【摘要】：目的研究模擬微重力條件下培養(yǎng)的小鼠早期胚胎體外發(fā)育與1g重力條件下體外發(fā)育的差異。方法檢測葡萄糖代謝關鍵酶6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PD)在昆明小鼠早期胚胎體外不同重力條件下培養(yǎng)各個時期基因的轉錄與表達。結果模擬微重力培養(yǎng)條件下,胚胎體外發(fā)育受到明顯的抑制,模擬微重力不利于小鼠胚胎的體外發(fā)育。用CZB+10%FCS進行培養(yǎng),2-細胞期培養(yǎng)的囊胚率為零,顯著低于常規(guī)培養(yǎng)的23.92%;4-細胞期培養(yǎng)的囊胚率為18.44%,顯著低于常規(guī)培養(yǎng)的80.12%。利用G6PD的內、外兩對引物,檢測昆明小鼠早期胚胎體外發(fā)育各個階段的G6PD基因的轉錄與表達。從2-細胞期開始體外常規(guī)培養(yǎng)的胚胎,發(fā)育至4-、8-細胞胚胎、桑椹胚、囊胚及退化囊胚都有G6PD基因的轉錄與表達。在模擬微重力條件下,從2-細胞期開始培養(yǎng)的胚胎,發(fā)育至4-細胞期、桑椹期、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的轉錄和表達,而退化的2-細胞胚胎沒有檢測到G6PD基因的轉錄與表達。結論兩種培養(yǎng)方式之間,G6PD基因的轉錄與表達不存在差異,說明早期胚胎都存在磷酸戊糖途徑。
【圖文】：

可見從22細胞期開始體外常規(guī)培養(yǎng)的胚胎,早期胚胎42細胞、82細胞、桑椹胚、囊胚都可擴增出一條378bp的特異性條帶(見圖1)。說明體外培養(yǎng)的胚胎從42細胞到囊胚期皆有G6PD基因的轉錄和表達,亦表達G6PD。　　小鼠22細胞期胚胎開始在模擬微重力條件下進行體外培養(yǎng),各期胚胎通過巢式RT2PCR擴增實驗檢測G6PD的表達情況,可見早期22細胞開始培養(yǎng),體外退化的22細胞胚胎沒有擴增出特異性條帶;發(fā)育到42細胞期、桑椹期、囊胚期(4細胞開始培養(yǎng))的胚胎都可擴增出一條378bp的特異性條帶,退化桑椹胚(細胞出現(xiàn)碎片、囊胚腔縮圖1　巢式RT2PCR擴增1g重力條件下昆明小鼠體外培養(yǎng)早期胚胎G6PD的結果Fig.1　Results of expressions of G6PD by nested RT2PCR in Kunm ing early embryos cultured undernormal gravityLane127: negative contro,l m ouse liverRNA as positivecontro,l42cell embryos

m ouse liverRNA as positivecontro,l42cell embryos,82cell embryos, m orula, blas2tocyst, degenerate blastocyst小等)亦擴增出一條378bp的特異性條帶(圖2)。說明體外發(fā)育42細胞、桑椹胚、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的轉錄和表達,而在體外退化的22細胞期胚胎(細胞出現(xiàn)大量碎片、體積縮小)檢測不到G6PD基因的轉錄。圖2　巢式RT2PCR擴增模擬微重力條件下昆明小鼠體外培養(yǎng)早期胚胎G6PD的結果Fig.2　Results of expressions of G6PD by nested RT2PCR in Kunm ing early embryos cultured undersimulated m icrogravityLane127: negative contro,l m ouse liverRNA as positivecontro,l degenerate22cell embryos,42cell embryos,m orula, blastocyst, degenerate m orula討　論模擬微重力條件下小鼠胚胎的旋轉培養(yǎng)　模擬微重力條件下

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相關期刊論文 前6條

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