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人腺病毒7型引起的呼吸道感染疫情病原分子生物學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-02-10 12:21
  目的對(duì)安慶市某部隊(duì)一起人腺病毒7型引起的急性呼吸道感染暴發(fā)疫情進(jìn)行病原學(xué)鑒定,并對(duì)其六鄰體(Hexon)基因進(jìn)行測(cè)序分析。方法采取Real-time PCR對(duì)采集的13份咽拭子標(biāo)本進(jìn)行腺病毒核酸檢測(cè),陽(yáng)性標(biāo)本接種Hep-2細(xì)胞進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)。收集陽(yáng)性分離培養(yǎng)物,采用RT-PCR擴(kuò)增Hexon的核苷酸序列進(jìn)行測(cè)序,獲得序列在NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源比對(duì),MAGE6.0軟件進(jìn)行進(jìn)化分析、構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果獲得10份陽(yáng)性毒株培養(yǎng)物,Hexon基因序列與我國(guó)武漢7型腺病毒疫情株Z9/WH/CHN/2015(GenBank號(hào)為KX897164)100%同源,與2012AQHAdv7疫情株和2015AQHAdv7散發(fā)株100%同源性。結(jié)論該起疫情由人腺病毒7型感染引起,安慶地區(qū)流行的腺病毒疫情株基因型別穩(wěn)定,此次的疫情可能源于本地的流行株。 

【文章來(lái)源】:安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2019,25(02)

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【部分圖文】:

人腺病毒7型引起的呼吸道感染疫情病原分子生物學(xué)分析


圖1感染腺病毒7d后Hep-2細(xì)胞病變情況(×100)

電泳圖譜,六鄰體蛋白,產(chǎn)物,六鄰體


拉絲現(xiàn)象,為典型腺病毒CPE病變特征,如圖1所示。圖1感染腺病毒7d后Hep-2細(xì)胞病變情況(×100)Figure1Hep-2celllesionsafter7daysofinfectionwithadenovirus(×100)2.2.3六鄰體基因PCR擴(kuò)增利用AdHexSF和AdHexSR引物對(duì)10份分離成功的陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行六鄰體基因PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳,在約3000bp處出現(xiàn)一條清晰的目的基因條帶。見(jiàn)圖2。純化回收PCR產(chǎn)物,送至上海生物工程有限公司測(cè)序。圖2六鄰體蛋白全基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖譜Figure2ElectrophoresismapofproductsamplifiedbyHexonproteinwholegenePCR2.2.4同源分析及進(jìn)化樹(shù)分析10份陽(yáng)性毒株所測(cè)出的Hexon基因序列長(zhǎng)度均符合預(yù)期。將該序列提交GenBank進(jìn)行Blast同源性分析,10份毒株28安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志2019年4月20日第25卷第2期AnhuiJPrevMed,Apr.20,2019,Vol25,No.2

人腺病毒,六鄰體,血清型


的Hexon基因序列完全相同,且與我國(guó)2015年武漢株Z9/WH/CHN/2015(GenBank號(hào)為KX897164)100%同源性,提示該疫情的病原株屬于人腺病毒7型。為分析方便,選取其中一株201801AQHAdv7為代表株做進(jìn)化分析,人腺病毒不同血清型六鄰體基因系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)見(jiàn)圖3。注:201801AQHAdv為本次疫情分離株的代表株,2012AQHAdv7為2012年安慶一小學(xué)的分離株,2015AQHAdv7sanfa為2015年安慶市ILI樣本的檢出株圖3人腺病毒不同血清型六鄰體基因系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)Figure3EvolutionarytreeofhumanadenovirusHexongenesystemwithdifferentserotypes3討論目前,腺病毒感染暴發(fā)疫情世界各地均有報(bào)道,患者主要出現(xiàn)發(fā)熱與上呼吸道感染癥狀,在眾多的血清型中,引起呼吸道疾病的主要為3、7、14、1、2、5、6血清亞型[5-8],其中HAdv7常常與重癥的呼吸道感染相關(guān)[6-9]。HAdv7腺病毒有效的傳播需要一定的條件,例如人群密集的醫(yī)院、軍營(yíng)等的環(huán)境,HAdv-7大范圍流行需也要相對(duì)較低水平的群體免疫力。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),該起疫情發(fā)生前,某武警部隊(duì)進(jìn)行高強(qiáng)度的體能訓(xùn)練,過(guò)度疲勞,這可能使機(jī)體的免疫力下降,導(dǎo)致了此次的聚集性疫情發(fā)生的原因之一。人HAdv7可分為20個(gè)基因組型[7-10],我國(guó)流行株主要為HAdv7d型[8,11],與HAdv3,HAdv7d感染的臨床癥狀相比更為嚴(yán)重,病人

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]安慶市呼吸道感染疫情人腺病毒的病原分析[J]. 曹孟嬋,劉敏鴻,汪金生,李賢相,徐四清,張其威.  安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2015(01)



本文編號(hào):3618879

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