【目的】探討小鼠間充質(zhì)干細胞在中劑量Χ射線照射后的損傷情況、相應(yīng)機制以及Wnt信號通路在放射后衰老細胞中的表達。【方法】小鼠間充質(zhì)干細胞C3H10T1/2行3.5GyΧ射線照射,于照射后各時間點行Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色檢測細胞凋亡,流式測細胞周期,行SA-β-gal染色檢測細胞衰老。采用Realtime PCR技術(shù)檢測Fas及其配體FasL,p53及其下游組分p21^WAF1基因的表達,免疫熒光法檢測細胞Fas蛋白的表達。Realtime PCR技術(shù)檢測衰老細胞中經(jīng)典Wnt信號通路中Wnt3a,非經(jīng)典Wnt信號通路中Wnt5a及與Wnt信號存在串話的shh信號表達。【結(jié)果】Hoechst33258染色和Annexin V/FITC染色顯示細胞在照射后3h開始出現(xiàn)凋亡,至12h達高峰,此后凋亡率逐漸下降。Fas、FasL mRNA在照射后3h開始增高,12h達到高峰,照射后一周恢復(fù)正常。同樣,免疫熒光染色顯示照射后Fas蛋白表達增加,于照射后6h熒光強度開始增加,至12h呈強陽性反應(yīng),至24h基本恢復(fù)正常。放射后72hSA-β-... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

哺乳動物中兩種類型細胞衰老

小鼠和人類細胞中參與細胞衰老的信號通路

圖 3 .經(jīng)典 Wnt 信號通路參與細胞衰老過程Wnt 家族是一類分泌型糖蛋白，在胚胎發(fā)育的多個階段起重要作用。許多研究表明 Wnt 信號通路對干細胞的自我更新和擴增具有重要的支持作用 。Wnt 信號通路包括經(jīng)典 Wnt 信號通路和非經(jīng)典 Wnt 信號通路。目前為止，在哺乳動物至少有 19 種 Wnt蛋白，其中 Wnt1、2、3、3a、8、8b 屬經(jīng)典 Wnts，Wnt5、5a、5b、6、7a、11 屬非經(jīng)典 Wnts。在間充質(zhì)干細胞表達多個 Wnt 配體如 Wnt2、4、5a、11、16 等。經(jīng)典 Wnt信號主要促進間充質(zhì)干細胞增殖和保持其處于未分化狀態(tài)，而非經(jīng)典 Wnt 通路則在調(diào)節(jié)和促進 MSC 向成骨和成軟骨等多向分化方面發(fā)揮重要作用,可與經(jīng)典 Wnt 通路相互競爭抑制【12】。以往許多研究表明 Wnt 信號的激活可延緩細胞衰老，對某些衰老相關(guān)的疾病如老年癡呆癥、糖尿病、早衰綜合癥、腫瘤和骨質(zhì)疏松病等的研究也表明，激活的 Wnt 通路可減緩細胞的衰老。但是，近年來許多研究顯示 Wnt 信號的持續(xù)活化會導(dǎo)致干細胞的衰老。LIU 等【13】通過對 Klotho 衰老小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)：Wnt 通路的持

【參考文獻】：
期刊論文
[1]放射損傷對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨潛能及造血干細胞龕位的影響[J]. 馬杰,史明霞,李炳宗,李靜,房佰俊,孫慧,趙春華.  西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2009(03)
[2]輻射導(dǎo)致小鼠骨髓基質(zhì)細胞衰老的機制研究[J]. 張可杰,朱艷,孫漢英,黃麗芳,付勁蓉,劉文勵.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2006(48)
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