本文關鍵詞：共培養(yǎng)系統(tǒng)中血管內(nèi)皮細胞對乳腺癌細胞影響的研究

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【摘要】：腫瘤組織的發(fā)生發(fā)展是一個復雜的過程,腫瘤細胞與內(nèi)皮細胞之間存在一系列的相互作用。腫瘤細胞和內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)的研究焦點在于腫瘤細胞在內(nèi)皮細胞血管生成過程中的作用,很少有研究關注內(nèi)皮細胞與腫瘤細胞相互作用過程中,內(nèi)皮細胞對腫瘤細胞惡性的影響,而且大部分的相互作用研究停留在二維培養(yǎng)水平。共培養(yǎng)體系的構建需要考慮多種因素,為了構建適合于乳腺癌細胞4T1和血管內(nèi)皮細胞HUVECs共培養(yǎng)的系統(tǒng),本研究利用海藻酸鈉、明膠、殼聚糖、透明質酸等生物材料制備水凝膠,用于包裹4T1和HUVECs。從細胞來源、細胞比例及總數(shù)、生存環(huán)境、相互作用方式等方面設置不同的共培養(yǎng)組,從腫瘤細胞生長情況進行分析,在三維環(huán)境中構建了適合4T1與HUVECs相互作用的共培養(yǎng)體系。本研究主要對與HUVECs共培養(yǎng)后的4T1基質金屬蛋白酶MMP9,多藥耐藥蛋白MDR1,乳腺癌干細胞標志物CD44和CD24蛋白的表達進行檢測,發(fā)現(xiàn)共培養(yǎng)后的4T1細胞的MMP9、MDR1、CD44的表達量升高,而CD24的表達降低。相關mRNA的表達結果與蛋白檢測結果一致,證明與HUVECs共培養(yǎng)促進4T1惡性相關分子標志物的表達。利用共培養(yǎng)系統(tǒng)將HUVECs與乳腺癌干細胞4T1-CSC共培養(yǎng),免疫熒光檢測MMP9、MDR1、CD44和CD24蛋白表達進行檢測,通過qRT-PCR檢測MMP9、MDR1、CD44、CD24、,乳腺癌干細胞標志物Sca1、干細胞分子標志物Nestin、Tert、Nanong和Sox2的m RNA的表達,實驗結果表明共培養(yǎng)后的4T1-CSC惡性相關標志物及干細胞相關標志物表達上調。與HUVECs共培養(yǎng)促進4T1及4T1-CSC的惡性相關標志物表達,說明HUVECs對腫瘤細胞的促進支持作用,這可能可以作為腫瘤治療的靶點,為腫瘤治療的研究提供研究思路。
【學位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9

【共引文獻】

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：1172976