本文關(guān)鍵詞：米糠谷維素抗急性腸炎的功能評(píng)價(jià)及初步機(jī)理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中南林業(yè)科技大學(xué)》 2013年

米糠谷維素抗急性腸炎的功能評(píng)價(jià)及初步機(jī)理研究

李輝  

【摘要】：我國(guó)是世界最大的稻米生產(chǎn)國(guó),年產(chǎn)稻谷高過2.0億噸以上。米糠——稻米加工的副產(chǎn)物,我國(guó)米糠年產(chǎn)量可達(dá)1400萬(wàn)噸左右。米糠含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、礦物質(zhì)及B族維生素、生育三烯酚等生理功能活性物質(zhì),其中,米糠中豐富的谷維素含量使其倍受矚目。 谷維素為脂溶性不皂化物,是環(huán)木菠蘿醇同系物及植物醇的阿魏酸酯的混合物,具有抗氧化、清除自由基、降低血脂和膽固醇等生理功能。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)谷維素可能具有抗炎的生理功能,在臨床上有研究人員聯(lián)合應(yīng)用谷維素與其它抗炎藥物防治炎癥,發(fā)現(xiàn)谷維素能增強(qiáng)療效。然而,迄今為止谷維素是否具有抗炎作用,谷維素抗炎的分子機(jī)理尚不清楚。本研究將小鼠炎癥動(dòng)物模型,評(píng)估谷維素的抗炎作用及其可能分子機(jī)理。 本實(shí)驗(yàn)采用葡聚糖硫酸鈉(dextran sulphate sodium, DSS)結(jié)腸炎模型模擬人類潰瘍性結(jié)腸炎,探究米糠谷維素對(duì)DSS模型小鼠炎癥的防治作用。葡聚糖硫酸鈉結(jié)腸炎模型的組織學(xué)特點(diǎn)、發(fā)病部位、臨床表現(xiàn)以及細(xì)胞因子增殖情況都與人類的潰瘍性結(jié)腸炎極為相似,是經(jīng)典的人類結(jié)腸炎模型。通過讓小鼠自由飲用5.0%DSS水7天建立急性結(jié)腸炎模型,引發(fā)小鼠結(jié)腸炎癥,在造模前三天開始灌胃小鼠玉米油溶的谷維素,以探究谷維素對(duì)小鼠腸炎的防治作用。 小鼠飲用DSS后,對(duì)模型小鼠的體重,結(jié)腸重量與長(zhǎng)度以及脾臟重量等炎癥影響因素進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì),經(jīng)過DAI評(píng)分,宏觀上考察谷維素對(duì)DSS導(dǎo)致的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的防治作用�？梢杂^察到DSS損傷組小鼠結(jié)腸上皮粘膜糜爛,損傷嚴(yán)重,谷維素對(duì)其損傷具有部分的抑制作用。小鼠結(jié)腸病理學(xué)分析顯示：切片HE染色后,可明顯觀察到DSS損傷組小鼠結(jié)腸上皮粘膜,腺體隱窩結(jié)構(gòu)被DSS破壞,淋巴細(xì)胞及伴中性粒細(xì)胞等浸潤(rùn),杯狀細(xì)胞丟失,防治組小鼠結(jié)腸損傷明顯減輕,上皮結(jié)構(gòu)相對(duì)完整,隱窩結(jié)構(gòu)完整,排列比較整齊,炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)得到緩解。DAI評(píng)分值分別為：0.31±0.42、9.21±2.32和7.18±2.02,通過對(duì)對(duì)照組,DSS損傷組,防治組小鼠的疾病活化指數(shù)進(jìn)行評(píng)分,發(fā)現(xiàn)損傷組小鼠DAI評(píng)分明顯高于對(duì)照組以及防治組(P0.01)。給予小鼠一段時(shí)間的谷維素灌胃處理,小鼠的DAI評(píng)分顯著降低,小鼠體重下降得以緩解,結(jié)腸重量升高,結(jié)腸萎縮改善,結(jié)腸隱血、便血程度降低,炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)緩解,結(jié)腸炎癥得到改善。 小鼠體重的測(cè)量結(jié)果顯示造模第六天,DSS模型組小鼠可明顯觀察到懶動(dòng)、厭食、喜扎堆、體毛光澤度下降等狀態(tài),體重也顯著下降。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,對(duì)照組小鼠,損傷組小鼠以及防治組小鼠體重分別為：19.85±1.05、15.23±1.02和16.88±0.98克。相對(duì)于對(duì)照組小鼠,損傷組小鼠體重下降,并有顯著差異(P0.05)。防治組體量小于對(duì)照組,高于損傷組(P0.05)。可見谷維素對(duì)DSS導(dǎo)致的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的體重降低具有一定的緩解作用。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)腸炎小鼠炎癥最相關(guān)的宏觀指示(結(jié)腸重量及長(zhǎng)度),結(jié)果發(fā)現(xiàn)：對(duì)照組小鼠、損傷組小鼠以及防治組小鼠結(jié)腸重量分別為：177.6±7.8mg、202.8±13.6mg和190.3±9.7mg。相對(duì)于對(duì)照組小鼠,損傷組及防治組小鼠結(jié)腸重量均顯著升高,差異極顯著(P0.01)。防治組結(jié)腸重量高于對(duì)照組,低于損傷組(P0.01)。損傷組及防治組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度均有明顯縮短,對(duì)照組小鼠,損傷組小鼠以及防治組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度分別為：7.95±0.44cm、5.95±0.27cm和6.5±0.32cm,差異顯著(P0.05),DSS藥物作用使小鼠結(jié)腸發(fā)生萎縮,長(zhǎng)度縮短。防治組結(jié)腸長(zhǎng)度低于對(duì)照組,高于損傷組(P0.05)。谷維素對(duì)DSS導(dǎo)致的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型結(jié)腸重量上升,結(jié)腸萎縮明顯的改善,提示谷維素具有抗DSS-誘導(dǎo)的結(jié)腸炎作用。 脾臟是最大的淋巴器官,其中含有大量的效應(yīng)B細(xì)胞,結(jié)腸炎由于炎癥的產(chǎn)生及免疫功能紊亂,會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng),導(dǎo)致小鼠脾臟增大。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：免疫系統(tǒng)紊亂導(dǎo)致?lián)p傷組、防治組小鼠脾臟增大,對(duì)照組小鼠,損傷組小鼠以及防治組小鼠脾臟重量分別為：79.8±7.6mg、152.1±42.1mg和129.1±28.1mg,小鼠灌胃后,谷維素能有效抑制脾臟腫大(P0.05)。提示谷維素能夠部分改善潰瘍性結(jié)腸炎小鼠免疫系統(tǒng)紊亂,有效對(duì)抗因造模引起的脾臟增大,但谷維素不能像激素一樣,達(dá)到抑制免疫的作用。谷維素抑制結(jié)腸炎的分子機(jī)理可能與抑制小鼠脾臟的腫大(抑制脾臟炎癥)有關(guān)。 COX-2是結(jié)腸炎癥重要的靶基因,研究發(fā)現(xiàn),COX-2作為花生四烯酸轉(zhuǎn)化生成前列腺素的限速酶,與炎癥有著密切的關(guān)系。在正常機(jī)體內(nèi),COX-2幾乎不表達(dá),然而,在炎癥組織中,受到炎癥細(xì)胞因子、表皮生長(zhǎng)因子、脂多糖、腫瘤壞死因子等炎性因子誘導(dǎo)時(shí),才會(huì)有大量COX-2表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)中,DSS導(dǎo)致的小鼠結(jié)腸炎模型中COX-2的mRNA表達(dá)顯著升高,結(jié)腸炎癥反應(yīng)發(fā)生。添加谷維素后,防治組的COX-2表達(dá)較損傷組下降,說明谷維素可以干預(yù)COX-2蛋白的產(chǎn)生,影響炎癥的發(fā)生。 iNOS是結(jié)腸炎癥另一個(gè)重要的靶基因,是一種誘導(dǎo)性酶,能夠?qū)Ⅲw內(nèi)精氨酸轉(zhuǎn)化為瓜氨酸并釋放NO。大量NO的釋放會(huì)產(chǎn)生很多自由基,引起組織損傷,引發(fā)炎癥,測(cè)定結(jié)腸黏膜iNOS水平可反映腸道炎癥狀況。灌胃谷維素的小鼠,結(jié)腸組織內(nèi)iNOS的表達(dá)含量較DSS損傷組顯著下降,說明谷維素能夠抑制炎癥細(xì)胞iNOS的表達(dá),從而緩解炎癥危害。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中南林業(yè)科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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