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電針對坐骨神經(jīng)損傷大鼠感覺運(yùn)動傳導(dǎo)通路中GAP-43表達(dá)影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-11 00:20

  本文關(guān)鍵詞:電針對坐骨神經(jīng)損傷大鼠感覺運(yùn)動傳導(dǎo)通路中GAP-43表達(dá)影響的研究


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【摘要】:[目的] 本實(shí)驗(yàn)用坐骨神經(jīng)夾持損傷模型,模擬臨床坐骨神經(jīng)損傷,并通過電針給予定時(shí)、定性、定量的治療。從感覺運(yùn)動傳導(dǎo)通路的角度探索電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用機(jī)理,并通過生長相關(guān)蛋白的表達(dá)研究電針治療周圍神經(jīng)損傷的起效因子、起效途徑和起效時(shí)間等,為臨床應(yīng)用電針治療周圍神經(jīng)損傷疾病,改善患者的癥狀及預(yù)后提供有力科學(xué)證據(jù)。 [方法] 制備大鼠坐骨神經(jīng)夾持損傷模型,選取患側(cè)環(huán)跳、殷門、陽陵泉、承山穴進(jìn)行電針治療,通過對其光熱耐痛閾和斜板試驗(yàn)的檢測,從行為學(xué)角度評價(jià)電針治療后大鼠感覺和運(yùn)動恢復(fù)情況;通過對脊髓腹角、背根神經(jīng)節(jié)、損傷點(diǎn)神經(jīng)、神經(jīng)肌肉接頭、肌肉這五個(gè)關(guān)鍵部位進(jìn)行染色觀察,從形態(tài)學(xué)角度觀察電針對神經(jīng)元再生修復(fù)的影響;通過免疫組織化學(xué)法檢測感覺運(yùn)動傳導(dǎo)通路關(guān)鍵部位中生長相關(guān)蛋白表達(dá)的變化,綜合分析得出電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用機(jī)制和起效途徑等。 [結(jié)果] 1.行為學(xué) 斜板試驗(yàn)結(jié)果表明,造模后7d模型組與正常組相比有明顯差異(P0.05),說明坐骨神經(jīng)損傷后,大鼠的運(yùn)動功能和肌力受到影響,造模成功。電針治療10次后,電針治療組與模型組和模型對照組相比均有顯著性升高(P0.05),且已接近正常組水平。電針治療20次后,電針治療組已達(dá)到甚至超過正常組水平,且與模型組和模型對照組相比仍有顯著性差異(P0.05)。說明電針可以有效促進(jìn)坐骨神經(jīng)損傷大鼠運(yùn)動功能和下肢肌力的恢復(fù)。 光熱耐痛閾結(jié)果如下:造模后7d、電針治療10次、20次后,左側(cè)(健側(cè))光熱耐痛閾各組間均沒有差異;造模后7d右側(cè)(患側(cè))光熱耐痛閾和痛敏分?jǐn)?shù),模型組與正常組相比均有明顯差異(P0.05),說明坐骨神經(jīng)損傷后,大鼠的感覺功能受到影響。電針治療10次、20次后,大鼠右側(cè)光熱耐痛閾電針治療組與模型組和模型對照組相比均有降低(P0.05),痛敏分?jǐn)?shù)電針治療組與模型組相比有顯著性降低(P0.05),說明電針可以促進(jìn)坐骨神經(jīng)損傷大鼠感覺功能的恢復(fù)。 2.形態(tài)學(xué) 腓腸肌濕重結(jié)果如下:造模后7d、電針治療10次、20次后,各組大鼠左側(cè)腓腸肌濕重均沒有差異。造模后7d,假手術(shù)組與模型組大鼠右側(cè)腓腸肌濕重均有一定程度的降低,且模型組更為明顯.,模型組與正常組和假手術(shù)組相比,其腓腸肌濕重和腓腸肌恢復(fù)率均具有顯著性差異(P0.05)。電針治療10次后,治療組大鼠腓腸肌濕重和恢復(fù)率均有升高,且與模型組和模型對照組相比有顯著性差異(P0.05),但各組大鼠的腓腸肌濕重和恢復(fù)率與正常組相比仍存在差異(P0.05)。電針治療20次后,電針治療組大鼠腓腸肌濕重和恢復(fù)率仍高于模型組和模型對照組,但與正常組相比仍有一定差距(P0.05)。 造模后7d,大鼠右側(cè)腓腸肌肌細(xì)胞直徑模型組明顯小于正常組和假手術(shù)組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。電針治療10次后,治療組大鼠右側(cè)腓腸肌肌細(xì)胞直徑與模型組和模型對照組相比有顯著性增高(P0.05),但與正常組相比仍有差距(P0.05)。電針治療20次后,各組大鼠右側(cè)腓腸肌肌細(xì)胞直徑皆逐漸升高,且電針治療組明顯優(yōu)于模型組和模型對照組(P0.05),但尚未達(dá)到正常組水平。 背根神經(jīng)節(jié)HE染色結(jié)果:正常組背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)大部分神經(jīng)元呈圓形,體積較大,胞質(zhì)呈嗜酸性,胞核大而圓,呈嗜堿性,染色較淺,核仁清楚,胞體周圍有衛(wèi)星細(xì)胞分布;模型組神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、變形和溶解,神經(jīng)元發(fā)生不同程度的壞死,細(xì)胞的形態(tài)大小不一,胞漿染色不均勻;經(jīng)電針治療后,神經(jīng)元細(xì)胞腫脹及變形等現(xiàn)象不明顯,胞體形狀較規(guī)則,大多為圓形。 脊髓HE染色結(jié)果:正常組脊髓腹角內(nèi)神經(jīng)元細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞核位于中央,核仁清晰,尼氏體分布均勻;模型組脊髓腹角神經(jīng)元排列不規(guī)則,數(shù)量減少,細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、變性等現(xiàn)象,染色較淺,胞核移向邊緣,尼氏體溶解消失;經(jīng)電針治療后,脊髓腹角神經(jīng)元變性、損傷程度較輕,排列較規(guī)則,部分細(xì)胞核移向邊緣,可見少量細(xì)胞核再生。 腓腸肌HE染色結(jié)果:正常組腓腸肌肌細(xì)胞大小一致,排列整齊,胞核清晰,胞漿染色均勻,肌纖維間隙適中;模型組腓腸肌肌細(xì)胞直徑明顯縮小,分布不均勻,胞核清晰,但數(shù)量明顯增多,肌纖維間隙增大,呈現(xiàn)萎縮現(xiàn)象;經(jīng)電針治療后腓腸肌肌細(xì)胞直徑較均勻,胞核清晰,肌纖維萎縮程度較輕。 坐骨神經(jīng)HE染色結(jié)果:正常組坐骨神經(jīng)內(nèi)軸突及雪旺細(xì)胞排列整齊;模型組中部分軸突及雪旺細(xì)胞排列不規(guī)則,雪旺細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、潰破,甚至崩裂,膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)明顯增生;電針組雪旺細(xì)胞及軸突基本正常。 運(yùn)動終板鍍銀染色結(jié)果:正常組運(yùn)動終板呈棕褐色或黑色,結(jié)構(gòu)清晰,邊緣光滑,呈橢圓或卵圓形,肌肉紋理清晰,各部分之間著色均勻,結(jié)構(gòu)對比明顯,無固縮現(xiàn)象;模型組運(yùn)動終板分布不均勻,體積變小,結(jié)締組織增生顯著,染色模糊、淺淡,部分運(yùn)動終板崩解,只有殘跡可見,殘存大量胞核堆積;電針治療組運(yùn)動終板逐漸形成,殘跡逐漸減少。3.生長相關(guān)蛋白 正常組及假手術(shù)組大鼠GAP-43在背根神經(jīng)節(jié)、脊髓腹角、坐骨神經(jīng)、腓腸肌和神經(jīng)肌肉接頭中均有少量表達(dá),陽性神經(jīng)元的胞核呈藍(lán)色,胞漿呈棕褐色;造模7d后,模型組大鼠GAP-43在以上關(guān)鍵部位中的表達(dá)均較正常組和假手術(shù)組增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);電針治療10次后,模型組、模型對照組及電針治療組大鼠GAP-43在以上結(jié)構(gòu)中的平均光密度均較正常組顯著增高,且電針治療組的染色范圍和程度明顯優(yōu)于模型組,與其余四組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;電針治療20次后,以上結(jié)構(gòu)中電針治療組的GAP-43表達(dá)與其余四組比較仍有顯著性差異,且在腓腸肌和坐骨神經(jīng)中的平均光密度與治療10次相比,有一定程度的降低。 [結(jié)論] 電針可以提高坐骨神經(jīng)損傷大鼠腓腸肌的肌力,防止肌肉萎縮,并能提升大鼠的痛覺敏感程度,從而促進(jìn)坐骨神經(jīng)損傷大鼠運(yùn)動和感覺功能的恢復(fù);電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用途徑之一是通過營養(yǎng)和保護(hù)背根神經(jīng)節(jié)中的感覺神經(jīng)元、脊髓腹角中的運(yùn)動神經(jīng)元、損傷點(diǎn)神經(jīng)、腓腸肌中的肌細(xì)胞和神經(jīng)肌肉接頭處的神經(jīng)突觸,減少感覺和運(yùn)動神經(jīng)元的變性和死亡,誘導(dǎo)神經(jīng)元軸突的生長和突觸的形成,從而促進(jìn)損傷神經(jīng)的修復(fù);電針治療坐骨神經(jīng)損傷的起效機(jī)理之一為促進(jìn)感覺運(yùn)動傳導(dǎo)通路中關(guān)鍵部位的生長相關(guān)蛋白的表達(dá),為神經(jīng)元提供良好的微環(huán)境,從而促進(jìn)損傷神經(jīng)的再生修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】:電針 感覺 生長相關(guān)蛋白 運(yùn)動 坐骨神經(jīng)損傷
【學(xué)位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R274.9;R246.9
【目錄】:
  • 中文摘要5-8
  • ABSTRACT8-13
  • 文獻(xiàn)綜述13-37
  • 綜述一 坐骨神經(jīng)損傷的中醫(yī)學(xué)研究概況13-27
  • 1 概述13
  • 2 病因病機(jī)13-14
  • 3 辨證要點(diǎn)14
  • 4 治療原則14
  • 5 臨床治療14-20
  • 6 作用機(jī)理20-23
  • 參考文獻(xiàn)23-27
  • 綜述二 坐骨神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展27-37
  • 1 概述27
  • 2 坐骨神經(jīng)損傷的行為學(xué)研究27-28
  • 3 坐骨神經(jīng)損傷的形態(tài)學(xué)研究28-30
  • 4 坐骨神經(jīng)損傷后修復(fù)再生機(jī)制研究30
  • 5 關(guān)于生長相關(guān)蛋白(GAP-43)30-33
  • 參考文獻(xiàn)33-37
  • 前言37-39
  • 實(shí)驗(yàn)研究39-65
  • 材料和方法39-45
  • 實(shí)驗(yàn)一、電針治療坐骨神經(jīng)損傷大鼠的行為學(xué)評價(jià)39-41
  • 實(shí)驗(yàn)二、電針治療坐骨神經(jīng)損傷大鼠的機(jī)理研究41-42
  • 參考文獻(xiàn)42-43
  • 技術(shù)路線圖43-45
  • 結(jié)果45-59
  • 討論59-63
  • 結(jié)論63-65
  • 致謝65-67
  • 個(gè)人簡歷67-69
  • 附件69-77
  • 附件一、背根神經(jīng)節(jié)HE染色69-70
  • 附件二、背根神經(jīng)節(jié)GAP-43免疫組化染色70-71
  • 附件三、脊髓腹角HE染色71-72
  • 附件四、脊髓腹角GAP-43免疫組化染色72-73
  • 附件五、腓腸肌HE染色73-74
  • 附件六、腓腸肌GAP-43免疫組化染色74-75
  • 附件七、坐骨神經(jīng)HE染色75-76
  • 附件八、坐骨神經(jīng)GAP-43免疫組化染色76-77
  • 附件九、運(yùn)動終板鍍銀染色77

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