本文關(guān)鍵詞：津力達對高脂誘導的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目前糖尿病已成為嚴重危害我國人民身心健康的慢性疾病。糖尿病的高發(fā)被認為與現(xiàn)代人的生產(chǎn)生活方式緊密相關(guān),不斷高脂肪攝入所帶來的的超重和肥胖已成為了致病的關(guān)鍵因素。有研究證實,脂肪代謝紊亂與糖尿病,尤其是Ⅱ型糖尿病的胰島素抵抗(IR)關(guān)系密切。脂代謝紊亂時過高的FFA水平,使得脂質(zhì)過度沉積于脂肪組織中,從而降低胰島素的敏感性。FFA還可減少脂肪組織中腫瘤壞死因子α(TNF2α),纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1),白細胞介素-6(IL-6),C-反應(yīng)蛋白等細胞因子的釋放,降低內(nèi)源性生物活性多肽脂聯(lián)素的分泌,而引起IR。開發(fā)一種既可降糖又有降脂作用的藥物逐漸成為必須。近年來由石家莊以嶺藥業(yè)開發(fā)的降糖類中藥津力達顆粒在臨床的應(yīng)用得到了廣泛認可。已有多項研究證實,津力達具有明顯的降糖,降脂作用。但目前,該藥的具體作用機制和靶點尚不清晰。目的:通過高脂飼養(yǎng)Apo E-/-小鼠形成胰島素抵抗并發(fā)脂代謝紊亂的動物模型,從改善胰島素抵抗和脂肪組織代謝的角度探索津力達改善IR的具體作用機制。方法:實驗動物與分組:實驗采用48只實驗動物,8只雄性C57BL/6J小鼠設(shè)為正常對照組(NF),正常飼料喂養(yǎng)。40只雄性Apo E-/-小鼠,給予自制高脂飼料喂養(yǎng)16周后,根據(jù)血糖水平隨機分為5組:模型組(HF),羅格列酮組(LGLT,1.33 mg/kg.d-1),津力達高劑量組(JLDH,3.80 g/kg.d-1),津力達中劑量組(JLDM,1.90g/kg.d-1),津力達低劑量組(JLDL,0.95 g/kg.d-1)。正常對照組,模型組給予純水,每組8只,各組均灌胃給藥。每日一次,連續(xù)8周。取材與指標檢測:第8周末次給藥后,禁食不禁水14-16h,進行葡萄糖耐量試驗(OGTT)。OGTT實驗結(jié)束后實驗動物回籠正常飼養(yǎng)48h,待小鼠機體應(yīng)激反應(yīng)消失后,再次禁食不禁水14-16h,摘除小鼠的眼球取血1.5ml,脫頸椎處死實驗動物,留取胰腺和腹部皮下脂肪組織。將血液離心,分離血清,全自動生化分析儀測定血清中FBG,FFA,TC,TG,HDL-C,LDL-C水平,放射免疫分析法檢測空腹胰島素(Fins)水平。采用10%福爾馬林溶液固定胰腺與部分脂肪組織,HE染色,光鏡觀察組織變化。部分脂肪組織制成勻漿,用于丙二醛(MAD)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量測定,剩余部分脂肪組織,采用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)測定脂肪組織中過氧化物酶體增殖物激活受體蛋白(PPAR-γ),胰島素受體底物-1(IRS-1),胰島素受體底物-2(IRS-2),葡糖糖轉(zhuǎn)運載體-4(GLUT-4),固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP-1c),LDL受體(LDLR),FAT蛋白(FAT)及肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)的表達。結(jié)果:胰島素敏感性評價:和NF組相比,HF組Fins,FBG和HOMA-IR水平均顯著升高(P均0.01)。JLD可劑量依賴性地降低Fins和FBG水平,與HF組比較具有統(tǒng)計學差異(JLDH組P均0.01,JLDM組P均0.05),與HF組比較,JLD各組HOMA-IR水平明顯下降具備統(tǒng)計學差異(JLDH組,JLDM組P均0.01,JLDL組P0.05)。其中JLDH組對Fins,FBG水平及HOMA-IR的作用和LGLT組相當。在給予大量葡萄糖后,各組實驗動物血糖值均在30min升至頂峰,之后逐步下降,JLD各組血糖高峰值與HF組比較明顯降低。改善血清血脂指標:HF組血清中TC,TG,FFA,LDL-C濃度均較NF組顯著升高(P均0.01),而HDL-C濃度低于NF組(P0.01)。JLD各劑量組對于血液中的TG有降低作用,與HF組比較差異顯著(P均0.05)。JLDH組,JLDM組對于血液中的TC有降低作用,與HF組比較差異顯著(JLDH組P0.01,JLDM組P0.05),JLD高,中劑量組尚可明顯降低FFA及LDL-C的濃度(JLDH組LDL-C P0.01,其他P均0.05),提高HDL-C的濃度(P均0.05)。脂肪組織抗氧化指標:和NF相比,HF組SOD含量降低,MDA含量升高(P均0.05)。與HF組相比,JLD各劑量組均可不同程度降低MDA含量(P均0.05),JLD高,中劑量組尚可顯著升高SOD的含量(P0.05)。脂肪與胰腺組織HE染色:脂肪組織染色后,HF組可見單視野內(nèi)脂肪細胞數(shù)量降低,體積增大,細胞長短經(jīng)升高。LGLT組,JLDH組與NF組相比未見明顯異常,JLDM組,JLDL組則可見不同程度的脂肪細胞體積增大,及細胞長短徑的升高。胰腺染色后,HF組胰腺內(nèi)胰島結(jié)構(gòu)不清,細胞形態(tài)不完整,數(shù)目減少,體積變小,LGLT組和JLD各組和HF組相比均有不同程度的減輕。脂肪組織分子生物學檢測:Western blot結(jié)果顯示,和NF組相比,HF組FAT及SREBP-1C的表達上調(diào),CPT1,GLUT-4,IRS-1,IRS-2及PPARγ的表達下調(diào)(P均0.05),對LDLR未見明顯影響。和HF組相比,JLD三個劑量組均可上調(diào)IRS-2的表達,JLDM和JLDH組尚可上調(diào)CPT1,IRS-1,IRS-2的表達及下調(diào)SREBP-1C的表達,JLDH尚可上調(diào)GLUT-4及PPARγ的的表達,但LGLT組,JLD各組FAT,LDLR的表達未見明顯作用,LGLT組均可上調(diào)GLUT-4,IRS-1,IRS-2及下調(diào)SREBP-1C的表達。結(jié)論:1高脂飼料喂養(yǎng)APOE-/-小鼠連續(xù)數(shù)月,可致小鼠出現(xiàn)高血糖,胰島素抵抗和脂質(zhì)代謝紊亂。這應(yīng)該與脂肪組織氧化應(yīng)激過強,糖的利用降低及脂質(zhì)沉積增加有關(guān)。2津力達可以不同程度改善高脂飲食誘導的Apo E-/-小鼠的胰島素抵抗和脂代謝紊亂,這應(yīng)該與其可降低脂肪組織的氧化應(yīng)激水平有關(guān),可促進血糖的利用及脂質(zhì)轉(zhuǎn)化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 津力達 脂代謝 胰島素抵抗 蛋白表達 Apo E-/-小鼠
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-23
• 附圖23-32
• 附表32-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40-41
• 總結(jié)41-42
• 參考文獻42-47
• 綜述47-54
• 參考文獻51-54
• 致謝54-55
• 個人簡歷55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 童玉;黃丹珊;Michael BRYER-ASH;;球形脂聯(lián)素、葡萄糖和游離脂肪酸對胰島β細胞單磷酸腺苷激活的蛋白激酶和乙酰輔酶A羧化酶磷酸化的影響[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2006年06期

2 俞勻,朱大龍;脂聯(lián)素及其受體研究進展[J];醫(yī)學研究生學報;2005年09期

3 歐海龍;嚴忠海;雷霆雯;;LDLR~(-/-)小鼠中脂代謝相關(guān)基因的表達[J];中國動脈硬化雜志;2012年12期

4 姜兆順;趙建芹;劉元濤;;脂肪因子與骨骼肌胰島素抵抗研究進展[J];山東醫(yī)藥;2010年17期

5 黃燕飛,劉志紅,陳惠萍,周虹,王建平,朱茂艷,黎磊石;大黃酸和羅格列酮對db/db糖尿病小鼠代謝紊亂和腎臟損傷的作用比較[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2004年03期

6 金邦荃,陳杰;動物脂肪代謝與控制[J];動物科學與動物醫(yī)學;2001年06期

7 祝煉,袁莉;胰島素信號轉(zhuǎn)導與肝胰島素抵抗[J];世界華人消化雜志;2004年10期

8 沈興平,舒昌達;早期糖尿病大鼠肺超微結(jié)構(gòu)與氧化應(yīng)激的觀察[J];中國病理生理雜志;2002年09期

9 鄧正照,錢榮立;糖尿病脂代謝異常與治療[J];中國糖尿病雜志;2001年04期

10 任路平;呂秀芹;劉娜;宋光耀;陳樹春;孫文;李凡;;高脂、高果糖飼料喂養(yǎng)大鼠骨骼肌脂質(zhì)轉(zhuǎn)運酶類的表達變化[J];中國老年學雜志;2010年24期

  本文關(guān)鍵詞：津力達對高脂誘導的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：347243