失重／模擬失重可導(dǎo)致肺組織形態(tài)學(xué)的改變,肺動(dòng)脈高壓,肺微血管的變化,同時(shí)可引起內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。但是,失重／模擬失重所致的肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMVEC)凋亡情況已有報(bào)導(dǎo),其時(shí)間效應(yīng)和發(fā)生機(jī)制仍不清楚。因此,本課題的目的如下： 1.觀察回轉(zhuǎn)模擬失重對(duì)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡時(shí)間效應(yīng)的影響； 2.研究線粒體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在回轉(zhuǎn)模擬失重所致的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用； 3.觀察PI3K/Akt、NF-κB在回轉(zhuǎn)模擬失重所致的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的變化情況,進(jìn)一步探討與細(xì)胞凋亡的關(guān)系； 4.觀察回轉(zhuǎn)模擬失重條件下,人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞骨架的變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。 方法 為達(dá)到以上研究目的,本課題采用以下實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行研究： 1.將人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和傳代,內(nèi)皮細(xì)胞貼壁覆蓋率達(dá)到80%時(shí),收集細(xì)胞,并用于回轉(zhuǎn)模擬失重實(shí)驗(yàn)�；剞D(zhuǎn)模擬失重時(shí)間設(shè)為4個(gè)時(shí)間點(diǎn),12h、24h、48h和72h,同時(shí)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)立同步1g對(duì)照。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和透射電鏡觀察模擬失重細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化,觀察模擬失重對(duì)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡時(shí)間效應(yīng)的影響； 2.找出細(xì)胞凋亡最顯著的時(shí)間點(diǎn)后，選擇與線粒...

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1:流式細(xì)胞儀對(duì)模擬失重12hHPMVEC凋亡的定量分析

檢驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組比較。以p<0.05為差異顯著。結(jié)果1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，見圖1一圖6。1.1如圖1一圖4所示，回轉(zhuǎn)模擬失重12小時(shí)和24小時(shí)，人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡略有增加，但回轉(zhuǎn)組和對(duì)照組比較，無顯著差異。兩組細(xì)胞的凋亡率分別為:C12:2.29士0.78(n=....

圖2:回轉(zhuǎn)模擬失重12hHpMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

ClinostatlZ:3.89士1.24(n=3)，P=0.13;士1.48(n=3)，Clinostat24:4.08士0.72(n=3)，P=0.14。肖肖擠擠‘‘J嗯...內(nèi)附冷到認(rèn)丫干ITc}}}}}}}}}}·亥扮扮‘，···、:::rop，O禪.0一。O戶，01，.....

圖3:流式細(xì)胞儀對(duì)模擬失重24hHPMVEC凋亡的定量分析

圖3:流式細(xì)胞儀對(duì)模擬失重24hHPMVEC凋亡的定量分析歲s川的。側(cè)d。VdCollClinostat圖4:回轉(zhuǎn)模擬失重24hHPMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

圖4:回轉(zhuǎn)模擬失重24hHPMVEC凋亡率的變化(p>0.05)

結(jié)果1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，見圖1一圖6。1.1如圖1一圖4所示，回轉(zhuǎn)模擬失重12小時(shí)和24小時(shí)，人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡略有增加，但回轉(zhuǎn)組和對(duì)照組比較，無顯著差異。兩組細(xì)胞的凋亡率分別為:C12:2.29士0.78(n=3)，ClinostatlZ:3.89士1.24(n=....

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