本文關鍵詞：電針對OLETF大鼠骨骼肌PKC、GLUT4干預作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《廣州中醫(yī)藥大學》 2013年

電針對OLETF大鼠骨骼肌PKC、GLUT4干預作用研究

黃新宇  

【摘要】：本研究是以PI3K胰島素信號轉導途徑為基礎,設計實驗觀察針刺對胰島素抵抗(IR)的干預作用；以自發(fā)性胰島素抵抗模型-OLETF大鼠為動物模型,用RT-PCR、 Western blotting等檢測方法,檢測指標空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)、C肽、胰島素敏感指數(ISI),以觀察針刺干預對OLETF大鼠骨骼肌中PKCλ/ζ和GLUT4的mRNA和蛋白表達的改變,由分子生物學水平探討針刺改善胰島素抵抗的機制原理。 目的： 研究針刺對OLETF大鼠骨骼肌PKCλ/ζ、GLUT4的mRNA和蛋白表達的作用影響,探討針刺改善IR的機理。 方法： 實驗選用雄性OLETF大鼠16只,正常雄性SD大鼠8只。將8只雄性SD大鼠作為空白組,16只雄性OLETF大鼠隨機分為：模型組和針刺組,每組8只�？瞻捉M和模型組不予針刺,針刺組給予針刺干預。針剌：腎俞、內關、足三里和三陰交穴(均取雙側)。針刺方式選用疏密波的電針(疏波2Hz,密波50Hz,調制頻率10次／分)加電穴位選取內關和足三里穴,電針刺激強度以大鼠肢體輕微抖動為標準,針刺時間每日1次,每次持續(xù)20min,針刺干預持續(xù)3周結束。在治療結束后,各組大鼠禁食不禁水12h。次日早晨,檢測針刺干預后FPG、FINS、C-P等指標,采血方法采用眼眶靜脈竇采血法,用葡萄糖氧化酶法測定FPG；用ELISA法測定FINS、C-P;用1/(CFPG×JFINS)公式計算ISI。取完血液樣品后對大鼠進行腹腔胰島素灌注操作,操作結束處死大鼠,取大鼠左側股四頭肌做樣本,保存后待用RT-PCR、Western blotting等方法以檢測指標,觀察針刺作用前后,OLETF大鼠骨骼肌PPKCλ/ζ和GLUT4的mRNA和蛋白表達改變情況。 結果： 3.1FPG、FINS、ISI、C-P的影響 檢測后結果顯示,模型組的FPG較空白組顯著升高(P0.05)、FINS、ISI、C-P較空白組顯著升高(P0.01)。針刺組的FPG、ISI較空白組顯著降低(P0.01),FINS和C-P與空白組相比均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。針刺組的FPG、FINS、ISI、C-P較模型組顯著降低(P0.01)。 3.2骨骼肌PPKCλ/ζ mRNA和蛋白的影響 針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCζ mRNA表達與空白組SD大鼠比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCζ mRNA表達較模型組OLETF大鼠顯著升高(P0.01)。 針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCλ mRNA表達與空白組SD大鼠相比顯著降低(P0.01)。針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCX mRNA表達與模型組OLETF大鼠比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCζ/λ蛋白表達比空白組SD大鼠升高(P0.05)。針刺組OLETF大鼠骨骼肌phospho-PKCζ/λ蛋白表達與模型組OLETF大鼠比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 2.3.3骨骼肌GLUT4mRNA和蛋白的影響 針刺組OLETF大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表達較空白組SD大鼠顯著降低(P0.01)；針刺組OLETF大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表達較模型組OLETF大鼠升高(P0.05)。 針刺組OLETF大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表達較空白組SD大鼠顯著降低(P0.01)；針刺組OLETF大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表達較模型組OLETF大鼠均顯著升高(P0.01)。 結論： 針刺可以影響PI3K信號轉導通路,是通過增加phospho-PKCζ、GLUT4mRNA和蛋白的表達來調整和改善胰島素抵抗狀態(tài)。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R245
【目錄】：

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