【摘要】：研究背景和目的:近年來,環(huán)境中輻射強度日益增強,頻譜不斷拓寬,受影響人群范圍日益擴大。電磁技術的快速發(fā)展和廣泛應用,給人類在眾多領域帶來巨大利益的同時,也對其生存環(huán)境造成了極大的污染,環(huán)境電磁污染給人體健康帶來的影響和潛在危害受到廣泛關注。電磁輻射能引起細胞氧化應激(Oxidative Stress,OS),導致細胞損傷,進而引起組織病理性改變。在細胞損傷中,DNA氧化損傷(包括堿基損傷,堿基缺失,鏈斷裂,DNA-蛋白鉸鏈)積累可能引起基因突變,產(chǎn)生腫瘤。國內(nèi)外關于致癌性的一系列研究認為,中樞神經(jīng)系統(tǒng)是電磁輻射最易受累的靶點。DNA氧化損傷與阿爾茲海默癥(AD)、帕金森綜合征(PD)等神經(jīng)退行性疾病相關。因此射頻電磁輻射(radio frequency electromagnetic field,RF-EMF)與神經(jīng)系統(tǒng)DNA氧化損傷的相關研究已成為近年來該領域的研究熱點。射頻電磁輻射引起神經(jīng)細胞DNA氧化損傷的報道較多,但其完整機制尚未明確,900MHz射頻電磁輻射導致細胞DNA氧化損傷水平及其機制報道甚少。為此,本研究擬從DNA氧化損傷途徑探討RF-EMF對神經(jīng)母細胞瘤細胞(Neuro-2a)DNA損傷效應及發(fā)生機制,以期為電磁輻射致神經(jīng)損害的機制研究提供更多的線索和依據(jù)。同時,對相關疾病的預防、病因診斷、治療、臨床護理和家庭看護提供更好的指導。研究內(nèi)容及方法:(1)神經(jīng)母細胞瘤細胞(Neuro-2a)和實驗分組:選用目前普遍用于離體條件下代替中樞神經(jīng)系統(tǒng)細胞的成神經(jīng)瘤細胞系Neuro-2a作為研究對象,其在研究各種有害因素造成的神經(jīng)毒性時能很好的顯現(xiàn)出形態(tài)、發(fā)育和信號特性方面的改變。采用全球手機通話(Global System for Mobile communications,GSM)模式900 MHz的射頻電磁波輻射小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞,持續(xù)輻照24 h,每組設置對應的假暴露組和對照組(陰性對照和陽性對照)。射頻電磁輻射暴露系統(tǒng)s Xc-900由瑞士IT’IS公司提供,頻率900 MHz,比吸收率(Specific Absorption Rate,SAR)分別為0.5 W/kg、1 W/kg、2 W/kg。(2)900 MHz電磁輻射對小鼠Neuro-2a的DNA氧化損傷作用:采用CCK-8試劑盒,檢測暴露結束時細胞活力,堿性彗星實驗檢測Neuro-2a DNA鏈斷裂情況,活性氧檢測試劑盒DCFH-DA探針測定細胞內(nèi)活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平,用FPG-修飾堿性彗星實驗檢測DNA氧化堿基損傷程度。(3)8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)RNA干擾后,電磁輻射對小鼠Nuero-2a DNA氧化損傷的影響:為探討OGG1是否參與修復Neuro-2a從RF-EMF暴露誘導的DNA損傷,本實驗采用OGG1 si RNA抑制胞內(nèi)OGG1的表達,并用Real time-PCR技術檢測OGG1 m RNA干擾效率;采用CCK-8試劑盒,檢測OGG1下調(diào)后,Neuro-2a細胞活力,用堿性彗星實驗檢測OGG1 RNA干擾后,Neuro-2a DNA鏈斷裂程度,FPG-修飾堿性彗星實驗檢測OGG1 RNA干擾后Neuro-2a DNA堿基損傷水平。研究結果:1.900 MHz電磁輻射暴露后,Neuro-2a細胞暴露于較高強度(2 W/kg)的射頻電磁輻射(radio frequency electromagnetic field,RF-EMF)24 h后,與假暴露組相比,活性氧含量顯著增加(p0.05),FPG-修飾堿性彗星實驗發(fā)現(xiàn)暴露于2 W/kg RF-EMF顯著增加DNA堿基損傷(p0.05);但900 MHz電磁輻射(0.5 W/kg、1 W/kg、2 W/kg)不足以降低細胞活力(p0.05)和引起DNA鏈斷裂(p0.05)。2.OGG1 RNA干擾處理后,與對照組相比OGG1 si RNA組m RNA下降了67%,差異顯著(p0.05);FPG-修飾堿性彗星實驗發(fā)現(xiàn)OGG1 RNA干擾處理后,與相對應的假暴露組和對照組比,加重RF-EMF(1 W/kg、2 W/kg)暴露引起的氧化DNA堿基損傷(p0.05),但細胞活力檢測結果(0.5、1、2 W/kg)與堿性彗星實驗結果(0.5、1、2 W/kg)均無顯著差異(p0.05)。研究結論:在900 MHz射頻電磁輻射暴露模型下,連續(xù)暴露24 h,造成Neuro-2a細胞DNA氧化堿基損傷,但不足以引起DNA鏈斷裂和細胞活力的改變,OGG1干擾后,Neuro-2a細胞對電磁輻射的敏感性增加,氧化損傷加重,OGG1參與了堿基修復過程,可能是防止電磁輻射引起遺傳毒性的潛在靶點。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R818

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 呂嘉春,吳中亮,陳家X,紀衛(wèi)東,施侶元;DNA氧化損傷在肺癌發(fā)生中的作用[J];廣州醫(yī)學院學報;2003年02期

2 劉國安;楊燕;丁蘭;楊慶明;楊紅;;幾種天然抗氧化劑對DNA氧化損傷的保護作用[J];四川大學學報(自然科學版);2006年01期

3 仲偉鑒,印木泉;廢氣煤煙顆粒提取物誘發(fā)DNA氧化損傷的實驗研究[J];第二軍醫(yī)大學學報;2000年09期

4 哈木拉提·吾甫爾,阿不都熱依木·玉素甫,阿布都艾尼·阿布力米提;羥自由基引發(fā)的DNA氧化損傷機理的研究進展[J];新疆醫(yī)科大學學報;2000年03期

5 呂曉華,王瑞淑;鎂對人臍靜脈內(nèi)皮細胞DNA氧化損傷的影響[J];營養(yǎng)學報;2001年04期

6 柯躍斌,吳少庭,陳裕明,黃薇,吳麗明;肉類燒烤等烹調(diào)師DNA氧化損傷監(jiān)測研究[J];中國熱帶醫(yī)學;2004年04期

7 陳吉海;杜宏;葉小珍;陳慧梅;王堅;;2型糖尿病微血管并發(fā)癥與DNA氧化損傷的關系[J];江蘇醫(yī)藥;2009年03期

8 蔡善榮;鄭樹;張?zhí)K展;彭佳萍;;過氧化氫誘導腸上皮干細胞DNA氧化損傷模型的建立[J];浙江大學學報(醫(yī)學版);2006年04期

9 高玉楠;楊靖;宋沁馨;李博;陳國華;丁黎;;8-羥基脫氧鳥苷作為DNA氧化損傷標志物在疾病診斷中的應用[J];藥學與臨床研究;2012年03期

10 徐文超;李勇;李云云;張晶;馬智峰;馬寧;馬彩鳳;云奮;裴秋玲;;低濃度砷暴露者皮膚損害及DNA氧化損傷[J];中國公共衛(wèi)生;2013年04期

相關會議論文 前10條

1 黃雯;王旗;;DNA氧化損傷檢測方法進展[A];全國自由基醫(yī)學與毒理學學術交流大會論文（摘要）集[C];2011年

2 于珊珊;陳冠軍;張先恩;劉巍峰;;釀酒酵母DNA氧化損傷反應修復體系的研究[A];2008年中國微生物學會學術年會論文摘要集[C];2008年

3 毛廣運;楊佐鵬;王怡;任春生;葉曉蕾;鐘崇洲;劉佳明;連國軍;葛西宏;郭小娟;;環(huán)境砷中毒人群皮膚損害與DNA氧化損傷的關聯(lián)性研究[A];中國環(huán)境科學學會2009年學術年會論文集（第四卷）[C];2009年

4 龔麗景;趙麗;何凌驍;李巖;;遞增負荷游泳對大鼠肝臟細胞DNA氧化損傷的影響[A];第6屆全國青年體育科學學術會議論文摘要集[C];2011年

5 張文眾;張曉鵬;賈旭東;黃光偉;劉兆平;宋雁;劉澤嵌;崔文明;張馨;王偉;李寧;;美國大杏仁對吸煙導致DNA氧化損傷的保護作用研究[A];第四屆第二次中國毒理學會食品毒理專業(yè)委員會學術會議論文集[C];2006年

6 襲著革;晁福寰;孫泳梅;;DNA氧化損傷生物學標志物-8-羥基鳥苷的KPLC-EC分析方法及特性研究[A];新世紀預防醫(yī)學面臨的挑戰(zhàn)——中華預防醫(yī)學會首屆學術年會論文摘要集[C];2002年

7 趙勤;李雪竹;嚴海東;;維持性血液透析患者外周血淋巴細胞DNA氧化損傷的研究[A];“中華醫(yī)學會腎臟病學分會2004年年會”暨“第二屆全國中青年腎臟病學術會議”論文匯編[C];2004年

8 柯躍斌;程錦泉;帥志紅;何彩;鄧三茂;譚春榮;;深圳哈薩克族移民DNA氧化損傷的分子流行病學研究[A];第八屆粵港澳臺預防醫(yī)學學術交流會議論文匯編[C];2008年

9 茍巧;王春燕;張翠蘭;佟鵬;蘇旭;;α粒子誘發(fā)人支氣管上皮細胞BEP2D惡性轉(zhuǎn)化中細胞內(nèi)脂質(zhì)和DNA氧化損傷研究[A];低碳生活與健康損害論壇——中國環(huán)境誘變劑學會風險評價專業(yè)委員會全國第十三屆學術會議暨第四屆第5次委員會會議論文集[C];2011年

10 孫彩霞;陳慧梅;郭文文;張葵;朱大龍;王亞平;;AluYb8MUTYH基因常見變異增加DNA氧化損傷及衰老相關性疾病的發(fā)病風險[A];中國活性氧生物學效應學術會議論文集（第一冊）[C];2011年

相關博士學位論文 前4條

1 白銳;DNA氧化損傷與NO異常釋放及細胞凋亡在激素性股骨頭缺血壞死中作用的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

2 蔡振明;堿基切除修復基因功能變異、DNA氧化損傷與慢性腎功能衰竭的風險機制研究[D];南京大學;2013年

3 方建龍;苯并（a）芘暴露與基因多態(tài)性對機體DNA氧化損傷影響的研究[D];中國疾病預防控制中心;2012年

4 張遵真;DNA氧化損傷修復基因HOGG1低表達細胞株的建立及其應用研究[D];四川大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 馮為;鎘預暴露增加NIH3T3細胞對雙酚A誘導的DNA氧化損傷敏感作用的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

2 范燕峰;泛素連接酶RING2在苯并(a)芘染毒致人支氣管上皮細胞DNA氧化損傷中的作用和對P53-P21信號通路的影響[D];山西醫(yī)科大學;2016年

3 王瀟婭;900MHz電磁輻射對小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞DNA氧化損傷影響的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2016年

4 安玲玲;石墨烯電化學生物傳感器用于酶及DNA氧化損傷檢測研究[D];南京師范大學;2013年

5 劉紅梅;DNA剪切修復對MPTP/MPP~+致帕金森病模型DNA氧化損傷的作用研究[D];復旦大學;2009年

6 鄒存杰;DNA氧化損傷標記物8-羥基脫氧鳥苷的毛細管電泳安培檢測方法研究[D];遼寧師范大學;2009年

7 王U，

本文編號：2283318