本文關(guān)鍵詞：雷替曲塞對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 雷替曲塞 胃癌 細(xì)胞凋亡 線粒體

【摘要】：目的本研究旨在通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究雷替曲塞對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響,并對(duì)有關(guān)作用的特點(diǎn)及其機(jī)制進(jìn)行深入探討,為雷替曲塞治療胃癌的臨床研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論支持。方法(1)體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞,采用CCK-8法檢測(cè)雷替曲塞在不同濃度和作用時(shí)間下對(duì)各組細(xì)胞的增殖抑制作用。(2)通過(guò)Hoechst 33258熒光染色法,觀察雷替曲塞對(duì)胃癌細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)的改變。(3)采用流式細(xì)胞儀法,檢測(cè)雷替曲塞作用胃癌細(xì)胞后凋亡程度變化及細(xì)胞周期分布阻滯情況;并進(jìn)一步分析雷替曲塞對(duì)線粒體膜電位及活性氧含量的影響。(4)Western Blot法檢測(cè)雷替曲塞應(yīng)用對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、cyt-c和caspase-3表達(dá)的影響。(5)構(gòu)建胃癌裸鼠移植瘤模型,觀察不同劑量雷替曲塞在體內(nèi)對(duì)胃癌生長(zhǎng)的抑制作用;免疫組化法檢測(cè)對(duì)照組與不同劑量實(shí)驗(yàn)組之間Ki67、PCNA表達(dá)的差異;TUNEL法觀察腫瘤組織中胃癌細(xì)胞的凋亡情況;并通過(guò)Western Blot法檢測(cè)Bax和caspase-3蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果(1)雷替曲塞對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞具有增殖抑制作用,呈現(xiàn)明顯的時(shí)間和劑量依賴性。(2)雷替曲塞能夠誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞發(fā)生凋亡,Hoechst 33258染色可見(jiàn)核固縮、核碎裂及凋亡小體等典型的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化。(3)雷替曲塞明顯地阻滯細(xì)胞周期于G0/G1期,而使較少的細(xì)胞停留在G2/M期。(4)雷替曲塞可使細(xì)胞線粒體膜電位下降、活性氧含量升高。(5)雷替曲塞能夠增強(qiáng)細(xì)胞中Bax、cyt-c、caspase-3蛋白的表達(dá),并抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)。(6)通過(guò)建立胃癌裸鼠移植瘤模型,發(fā)現(xiàn)雷替曲塞能夠顯著抑制胃癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng);免疫組化結(jié)果顯示,雷替曲塞抑制了移植瘤組織中Ki67、PCNA表達(dá)水平;TUNEL法驗(yàn)證了雷替曲塞具有誘導(dǎo)移植瘤細(xì)胞凋亡的作用,其可能與增強(qiáng)Bax、caspase-3蛋白的表達(dá)水平有關(guān)。結(jié)論(1)體外實(shí)驗(yàn)中,雷替曲塞對(duì)胃癌細(xì)胞具有一定的增殖抑制作用,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,阻滯細(xì)胞周期于G0/G1期,并使細(xì)胞線粒體膜電位下降、活性氧含量升高;其機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)Bax、cyt-c、caspase-3表達(dá)、下調(diào)Bcl-2表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,雷替曲塞能夠抑制胃癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng),降低Ki67、PCNA的表達(dá);同時(shí)通過(guò)提高Bax、caspase-3的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。(3)本研究為雷替曲塞治療胃癌提供了實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù),亦為今后開(kāi)展相關(guān)臨床研究提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 王佳蕾;李進(jìn);秦叔逵;程穎;張清媛;劉天舒;楊春康;葉正寶;徐農(nóng);鄭磊貞;胡春宏;張沂平;陶敏;于志堅(jiān);莊志祥;;雷替曲塞或氟尿嘧啶/亞葉酸鈣聯(lián)合奧沙利鉑治療局部晚期或復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的隨機(jī)對(duì)照多中心Ⅲ期臨床試驗(yàn)[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2012年01期

2 霍丹;張小麗;馬玉芳;張高;王繼紅;;雷替曲塞聯(lián)合多西他賽治療晚期胃癌的臨床研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2011年10期

3 高立冬;吳紅衛(wèi);;雷替曲塞聯(lián)合紫杉醇一線治療晚期胃癌的臨床觀察[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2013年18期

4 孫靜;勝照杰;;雷替曲塞聯(lián)合多西他賽治療進(jìn)展期胃癌的臨床觀察[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2013年22期

，

本文編號(hào)：1164447