模擬微重力對獼猴肺組織結構及基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響
本文關鍵詞:模擬微重力對獼猴肺組織結構及基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響
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【摘要】:目的:探討模擬微重力效應對獼猴肺組織結構的影響及對獼猴肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1,2,3,7,8,9,11,12和13 mRNA及蛋白表達水平的影響。方法:采用國際通用地面模擬微重力方法,在特殊裝置上以獼猴頭低位-10°模型模擬航天失重,將15只健康青壯年雄性獼猴,按體重配對,隨機分為3組,每組5只,即對照組:在籠內(nèi)自由活動6周;模擬微重力組:在特制的頭低位-10°模擬微重力效應裝具上生活6周;恢復組:在同樣的裝具上生活6周,隨后在籠內(nèi)自由活動4周。用HE染色、透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)分別觀察各組獼猴肺組織大體結構及超微結構的改變;實時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantification PCR,FQ-PCR)檢測各組獼猴肺組織MMP-1,2,3,7,8,9,11,12和13 mRNA表達情況,根據(jù)mRNA表達改變,免疫印跡法(Western blotting,WB)檢測MMP2、MMP7、MMP9在肺組織中的表達情況,免疫組織化學染色法觀察MMP2、MMP7、MMP9在肺組織中的定位表達情況。結果:HE染色提示對照組獼猴肺組織結構形態(tài)完整,無病理改變;模擬微重力組和恢復組獼猴肺組織可見肺泡間隔增厚,部分肺泡融合,肺泡腔及間質(zhì)內(nèi)可見淋巴細胞浸潤,恢復組上述改變較模擬微重力組輕。超微結構改變主要表現(xiàn)為模擬微重力組及恢復組可見肺泡上皮細胞核體積變小,形態(tài)不規(guī)則,胞質(zhì)內(nèi)板層小體(Lamellar body,Lb)數(shù)量增多、體積增大、排空加強,部分發(fā)生空泡樣變;胞質(zhì)內(nèi)線粒體腫脹。FQ-PCR結果顯示各組獼猴肺組織均不表達MMP-1,3,8,11,12,13,但可表達MMP-2,7,9;另外,檢測結果還顯示模擬微重力效應可引起獼猴肺組織MMP2 mRNA表達增強,但各組間比較差異無統(tǒng)計學意義(F=2.56,P0.05);模擬微重力效應可引起MMP7 mRNA表達減弱,模擬微重力組與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(F=4.33,P0.05),其余各組間比較,差異無顯著性(F=4.33,P0.05);模擬微重力效應可引起MMP9 mRNA表達減弱,各組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(F=0.85,P0.05)。免疫組織化學染色結果顯示各組獼猴肺組織均可表達MMP-2、7、9,陽性細胞主要見于支氣管上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞、肺泡上皮細胞,胞漿、胞核均有表達,以胞漿表達為主。WB結果顯示各組獼猴肺組織均可表達或弱表達MMP2、MMP7、MMP9蛋白,進行半定量檢測發(fā)現(xiàn),模擬微重力效應可引起獼猴肺組織MMP2、MMP7蛋白表達升高,使MMP9蛋白表達減弱。結論:模擬微重力可引起獼猴肺組織產(chǎn)生病理損傷和超微結構改變;模擬微重力可引起獼猴肺組織MMP2、MMP7蛋白表達增強,MMP9表達減弱,這些變化可能參與失重狀態(tài)下肺組織的病理損傷和超微結構的損傷過程。
【關鍵詞】:模擬微重力 獼猴 基質(zhì)金屬蛋白酶 肺組織
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R85
【目錄】:
- 中英文縮略詞對照表5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 引言11-12
- 第一部分 模擬微重力對獼猴肺組織結構的影響12-18
- 材料與方法12-15
- 結果15-17
- 討論17-18
- 第二部分 模擬微重力對獼猴肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶的影響18-35
- 材料與方法18-27
- 結果27-32
- 討論32-35
- 結論35-36
- 參考文獻36-38
- 附錄38-40
- 致謝40-42
- 綜述42-50
- 參考文獻46-50
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,本文編號:751260
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