡的回歸系數p為2.044,p=0.018(0.05),具有統(tǒng)計學意義,相對危險度(Exp(B))為7.720,95.0% CI為1.427-41.757。5.端粒酶基因SNP位點rs2735940分別與性別、年齡、家族史、巴塞羅那分期和治療措施進行兩因素COX回歸分析,結果顯示：①rs2735940位點突變與巴塞羅那分期同時分析時,其回歸系數p分別為1.164和0.991,相對危險度(Exp(B))分別為3.204(95.0% CI為0.854-12.022)和2.693(95.0% CI為1.321-5.492),p值分別為0.084和0.006,僅巴塞羅那分期的回歸系數p具有統(tǒng)計學意義；②rs2735940與治療措施同時分析時,其回歸系數β分別為1.882和-1.631,相對危險度(Exp(B))分別為3.651(95.0% CI為0.916-14.501)和0.196(95.0% CI為0.054-0.704),p值分別為0.067和0.013,僅治療措施具有統(tǒng)計學意義。③rs2735940位點突變分別與性別、年齡、家族史的兩因素回歸分析顯示,僅有rs2735940位點突變的回歸系數(p分別為5.746、2.656、6.564)的有統(tǒng)計學意義(p值分別為0.010、0.007、0.004),而性別、年齡、家族史回歸系數(β分別為0.012、0.977、0.685)的無統(tǒng)計學意義(p值分別為0.695、0.354、0.396)。結論1.本研究中自主構建的端粒酶基因5個SNP位點突變AS-PCR檢測方法中引物是可用的,且有特異性的。2.本研究中自主構建的端粒酶基因5個SNP位點突變AS-PCR檢測方法,檢測結果可靠,經濟適用,操作簡便,有臨床推廣應用前景。3端粒酶基因啟動子區(qū)域rs2735940 3677位點T→C突變增加了患者術后死亡的風險。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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1 Tarantino L;Francica G;Esposito F. ;趙雙;;經皮行肝細胞性肝癌消融后的種植轉移:彩色多普勒超聲檢查結果[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(胃腸病學分冊);2006年04期

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7 張沖,張金山,黃威權,苗繼延;5-羥色胺及其受體與人肝細胞性肝癌增殖的關系[J];中華肝臟病雜志;2000年06期

8 陳立章 ,莫顯昆 ,范學工;肝細胞性肝癌的危險因素[J];中國醫(yī)師雜志;2002年12期

9 蔡秀軍,洪玉才,王先法;人肝細胞性肝癌性激素受體的表達[J];肝膽外科雜志;2002年05期

10 沈正榮,彭淑牖;復發(fā)性肝細胞性肝癌的處理[J];浙江臨床醫(yī)學;2002年10期

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4 鐘紅;陳勝利;杜薇云;黃子誠;吳戴紅;;肝細胞性肝癌肝靜脈下腔靜脈右心房瘤栓的超聲診斷[A];中華醫(yī)學會第六次全國超聲醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2001年

5 郭曉東;孟園;熊璐;周光德;趙雨來;劉樹紅;趙景民;;VEGF和p53在肝細胞性肝癌組織中的異常表達與預后的關系[A];第八屆全國生物醫(yī)學體視學學術會議、第十一屆全軍軍事病理學學術會議、第七屆全軍定量病理學學術會議論文（摘要）匯編[C];2012年

6 彭傳會;周琳;鄭樹森;;ZDHHC2在肝細胞性肝癌中的表達分析及其質粒構建和功能鑒定[A];2013中國器官移植大會論文匯編[C];2013年

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8 黃建國;;乳腺癌肝轉移與肝細胞性肝癌超聲造影特性的分析[A];中華醫(yī)學會第十三次全國超聲醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2013年

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