本文關(guān)鍵詞：大豆肽對(duì)大鼠血脂代謝的影響及其抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的 深入研究大豆肽對(duì)血脂代謝的影響及其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)理,為新型大豆蛋白乃至生物活性肽的開(kāi)發(fā)及其在食品、保健品、食品添加劑、飼料等相關(guān)行業(yè)的利用和發(fā)展提供可靠的理論依據(jù)。 研究方法 1.大豆肽對(duì)大鼠血脂代謝影響的量效研究 (1)血脂代謝實(shí)驗(yàn)Wistar雄性大鼠,50只,體重(200±10)g,根據(jù)血清膽固醇(TC)水平及體重均衡的原則,隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、高脂模型組、低、中、高劑量大豆肽組。正常對(duì)照組進(jìn)食正常飼料,高脂模型組進(jìn)食高脂飼料(特制,配方見(jiàn)后述),低、中、高劑量組配方飼料則是在高脂飼料的基礎(chǔ)上分別加入不同劑量的大豆肽,飼養(yǎng)40天后取血測(cè)定大鼠各項(xiàng)血脂指標(biāo)。 (2)攝食量及糞便排出量影響實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)期的最后3d,將大鼠移入代謝籠,單籠單只飼養(yǎng)。準(zhǔn)確記錄每只大鼠的飼料投入量、剩余量,并收集每只大鼠3d的糞便烘干待檢,稱(chēng)重并計(jì)算各組大鼠攝食量及糞便排出量,比較各組不同。 (3)體重及臟器重量影響實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)期間每周稱(chēng)量一次大鼠體重,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,解剖大鼠取其肝、心、腎,稱(chēng)重、計(jì)算臟體比值。肝臟冷凍(-20℃)待檢,比較各組大鼠體重、臟器重量及其系數(shù)間差異。 2.大豆肽抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究 (1)脂酶與氧化型低密度脂蛋白影響實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,大鼠斷頭取足量血分離血清待測(cè),銅試劑法測(cè)定脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)濃度,計(jì)算總脂酶(總脂酶=LPL+HL)含量；ELISA法測(cè)定肝臟組織中卵磷脂脂酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量,比較各縛差異。 (2)內(nèi)皮因子影響實(shí)驗(yàn)前述分離血清為待測(cè)樣品。ELISA法測(cè)定前列腺素(PGI2)和血栓烷A2(TXA2)及內(nèi)皮素-1(ET-1)含量；硝酸還原酶法測(cè)定內(nèi)源性一氧化氮(NO)含量,比較各組差異。 (3)載脂蛋白實(shí)驗(yàn)ELISA法測(cè)定大鼠血清載脂蛋白A、B (Apo AI、Apo B),計(jì)算兩者比值并比較各組間的差異。 (4)糞膽汁酸實(shí)驗(yàn)糞便烘干萃取后,循環(huán)酶法檢測(cè)其中的膽汁酸含量,比較各組間的差異。 (5)離體膽固醇微膠粒形成實(shí)驗(yàn)以新鮮豬膽汁為反應(yīng)體系,向體系中加入一定量的膽固醇,除空白管外,其他分別加入不同劑量大豆肽溶液,每個(gè)劑量設(shè)置10個(gè)平行樣,一定反應(yīng)條件后測(cè)定游離膽固醇含量,以加入系統(tǒng)的膽固醇量減去沉淀中游離膽固醇量,計(jì)算膽固醇微膠粒含量。抑制率(%)=(1-含大豆肽試管中膽固醇微膠粒的含量/空白試管中膽固醇微膠粒的含量)*100% 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以(x±s)進(jìn)行表示。采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩組間比較采用t檢驗(yàn)；多組間比較采用方差齊性檢驗(yàn)和單因素方差分析(One Way ANOVA)。進(jìn)一步進(jìn)行組間兩兩比較時(shí),若方差齊時(shí),采用SNK檢驗(yàn)(Student-Newman-Keuls法)；若方差不齊時(shí),采用Games-Howell檢驗(yàn)。以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(差異具有顯著性)。 結(jié)果 1.血脂代謝影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)血脂代謝實(shí)驗(yàn)結(jié)果在實(shí)驗(yàn)期內(nèi),高脂模型組大鼠經(jīng)高脂飼料飼養(yǎng)后,血清TC濃度是正常對(duì)照組的1.77倍,TG為1.58倍。經(jīng)t檢驗(yàn)分析,高脂模型組和正常對(duì)照組之間大鼠TC、TG水平具有顯著性差異(t0.01)。實(shí)驗(yàn)期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠TC、TG含量均顯著降低(P0.05, P0.01);HDL-C含量升高但不具有顯著性(P0.05)。 (2)攝食量及糞便排出量影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果各組動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育良好,活動(dòng)正常,體重穩(wěn)定增加。高脂模型組大鼠攝食量減少,但不具有顯著性(P0.05),各組之間糞便排出量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (3)體重及其臟器重量影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體重穩(wěn)定增加,從第2周末開(kāi)始,中、高劑量組及正常組大鼠體重增加明顯,與高脂模型組相比,差異具有顯著性(P0.05,P0.01)。實(shí)驗(yàn)期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠體重、肝、心、腎重量增加明顯(P0.05,P0.01),高劑量組大鼠肝/體系數(shù)、腎/體系數(shù)偏高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01)。 2.大豆肽抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)實(shí)驗(yàn)期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠LPL、HL、總脂酶、LCAT、內(nèi)皮源性NO、PGI2、Apo AI、糞膽汁酸含量均顯著增加(P0.05,P0.01)；高劑量組Apo AI/Apo B增加具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；而中、高劑量組ox-LDL、 ET-1、TXA2顯著降低(P0.05,P0.01)。各組之間Apo B無(wú)明顯差異(P0.05)。 (2)在反應(yīng)體系中加入不同劑量大豆肽混懸液時(shí),可以看到各管均可抑制膽固醇微膠粒形成,但各管抑制率無(wú)顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論 1.飼喂大鼠高脂飼料40天后,可誘導(dǎo)大鼠高脂模型成功。 2.飼料含量為4.050%和12.150%的大豆肽混懸液均可明顯降低大鼠TC、TG,并-定程度的升高大鼠HDL-C濃度,根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)判定標(biāo)準(zhǔn),大豆肽有輔助降血脂功能。 3.大豆肽抗As機(jī)制可能為： (1)增強(qiáng)血液中的脂酶及Apo AI含量,降低Apo B含量,提高體內(nèi)尤其是肝臟對(duì)脂蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)、轉(zhuǎn)化,從源頭抑制脂粒的過(guò)量沉積。 (2)減少ox-LDL產(chǎn)生,從而減少泡沫細(xì)胞形成,降低血小板粘附、聚集及血栓形成,預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化(AS)。 (3)增加PGI2、內(nèi)皮源性N0,減少TXA2及ET-1,抑制其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,維持血管正常的生理功能,防止AS斑塊的產(chǎn)生。 (4)增加糞膽汁酸的排泄,加速體內(nèi)脂蛋白的轉(zhuǎn)化、清除,降低血脂水平。
【關(guān)鍵詞】：大豆肽 降血脂 脂酶 內(nèi)皮因子、膽汁酸 動(dòng)脈粥樣硬化 機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R589.2;R965
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-13
• 符號(hào)說(shuō)明13-14
• 前言14-21
• 第一部分 大豆肽對(duì)血脂代謝影響的量效研究21-31
• 1 材料與方法21-22
• 2 結(jié)果22-25
• 3 討論25-31
• 第二部分 大豆肽抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)理研究31-44
• 1 材料與方法31-32
• 2 結(jié)果32-37
• 3 討論37-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 致謝51-52
• 附錄一：血清總膽固醇測(cè)定方法52-53
• 附錄二：血清甘油三酯測(cè)定方法53-55
• 附錄三：血清高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定方法55-57
• 附錄四：大鼠載脂蛋白A(APO AI)檢測(cè)方法57-60
• 附錄五：總膽汁酸檢測(cè)試劑盒(循環(huán)酶法)說(shuō)明書(shū)60-61
• 附錄六：大鼠卵磷脂膽固醇�；D(zhuǎn)移酶(LCAT)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)61-64
• 附錄七：大鼠內(nèi)皮素(ET-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)64
• 附錄八：大鼠前列環(huán)素(PGI_2)試劑盒說(shuō)明書(shū)64
• 附錄九：大鼠血栓素A_2(TXA_2)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)64
• 附錄十：大鼠氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)劑盒使用說(shuō)明書(shū)64-65
• 附錄十一：大鼠載脂蛋白B(APO B)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)使用說(shuō)明書(shū)65-66
• 附錄十二：一氧化氮(NO)試劑盒說(shuō)明書(shū)(硝酸還原酶法)66-68
• 附錄十三：總脂酶測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)(測(cè)脂蛋白脂酶LPL及肝脂酶HL)68-71
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文71-72
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：大豆肽對(duì)大鼠血脂代謝的影響及其抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：272252