本文關(guān)鍵詞：火藥煙霧刺激損傷氣道上皮及葛根素防護(hù)作用的機(jī)制研究

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【摘要】：目的：1.構(gòu)建火藥煙霧誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞損傷實(shí)驗(yàn)體系。2.通過火藥煙霧誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞（BEAS-2B）上調(diào)炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)、合成并釋放炎性細(xì)胞因子蛋白質(zhì)以及不同劑量葛根素的干預(yù)研究，，探討火藥煙霧損傷氣道上皮及葛根素防護(hù)作用的發(fā)生機(jī)制。方法：1.在前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上構(gòu)建火藥煙霧誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞損傷實(shí)驗(yàn)體系；2. MTT法檢測黑火藥煙霧作用一定時(shí)間后氣道上皮細(xì)胞存活率；3.根據(jù)細(xì)胞存活率將實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為五組：①正常對照組（支氣管上皮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)），②煙霧刺激組（黑火藥煙霧刺激10min），③煙霧刺激+葛根素防護(hù)組（分別用濃度為25，50，100μg/ml的葛根素于細(xì)胞培養(yǎng)12h后對其進(jìn)行干預(yù)）；4.應(yīng)用ELISA方法定量上述各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中炎性細(xì)胞因子濃度；5.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量（Real-time）PCR方法檢測上述各組細(xì)胞培養(yǎng)2、6、8、12h后支氣管上皮細(xì)胞中炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)水平。結(jié)果：1.黑火藥煙霧可導(dǎo)致氣道上皮細(xì)胞存活率下降（P0.05），加入葛根素后細(xì)胞存活率明顯提高，且呈劑量依賴性（P0.01）；2.黑火藥煙霧作用后，氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)上清液中炎性細(xì)胞因子IL-8（P0.05）、IL-6（P0.01）濃度顯著高于正常對照組，葛根素可有效抑制黑火藥煙霧誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子（IL-8、IL-6，P均0.01）并呈濃度依賴性；3.黑火藥煙霧作用氣道上皮細(xì)胞中IL-8和IL-6基因表達(dá)顯著增加（P均0.01），而培養(yǎng)體系中加入不同濃度葛根素干預(yù)，可有效抑制氣道上皮細(xì)胞中IL-8和IL-6基因的表達(dá)（P均0.01）。結(jié)論：1.火藥煙霧可通過誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞中炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)、蛋白質(zhì)合成和釋放而導(dǎo)致其損傷的發(fā)生。2.葛根素可通過抑制火藥煙霧作用氣道上皮細(xì)胞中炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)、蛋白質(zhì)合成和釋放而防護(hù)火藥煙霧所致氣道上皮細(xì)胞的損傷。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R285.5;R82

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本文編號：1238443