發(fā)布時間：2017-10-14 19:45

  本文關鍵詞：自交聯(lián)透明質酸凝膠對胃癌和肝癌細胞轉移和增殖抑制作用的研究

  更多相關文章： 自交聯(lián)透明質酸凝膠 遷移 侵襲 增殖 胃癌 肝癌

【摘要】：研究目的在體外細胞水平,闡明自交聯(lián)透明質酸凝膠(Cross-linked hyaluronic acid gel,CHAG)對胃癌和肝癌細胞的增殖、遷移、侵襲等生物學活動的影響及其機制。在動物活體水平,進一步闡明自交聯(lián)透明質酸凝膠對胃癌和肝癌細胞定植、生長和轉移的影響,進而明確CHAG是否可以用于防止腹部腫瘤切除術后的腸道粘連。研究方法以胃癌細胞株AGS和肝癌細胞株Hep G2作為研究對象;采用Transwell實驗和MTT實驗在體外水平研究CHAG對細胞遷移、侵襲及增殖活動的的影響;采用腹腔移植瘤裸鼠模型實驗,觀察CHAG對腫瘤細胞定植、生長和轉移的影響;采用Western Blotting、Pull-down assay和si RNA干擾等方法探討CHAG對腫瘤細胞上述生物學活動的作用機制。研究結果Transwell實驗結果表明,CHAG抑制表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)誘導的胃癌和肝癌細胞的遷移和侵襲活動。MTT實驗結果表明,CHAG抑制EGF誘導的胃癌和肝癌細胞的增殖活動。腹腔移植瘤裸鼠模型實驗結果表明,CHAG抑制胃癌和肝癌細胞在腹腔的定植和增殖。Pull-down assay結果表明,CHAG抑制溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)誘導的Rho A激活和EGF誘導的Rac1激活。Western Blotting實驗結果表明,CHAG通過抑制表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)的激活,阻斷EGF/EGFR誘導的MAPK/ERK和PI3K/Akt通路的信號轉導,減少EGF誘導的MMP2和PCNA的表達。此外,CHAG對包括整合素(Integrin)和血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在內的其它細胞膜受體的激活也有抑制作用。si RNA實驗的結果表明,當透明質酸受體(CD44或RHAMM)的表達被干擾時,CHAG的上述抑制的作用仍然存在,表明CHAG并非通過與HA受體結合而發(fā)揮其抑制作用,提示CHGA可能通過物理性黏附而阻斷生長因子與其受體的結合,進而發(fā)揮抑癌作用。結論CHAG可以抑制胃癌和肝癌細胞的生長和轉移,該作用可能是通過CHAG物理性地覆蓋在細胞表面,阻斷配體與受體的結合而實現(xiàn)的。
【關鍵詞】：自交聯(lián)透明質酸凝膠 遷移 侵襲 增殖 胃癌 肝癌
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R73-3
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-13
• 第一章 緒論13-21
• 1.1 HA的研究背景13-19
• 1.1.1 透明質酸的結構、合成與分解13-14
• 1.1.2 透明質酸的主要功能14
• 1.1.3 透明質酸的受體14-15
• 1.1.4 透明質酸與腫瘤的聯(lián)系15-19
• 1.2 研究目的19
• 1.3 研究內容和技術路線19-21
• 1.3.1 研究內容19-20
• 1.3.2 技術路線20-21
• 第二章 CHAG對胃癌和肝癌細胞增殖、遷移和侵襲等生物學活動的影響21-36
• 2.1 材料與方法21-27
• 2.1.1 材料21-25
• 2.1.2 方法25-27
• 2.2 結果27-33
• 2.2.1 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的遷移活動27-28
• 2.2.2 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的侵襲活動28-29
• 2.2.3 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的增殖活動29-30
• 2.2.4 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的Rac1的活化30-31
• 2.2.5 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的MMP2的表達31-32
• 2.2.6 CHAG抑制由EGF/EGFR啟動的PCNA的表達32-33
• 2.3 討論33-36
• 第三章 CHAG對胃癌和肝癌細胞定植和腹腔移植瘤生長的影響36-46
• 3.1 材料與方法36-37
• 3.1.1 材料36
• 3.1.2 方法36-37
• 3.2 結果37-44
• 3.2.1 CHAG對胃癌和肝癌細胞在腹腔定植的影響37-40
• 3.2.2 CHAG對胃癌和肝癌細胞在腹腔增殖的影響40-44
• 3.3 討論44-46
• 第四章 CHAG對胃癌和肝癌細胞表面主要受體及相關信號分子的影響46-59
• 4.1 材料與方法46-48
• 4.1.1 材料46-47
• 4.1.2 方法47-48
• 4.2 結果48-56
• 4.2.1 CHAG阻斷EGF誘導的與PI3K/Akt通路相關的EGFR Tyr 1173 位點的磷酸化48-49
• 4.2.2 CHAG抑制EGF/EGFR誘導的PI3K/Akt通路中的Akt（Ser473）的磷酸化49-50
• 4.2.3 CHAG阻斷EGF誘導的與MAPK/ERK通路相關的EGFR Tyr1068位點的磷酸化50-51
• 4.2.4 CHAG抑制EGF/EGFR誘導的MAPK/ERK通路中的Erk1/2（T202/Y204）的磷酸化51-52
• 4.2.5 CHAG阻斷LPA誘導的Rho A的活化52-53
• 4.2.6 CHAG阻斷FN誘導的Integrin β1 的磷酸化53-54
• 4.2.7 CHAG阻斷VEGF誘導的VEGFR2的磷酸化54
• 4.2.8 siRNA干擾CD44表達后對CHAG抑制EGFR磷酸化的影響54-55
• 4.2.9 siRNA干擾RHAMM表達后對CHAG抑制EGFR磷酸化的影響55-56
• 4.3 討論56-59
• 第五章 結論與展望59-60
• 5.1 主要結論59
• 5.2 展望59-60
• 參考文獻60-72
• 致謝72-74
• 碩士期間發(fā)表的學術論文74

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2 任晨春;對腹膜手術后的大鼠采用交聯(lián)透明質酸減少粘連的形成[J];國外醫(yī)學(計劃生育分冊);2000年03期

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4 葛翠蘭;顧其勝;;交聯(lián)透明質酸凝膠中交聯(lián)劑的HPLC測定[J];上海生物醫(yī)學工程;2006年04期

5 ;[J];;年期

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1 顧其勝;;交聯(lián)透明質酸交聯(lián)劑殘留量和抗酶解能力的檢測[A];2006年上海市醫(yī)用生物材料研討會論文匯編[C];2006年

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3 劉玲秀;胡幗穎;劉欣;顧漢卿;;交聯(lián)透明質酸-聚N-異丙基丙烯酰胺可注射水凝膠的制備研究[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第30次學術年會暨生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2010年

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1 龐吉;自交聯(lián)透明質酸凝膠對胃癌和肝癌細胞轉移和增殖抑制作用的研究[D];江蘇大學;2016年

2 孟甜甜;新型交聯(lián)透明質酸顆粒的制備及其性能研究[D];河南工業(yè)大學;2014年

3 劉鶴;輻照交聯(lián)透明質酸的性能研究[D];北京化工大學;2011年

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本文編號：1032852