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博士論文    

胰高血糖素樣肽-1（1-37）生物學活性及幾丁質-PGA包裹tGLP-1作為口服藥物的研究

     論文目錄

摘要第1-9頁

ABSTRACT第9-15頁

第一章 胰高血糖素樣肽-1的研究進展第15-30頁

 前言第15頁

 1. GLP-1概況第15-23頁

   ·GLP-1的來源第15-18頁

   ·GLP-1在體內的降解后的產物及功能第18-19頁

   ·GLP-1的生理功能第19-23頁

 2 糖尿病的治療第23-28頁

   ·目前已研發(fā)的糖尿病藥物及臨床應用面臨的問題第23-25頁

   ·治療糖尿病的給藥方式第25-28頁

 3. 本課題研究目的和意義第28-30頁

第二章 胰高血糖素樣肽-1(1-37)的克隆、表達及分離純化第30-56頁

 前言第30頁

 1. 材料第30-32頁

   ·質粒和菌種第30-31頁

   ·藥品和試劑第31頁

   ·主要儀器及設備第31頁

   ·分析軟件第31-32頁

 2. 方法第32-44頁

   ·GLP-1(1-37)在大腸桿菌DH5α中的克隆第32-38頁

   ·融合蛋白Trx-GLP-1(1-37)的誘導表達及可溶性鑒定第38-41頁

   ·融合蛋白Trx-GLP-1(7-37)的誘導表達第41頁

   ·融合蛋白Trx-GLP-1(1-37)的分離純化第41-43頁

   ·蛋白GLP-1(1-37)的分離純化第43-44頁

   ·融合蛋白Trx-GLP-1(7-37)的分離純化第44頁

   ·蛋白GLP-1(7-37)的分離純化第44頁

   ·SDS-PAGE小分子膠檢測蛋白第44頁

 3. 結果第44-54頁

   ·GLP-1(1-37)在大腸桿菌DH5α中的克隆第44-48頁

   ·GLP-1(1-37)融合蛋白的表達及可溶性鑒定第48-50頁

   ·融合蛋白Trx-GLP-1(1-37)的分離純化第50-51頁

   ·目的多肽GLP-1(1-37)的分離純化第51-53頁

   ·GLP-1(7-37)的分離純化第53頁

   ·小分子膠對蛋白的鑒定第53-54頁

 4. 討論與分析第54-56頁

第三章 GLP-1(1-37)性質的研究第56-67頁

 前言第56頁

 1. 材料第56-57頁

   ·試劑和藥品第56頁

   ·主要儀器及設備第56-57頁

   ·實驗動物第57頁

   ·分析軟件第57頁

 2. 方法第57-60頁

   ·GLP-1(1-37)的生物學活性研究第57-58頁

   ·體外GLP-1受體的激活實驗第58-59頁

   ·GLP-1受體拮抗劑對GLP-1(1-37)活性的影響第59頁

   ·GLP-1(1-37)在血清中的穩(wěn)定性分析第59-60頁

 3 實驗結果第60-65頁

   ·GLP-1(1-37)在動物體內的降血糖活性第60-62頁

   ·GLP-1受體激動劑第62-63頁

   ·Exendin(9-39)對GLP-1(1-37)降糖活性的影響第63-64頁

   ·GLP-1(1-37)與GLP-1(7-37)的穩(wěn)定性比較第64-65頁

 4 討論與分析第65-67頁

第四章 tGLP-1串聯(lián)體的克隆、表達第67-77頁

 前言第67頁

 1. 材料第67-68頁

   ·質粒和菌種第67頁

   ·藥品和試劑第67頁

   ·主要儀器及設備第67-68頁

   ·分析軟件第68頁

 2. 方法第68-70頁

   ·GLP-1突變體的蹄選第68頁

   ·高效表達tGLP-1基因工程菌的構建第68-69頁

   ·tGLP-1衍生物融合蛋白的誘導表達與鑒定第69頁

   ·重組質粒的穩(wěn)定性分析第69-70頁

 3 結果第70-75頁

   ·GLP-1突變體活性比較第70頁

   ·tGLP-1串聯(lián)重組體質粒的構建第70-71頁

   ·tGLP-1串聯(lián)體融合蛋白的表達第71-74頁

   ·重組質粒的穩(wěn)定性第74-75頁

 4 討論與分析第75-77頁

第五章 tGLP-1-C4融合蛋白的表達優(yōu)化及分離純化第77-88頁

 前言第77頁

 1 材料第77-78頁

   ·菌種第77頁

   ·藥品和試劑第77頁

   ·主要儀器和設備第77-78頁

   ·分析軟件第78頁

 2. 方法第78-80頁

   ·活化菌種第78頁

   ·菌種生長曲線的繪制第78頁

   ·IPTG誘導表達優(yōu)化第78-79頁

   ·tGLP-1-C4蛋白的分離純化第79-80頁

 3 結果第80-86頁

   ·菌種生長曲線的繪制第80頁

   ·裝瓶量對IPTG誘導表達的影響第80-81頁

   ·誘導時間對IPTG誘導表達的影響第81-82頁

   ·誘導劑濃度對IPTG誘導表達的影響第82-83頁

   ·培養(yǎng)溫度對IPTG誘導表達的影響第83-84頁

   ·優(yōu)化前后蛋白表達比較第84-85頁

   ·tGLP-1-C4蛋白的純化第85-86頁

 4. 討論與分析第86-88頁

第六章 幾丁質-PGA包裹tGLP-1微粒的制備及性質研究第88-98頁

 前言第88頁

 1 材料第88-89頁

   ·試劑第88-89頁

   ·主要儀器及設備第89頁

   ·實驗動物第89頁

 2. 方法第89-91頁

   ·胰酶酶切包涵體第89頁

   ·包涵體被胰酶作用前后口服活性的比較第89頁

   ·包涵體tGLP-1-C4與天然GLP-1腹腔給藥時的活性比較第89-90頁

   ·包涵體tGLP-1-C4與天然GLP-1口服給藥時的活性比較第90頁

   ·Chitin-PGA包裹蛋白的微粒制備第90頁

   ·Chitin-PGA-tGLP-1-C4在體內的口服活性第90頁

   ·酪蛋白包裹Chitin-PGA-tGLP-1-C4在體內的活性第90-91頁

 3. 結果第91-96頁

   ·胰酶切開包涵體第91-92頁

   ·tGLP-1-C4被胰酶作用前后的口服活性第92頁

   ·腹腔給藥時tGLP-1-C4與天然GLP-1的活性比較第92-93頁

   ·口服給藥時tGLP-1-C4與天然GLP-1的活性比較第93頁

   ·Chintin-PGA微粒形態(tài)第93-94頁

   ·蛋白微粒的制備及包裹率的分析第94頁

   ·Chitin-PGA包裹蛋白在體內的口服活性第94-95頁

   ·酪蛋白包裹Chitin-PGA的性質第95-96頁

 4. 討論與分析第96-98頁

附錄第98-99頁

參考文獻第99-107頁

致謝第107頁

論文編號BS25161，這篇論文共107頁
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