電擊死大鼠心臟S100A1、iNOS、Fn蛋白變化的研究
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【摘要】:目的:電流通過人體之后可以引起感知的物理效應,稱之為電擊。當電流通過人體可引起局部皮膚和其他組織損傷和器官功能障礙,稱為電流損傷或電損傷。若是因電流作用導致機體死亡,稱作電擊死(electricdeath)。在日常生活和工農業(yè)生產中,由電流所造成的傷亡目前較為常見。根據(jù)9695例電擊造成事件資料的統(tǒng)計結果表明,電擊死的比例達到了3.1%。電流斑(electric mark)又稱電流印記,其形成是由于帶電導體與皮膚接觸,電流通過完整皮膚時,在接觸處產生的焦耳熱及電解作用所造成的一種特殊皮膚損傷。電流斑是診斷電擊死的主要形態(tài)學依據(jù),根據(jù)統(tǒng)計在220V電壓所致電擊傷(死)中只有1/3的案例出現(xiàn)典型的皮膚電流斑。盡管學者們對電擊死皮膚及其他組織器官的形態(tài)學及分子生物學水平的變化進行了研究,但目前無電流斑電擊致死的法醫(yī)病理學診斷尚缺乏形態(tài)學依據(jù),生前與死后電擊的鑒別仍是法醫(yī)病理學鑒定的難點問題之一。因此,本研究在建立大鼠電擊死模型的基礎上,觀察電擊死心臟組織形態(tài)學的變化,并對心臟S100A1、iNOS、Fn蛋白的變化進行研究,以期為電擊死的法醫(yī)病理學診斷提供依據(jù)。 方法:健康Sprague-Dawle(SD)大鼠56只,雌雄不限,體重220g±10g。適應環(huán)境喂養(yǎng)7天,隨機7組,每組8只。 對照組、死后30分鐘對照組、死后60分鐘對照組:對照組采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后仰臥位固定在鼠架上斷頭處死,立即開胸后取出心臟,放入4%的多聚甲醛固定液中固定。死后30分鐘組和死后60分鐘組采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后斷頭處死大鼠,室溫放置至相應時間點后開胸取出心臟放入4%的多聚甲醛固定液中固定。心臟組織制備石蠟切片,進行HE和Heidenhain染色觀察,應用免疫組織化學方法觀察心臟S100A1、iNOS、Fn蛋白進行觀察。 電擊死組:采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后將大鼠仰臥位固定在鼠架上,對側的前后肢連接自制的電擊設備,閉合電路后用220V電壓電擊大鼠2分鐘致死,關閉電源后撤去電擊設備后即刻取開胸取出心臟,實驗內容等同上。 死后電擊組、死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組:采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后斷頭處死大鼠,仰臥位固定在鼠架上,分別在死后即刻、死后30分鐘、死后60分鐘用220V家用電壓電擊大鼠2分鐘,關閉電源后撤去電擊設備即刻取開胸出心臟,實驗內容同上。 數(shù)據(jù)以“均數(shù)±標準差(Mean±SD)”表示,用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析,各組均數(shù)的比較行單因素方差分析(ANOVA),用最小顯著差法(least significant difference, LSD)作兩兩比較,以P0.05為有顯著統(tǒng)計學差異。 結果: 1心臟HE染色結果 對照組的心肌組織結構清晰可見,心肌細胞大小一致,以心肌動靜脈為中心呈索狀整齊排列,死后30分鐘組、死后60分鐘組的心肌細胞染色僅見部分區(qū)域有水腫表現(xiàn),局部嗜酸性變。 電擊死組心肌細胞間質有水腫表現(xiàn),,胞漿染色變淡,胞核染色變淡、增大,心肌層有斷裂的表現(xiàn),心肌收縮帶壞死,部分心肌細胞有嗜酸性變。 死后電擊組的心肌細胞有輕度的水腫,胞漿染色變淡,胞核染色變淡、增大,部分心肌細胞有嗜酸性變;死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組的心肌細胞染色僅見部分區(qū)域有水腫表現(xiàn),局部嗜酸性變。死后電擊各組心肌無明顯斷裂。 2心臟海登漢氏染色(Heidenhain染色)結果 對照組大鼠心臟Heidenhain染色下心肌細胞胞漿染成紅色,細胞核呈黑色,細胞大小一致,死后30分鐘對照組、死后60分鐘對照組心臟Heidenhain染色僅見部分區(qū)域染色為黑色。電擊死組大鼠心肌Heidenhain染色大部為黑色,呈片狀或條狀的著色?梢娦募±w維斷裂和心肌收縮帶壞死,死后電擊組的大鼠心肌組織Heidenhain染色局部為黑色,死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組較死后電擊組黑染有所擴大。 3心臟S100A1、iNOS蛋白和Fn蛋白表免疫組織化學染色(IHC)結果 S100A1:對照組心肌細胞漿呈現(xiàn)均勻一致的棕黃色陽性染色。死后30分鐘對照組、死后60分鐘對照組鏡下觀察與對照組比較無明顯差異。電擊死組陽性表達面積變小。死后電擊組的鏡下觀察陽性表達面積介于正常組和電擊死組之間,死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組鏡下觀察與對照組比較無明顯差異。 iNOS:對照組心肌細胞內胞漿著色,死后30分鐘對照組、死后60分鐘對照組與對照組比較無明顯差異。電擊死組心肌細胞胞漿胞漿黃染增強。死后電擊組的變化介于對照組和電擊死組之間,死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組鏡下觀察與對照組比較無明顯差異。 Fn:對照組心肌細胞未見陽性著色,死后30分鐘對照組、死后60分鐘對照組與對照組比較無明顯差異。電擊死組心肌細胞出現(xiàn)陽性著色。死后電擊組陽性著色介于正常組和電擊死組之間,死后30分鐘電擊組、死后60分鐘電擊組與對照組比較無明顯差異。 結論:本研究通過HE染色、Heidenhain染色和免疫組織化學方法觀察電擊死心臟的法醫(yī)病理學改變,得出以下結論: 1HE染色及Heidenhain染色所見心肌纖維斷裂及心肌收縮帶壞死對電擊死診斷有一定意義。 2心臟S100A1、iNOS、Fn蛋白免疫組化染色提示,電擊死引起心肌上述蛋白發(fā)生變化,對無電流斑診斷、生前電擊和死后電擊的鑒別有一定意義。
【關鍵詞】:法醫(yī)病理學 電擊死 心臟 S100A1 iNOS Fn
【學位授予單位】:河北醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:D919.4
【目錄】:
- 摘要4-7
- ABSTRACT7-11
- 英文縮寫11-12
- 前言12-13
- 材料與方法13-19
- 結果19-21
- 附圖21-37
- 附表37-40
- 討論40-45
- 結論45
- 參考文獻45-50
- 綜述 電擊死研究的新進展50-59
- 參考文獻54-59
- 致謝59-60
- 個人簡歷60
【參考文獻】
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本文編號:340448
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