本文選題：性別快速鑒定 + 二溫度點(diǎn)PCR法��； 參考：《貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)》2016年03期

【摘要】：目的:在案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)快速準(zhǔn)確的鎖定犯罪嫌疑人性別,縮小嫌疑人范圍,為基層公安機(jī)關(guān)案件偵查提供技術(shù)支持。方法:通過(guò)對(duì)堿裂解法進(jìn)行改良并建立人類凝固血液的基因組DNA提取方法;根據(jù)Y染色體的SRY基因序列設(shè)計(jì)特異性引物,優(yōu)化PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)SYBR Green I染色后紫外光下觀察。結(jié)果:改良?jí)A裂解法中組2所得DNA濃度為(271.08±143.28)ng/μL,顯著優(yōu)于組1所得(P0.05),且經(jīng)ITS序列驗(yàn)證均能擴(kuò)增出目的條帶;在PCR擴(kuò)增產(chǎn)物加入SYBR GreenⅠ染料后于紫外光下觀察,男性血樣的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物呈現(xiàn)綠色熒光,而女性血樣的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物未有熒光。結(jié)論:使用改良?jí)A裂解法中的組2快速提取案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)凝血DNA,進(jìn)行特異性PCR擴(kuò)增后,觀察加入SYBR Green I后的PCR產(chǎn)物紫外光下是否有綠色熒光即能判斷性別,該方法準(zhǔn)確、可靠,較常規(guī)方法縮短1~2 h。
[Abstract]:Objective: to quickly and accurately locate the gender of criminal suspects, narrow the scope of suspects, and provide technical support for the investigation of cases in grass-roots public security organs. Methods: the genomic DNA extraction method of human coagulated blood was established by modified alkaline lysis method, and specific primers were designed according to the SRY gene sequence of Y chromosome to optimize the reaction conditions of PCR amplification. The amplified products were stained by SYBR Green I and observed under ultraviolet light. Results: the concentration of ng/ in group 2 was (271.08 鹵143.28) ng/ 渭 L, which was significantly higher than that in group 1 (P0.05). The PCR products of male blood samples showed green fluorescence, while those of female blood samples did not. Conclusion: group 2 of modified alkaline lysis method was used to extract the coagulated DNA in the field of crime, and the specific PCR amplification was carried out. The results showed that the green fluorescence of the PCR product after adding SYBR Green I could determine the sex. The method was accurate and reliable. Compared with the conventional method, it shortened 1 hour by 2 hours.
【作者單位】： 貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院;貴陽(yáng)市公安局刑偵支隊(duì);
【基金】：貴州省科研廳科技計(jì)劃;項(xiàng)目編號(hào):黔科合SY[2013]3109號(hào) 貴州省普通高等學(xué)校特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目;項(xiàng)目編號(hào):黔教合KY字[2013]108號(hào)
【分類號(hào)】：D919.4

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本文編號(hào)：2068012