在法醫(yī)鑒定里,精斑是性犯罪中的重要證據(jù)之一,其作用不可替代,一般可以作為案件定性的主要依據(jù)。顯微鏡鏡檢精子細胞、免疫學方法以及組織化學等方法常用于檢驗精斑,但每種檢測方法都存在一定的優(yōu)勢及不足。目前,在法醫(yī)鑒定中得以廣泛應用的精斑分離方法是差異裂解法,然而在實際操作中,由于檢材的多樣性,存在精斑混合女性分泌物、精斑混合血斑、多人精斑、精子量過少等復雜情況,能否有效處理這些情況將直接影響到后期精斑檢測的準確性,而差異裂解法只能解決部分問題,有時難以得到嫌疑人的單一DNA分型。因此,對混合精斑進行分離確證是近年來研究的重點和物證檢驗中的難點。研究表明,精斑試紙條法是檢測前列腺特異性抗原(PSA)的靈敏度較高的簡便方法,可以用于確證精斑的存在,達到快速篩選的效果;免疫磁珠法采用磁性分離技術,可以捕獲精斑中的精子核酸,用于純化、擴增和檢測;激光捕獲顯微分離技術則可以捕獲單一精子,以確保準確獲得單一DNA分型。因此,針對傳統(tǒng)檢測方法所存在的不足,本文聯(lián)用精斑試紙條法、免疫磁珠法及激光捕獲顯微分離技術此三種技術,配合低體積擴增,必要時將獲得的所有分型進行匯總、疊加,最后進行分類,從而獲得每個精子供...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1免疫磁珠法提取核酸的原理及步驟[20]

圖1免疫磁珠法提取核酸的原理及步驟[20]在免疫磁珠法提取核酸的原理的基礎上，本文使用的賽默飛公司的KingFisher核酸純化儀實現(xiàn)了全自動化批量處理。其采用永久磁棒和一次性磁套，當磁套套在磁棒尖端放入溶液中時，磁棒通電時能產(chǎn)生磁場，溶液中帶有磁性核心的的磁珠被吸引、收集....

圖2激光壓力彈射的過程

13/45圖2激光壓力彈射的過程[46]1.3其他1.3.1短串聯(lián)重復序列短串聯(lián)重復序列（shorttandemrepeat,STR）是一種遺傳標記，在當前的法醫(yī)學檢驗工作中應用較廣。短串聯(lián)重復序列，核心序列包括2-6bp，為長度多態(tài)性序列，包含較大的信息量，遺傳多態(tài)性....

圖3-1自愿者C精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

空白區(qū)域作為陰性對照只在控制區(qū)出現(xiàn)一條紫紅色線條，未見陽性反應，見表1。表1抗前列腺特異性抗原膠體金免疫試紙條法檢測情況自愿者A自愿者B自愿者C混合精斑陰性對照檢測結果++++-注：“+”為陽性，“-”為陰性3.1.2一般DNA提取和超....

圖3-2自愿者B精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖

圖3-2自愿者B精斑經(jīng)一般DNA提取的Y-STR分型圖經(jīng)磁珠法替代第二步消化步驟，用KingFisher核酸純化儀按儀器操作規(guī)程完成自動提取純化的4份DNA檢材獲得的精斑STR分型結果中，3份單一精斑檢材均得到完整STR分型結果，RFU值在....

本文編號：3944907