毒品戒斷后的高復吸率是當今社會嚴重的公共衛(wèi)生問題。而戒斷者再次接觸吸毒相關的環(huán)境線索引起的潛伏心理渴求現(xiàn)象是導致復吸的重要因素。TMEFF1（Tomoregulin-1）是一種新型跨膜蛋白,有研究證明TMEFF1是成癮相關蛋白（addicsin）的調(diào)節(jié)因子,參與嗎啡成癮過程,而其在嗎啡復吸尤其是心理渴求過程中的作用鮮有報道。因此本研究重點關注TMEFF1蛋白在嗎啡潛伏心理渴求中的作用。蛋白功能的調(diào)控涉及多種機制,其中微小RNA（microRNA,miRNA）發(fā)揮著重要作用。miRNA是指長約22個核苷酸的單鏈非編碼RNA,主要在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達。因此本研究擬通過高通量測序、生物信息學分析、轉(zhuǎn)錄組學等技術,闡明miR-592-3p靶向TMEFF1調(diào)控機制在嗎啡潛伏心理渴求過程中的作用。目的:本研究以TMEFF1為目標觀察其對嗎啡潛伏心理渴求的影響,同時尋找其上游miR-592-3p的調(diào)控機制,為預防嗎啡復吸提供新思路。方法:小鼠皮下注射（s.c.）生理鹽水或嗎啡（1 mg/kg或5 mg/kg）交替訓練6天,在嗎啡戒斷后第1天（T1/WD1）、第14天（T2/WD14）進行小鼠CP... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學河北省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

線索誘導的嗎啡潛伏心理渴求模型建立Fig.1Theestablishmentofcue-inducedincubationofmorphinecravingmodel.

232.TMEFF1蛋白細胞定位及伏隔核腦區(qū)示意圖如圖2.A所示，取小鼠伏隔核組織進行TMEFF1蛋白（綠色熒光）、神經(jīng)元核抗原抗體（NeuN，紅色熒光）和膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP，紅色熒光）免疫熒光染色，激光共聚焦顯微鏡下觀察，結(jié)果顯示綠色熒光標記的TMEFF1蛋白主要表達于細胞膜，少量表達于細胞漿，并且能與標志神經(jīng)元細胞核（NeuN）的紅色熒光共表達，而與標志星形膠質(zhì)細胞（GFAP）的紅色熒光無共存，表明TMEFF1蛋白主要表達于伏隔核神經(jīng)元細胞膜（少量存在于細胞漿），而非星形膠質(zhì)細胞。圖2.B為小鼠伏隔核腦區(qū)示意圖，紅色箭頭表示伏隔核核部（NAcC），藍色箭頭表示伏隔核殼部（NAcSh）。圖2TMEFF1蛋白細胞定位及伏隔核腦區(qū)示意圖Fig.2TMEFF1proteinlocalizationandsketchmapofthenucleusaccumbensFig.2ALocalizationofTMEFF1proteinwasshowedbyimmunofluorescenceanalysisunderlaser-scanningconfocalmicroscope.TMEFF1proteinwaslabeledwithgreenfluorescence.Neuronnuclei(NeuN)andastrocytes(GFAP)werelabeledwithredfluorescence.(Scalebar=75μm).Fig.2BSketchmapofthenucleusaccumbens(NAc).Redarrowsrepresentedthenucleusaccumbenscore(NAcC)andbluearrowsrepresentedthenucleusaccumbensshell(NAcSh).3.TMEFF1蛋白及其mRNA在嗎啡潛伏心理渴求過程中的變化如圖3.A-F所示，為了研究環(huán)境線索刺激對TMEFF1表達的影響，在CPP訓練結(jié)束后將小鼠分為測試組（Test）和未測試組（Notest）。圖3.A

25圖3TMEFF1蛋白及其mRNA在嗎啡潛伏心理渴求過程中的變化Fig.3ChangesofTMEFF1proteinandmRNAinincubationmodelofmorphinecravingFig.3ANosignificantchangeofTMEFF1mRNAwasobservedatthestagesofT1andT2inBothNAcCandNAcShinTestgroups.Fig.3BInNoTestgroups,therewasn’tTMEFF1mRNAchangesatthestagesofWD1andWD14inBothNAcCandNAcSh.Fig.3CExpressionofTMEFF1proteinatT2increasedintheNAcCinTestgroups,comparedtoT1,*P<0.05,butnochangeintheNAcSh.Fig.3ETheexpressionofTMEFF1proteininNAcCandNAcShinNoTestgroupshowedNosignificantchangeinWD1andWD14.Alldatawereexpressedasmean±S.E.M.(eachgroupn=4).

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]MicroRNA-132 in the Adult Dentate Gyrus is Involved in Opioid Addiction Via Modifying the Differentiation of Neural Stem Cells[J]. Meng Jia,Xuewei Wang,Haolin Zhang,Can Ye,Hui Ma,Mingda Yang,Yijing Li,Cailian Cui.  Neuroscience Bulletin. 2019(03)
[3]miRNA在植物種子發(fā)育過程中的作用[J]. 龔淑敏,丁艷菲,朱誠.  遺傳. 2015(06)

博士論文
[1]中腦邊緣皮質(zhì)多巴胺系統(tǒng)在線索觸發(fā)復吸中的精確調(diào)控作用[D]. 景漫毅.軍事科學院 2019
[2]超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子（HCN）通道對甲基苯丙胺成癮的調(diào)節(jié)作用及機制研究[D]. 曹丹旎.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2016

碩士論文
[1]伏隔核中不同部位在成癮機制中的作用[D]. 王慶豐.中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學 2003



本文編號：3397558