本文關(guān)鍵詞：TRPV5、TRPV6對結(jié)腸癌SW480細胞生物學(xué)行為的影響

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【摘要】：目的:在TRP超家族中,TRPV5和TRPV6是唯一已知的鈣離子高選擇性通道,因此,本實驗通過觀察結(jié)腸癌SW480細胞TRPV5和TRPV6通道蛋白的表達,并改變TRPV5和TRPV6通道的功能狀態(tài),以觀察對結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+濃度及SW480細胞生長、凋亡的調(diào)節(jié)作用。旨在研究TRPV5、TRPV6對結(jié)腸癌SW480細胞生物學(xué)行為的影響,為進一步研究TRPV5、TRPV6在結(jié)腸癌的診斷和治療提供理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。方法:(1)采用實時熒光定量PCR技術(shù)、Western-Bolt技術(shù)及細胞免疫組化技術(shù),檢測TRPV5/TRPV6激動劑1,25(OH)2D3(10-8mol/l)和Ca Cl2(10mmol/l)以及其抑制劑Cu Cl2(100μmol/l)對結(jié)腸癌SW480細胞中TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量表達的比較。(2)通過激動劑及抑制劑改變TRPV5和TRPV6通道的功能狀態(tài)后,用高速離子成像系統(tǒng)觀察TRPV5/TRPV6對結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+的濃度變化;(3)對結(jié)腸癌SW480細胞進行同步化處理后,采用細胞增殖實驗(MTT比色法)、細胞遷移實驗(劃痕修復(fù)法)及細胞凋亡實驗(生化檢測Tunel法),觀察激動劑1,25(OH)2D3和Ca Cl2以及抑制劑Cu Cl2對結(jié)腸癌SW480細胞增殖、遷移、凋亡的影響。結(jié)果:(1)TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量在激動劑1,25(OH)2D3組及Ca Cl2組較對照組表達明顯增高(P0.05);抑制劑Cu Cl2組較對照組表達明顯降低(P0.05);激動劑1,25(OH)2D3組與Ca Cl2組比較無明顯差異(P0.05);激動劑1,25(OH)2D3組和Ca Cl2組TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白含量明顯增高,與抑制劑Cu Cl2組比較差異有顯著性(P0.01);(2)在激動劑1,25(OH)2D3作用下,結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+的濃度較對照組增加(P0.05);在抑制劑Cu Cl2作用下,結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+的濃度較對照組降低(P0.05);(3)激動劑1,25(OH)2D3和Ca Cl2對結(jié)腸癌SW480細胞有促增殖、遷移及抑制凋亡作用(P0.05),并呈濃度時間依賴性;抑制劑Cu Cl2對結(jié)腸癌SW480細胞有抑制增殖、遷移及誘導(dǎo)凋亡作用(P0.05),并呈濃度時間依賴性。結(jié)論:(1)激動劑1,25(OH)2D3和Ca Cl2能使結(jié)腸癌SW480細胞中TRPV5m RNA、TRPV6m RNA及蛋白的表達上調(diào);使結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+濃度增加,促進結(jié)腸癌SW480細胞增殖、遷移及抑制其凋亡。(2)抑制劑Cu Cl2能使結(jié)腸癌SW480細胞中TRPV5 m RNA、TRPV6m RNA及蛋白的表達下調(diào);使結(jié)腸癌SW480細胞內(nèi)Ca2+濃度降低;抑制結(jié)腸癌SW480細胞增殖、遷移及誘導(dǎo)其凋亡。(3)TRPV5、TRPV6在結(jié)腸癌SW480細胞中均有表達,但以TRPV6較明顯。TRPV5、TRPV6通道蛋白表達的變化,可能通過增加或降低細胞內(nèi)Ca2+含量,進一步調(diào)節(jié)結(jié)腸癌SW480細胞生物學(xué)行為。
【關(guān)鍵詞】：鈣離子通道 TRPV5 TRPV6 細胞內(nèi)鈣 結(jié)腸癌SW480細胞
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 中英縮略詞對照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-26
• 實驗結(jié)果26-41
• 討論41-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻46-50
• 綜述50-60
• 參考文獻56-60
• 致謝60-61
• 作者簡介61

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 賈勇圣;魏曉莉;趙杰;鄭建全;;離子通道與腫瘤[J];生理科學(xué)進展;2007年03期

2 林麗瓊;黃維甄;陳健鵬;;TRPV6對人卵巢癌細胞株HO-8910PM遷移的影響[J];山東醫(yī)藥;2012年01期

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本文編號：1091800