本文選題：蘆薈大黃素 + 鼻咽癌細(xì)胞　； 參考：《吉林大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：鼻咽癌是頭頸部發(fā)病率較高腫瘤，因其周圍器官及組織的復(fù)雜性和重要性，放射治療是其首選、主要治療方式。宮頸癌是婦女發(fā)病率較高腫瘤，無論原發(fā)還是術(shù)前及術(shù)后宮頸癌患者，大部分需要放射治療。為了提高治療效益，需要增大照射劑量；同時因射線對周圍正常組織的放射損傷，需要降低及限定閾照射劑量。盡量增大腫瘤放射劑量（一定限度內(nèi)）和盡量降低腫瘤周圍正常組織輻射劑量這一矛盾貫穿腫瘤放射治療始終。解決或縮小矛盾方法之一是使用放射增敏劑，即增加腫瘤細(xì)胞放射敏感性。 蘆薈大黃素是傳統(tǒng)中草藥蘆薈提取物，在世界各地種植廣泛、藥用使用歷史悠久。因其培植技術(shù)簡單、驗方流傳廣泛，蘆薈栽種和使用在我國民間尤其常見。蘆薈大黃素常見作用有瀉下、抗病毒、護(hù)肝及保護(hù)正常皮膚美容作用。近年來國內(nèi)外報道其具有抑制腦膠質(zhì)瘤、鼻咽癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、皮膚癌及神經(jīng)外胚層腫瘤等多種癌細(xì)胞生長作用。雖然抗腫瘤機(jī)理多方面，但機(jī)制之一是阻滯腫瘤細(xì)胞周期于放射敏感期G2/M期。根據(jù)以上理論，本實(shí)驗擬就蘆薈大黃素是否增強(qiáng)鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞放療敏感性及潛在機(jī)制做一些探索研究。 目的: 通過對蘆薈大黃素作用于鼻咽癌細(xì)胞及宮頸癌體外細(xì)胞研究，驗證其放射敏感性及潛在機(jī)制。 方法: 1、 MTT實(shí)驗：分析蘆薈大黃素對鼻咽癌細(xì)胞和細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞增殖活性的影響。 2、克隆形成實(shí)驗：觀察蘆薈大黃素、射線及蘆薈大黃素聯(lián)合射線對鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞克隆形成數(shù)的影響，分析鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞D0、Dq、N、SER及SF2等放射敏感性參數(shù)值的變化。 3、流式細(xì)胞術(shù)：在不同時間點(diǎn)分析蘆薈大黃素、射線及蘆薈大 黃素聯(lián)合射線對鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞周期分布影響。 4、免疫印跡實(shí)驗：Western blot實(shí)驗檢測蘆薈大黃素、射線及蘆薈大黃素聯(lián)合射線對鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞周期蛋白CycinB，r-H2AX蛋白表達(dá)。 5、堿性磷酸酶活性檢測：蘆薈大黃素、射線及AE聯(lián)合射線對鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞ALP活性影響。 結(jié)果 1、MTT實(shí)驗結(jié)果：蘆薈大黃素作用于體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞，隨藥物濃度增高及作用時間延長，鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞的存活率逐漸降低，具有時間、濃度依賴性。 2、細(xì)胞克隆實(shí)驗結(jié)果：相同照射劑量下，鼻咽癌細(xì)胞細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞的克隆形成數(shù)隨蘆薈大黃素濃度的增加而減��；相同濃度蘆薈大黃素條件下，鼻咽癌細(xì)胞細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞的克隆形成數(shù)隨照射劑量的增加而減小；隨蘆薈大黃素濃度的增加，CNE細(xì)胞的D0、Dq、N、SF2值均逐漸減小；SERD0、SERDq逐漸增大，以濃度依賴方式。 3、流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗結(jié)果：鼻咽癌細(xì)胞單純給藥及單純照射組G2/M期比例較對照組明顯增加；12小時蘆薈大黃素聯(lián)合照射組G2/M期比例較對照組略有增加，但低于單純照射組和單純給藥組。單純給藥組和單純照射組G0/G1期比例明顯降低。在單純給藥組S期比例明顯增加。24、48、72小時藥物和射線聯(lián)合組G2/M期比例高于對照組，但低于其它治療組，而且出現(xiàn)亞G1峰，即凋亡峰。 宮頸癌細(xì)胞單純給藥組及單純照射組G2/M期比例較對照組略有增加；12小時蘆薈大黃素聯(lián)合照射組G2/M期比例明顯增加，明顯高于單純照射組和單純給藥組。24、48和72小時聯(lián)合組G2/M期比例較對照組略有增加，但低于12小時聯(lián)合組，而且出現(xiàn)亞G1峰，即凋亡峰。48和72小時聯(lián)合組S峰比例明顯高于對照組和其它實(shí)驗組。 4、免疫印跡實(shí)驗：單純給藥組和單純照射組鼻咽癌細(xì)胞cyclin B的表達(dá)高于聯(lián)合實(shí)驗組，而且聯(lián)合實(shí)驗組cyclin B的表達(dá)在12、24、48、72小時，隨時間的延長，表達(dá)降低，以時間依賴方式。鼻咽癌細(xì)胞γ-H2AX蛋白表達(dá)在射線和蘆薈大黃素聯(lián)合組明顯強(qiáng)于對照組、單獨(dú)藥物組和射線組。 宮頸癌Hela細(xì)胞藥物和射線聯(lián)合實(shí)驗組12小時cyclin B的表達(dá)強(qiáng)于單純給藥組和單純照射組；γ-H2AX蛋白表達(dá)在射線和蘆薈大黃素聯(lián)合組明顯強(qiáng)于對照組、單獨(dú)藥物組和射線組。 5、AE、射線及AE聯(lián)合射線均提高鼻咽癌細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞ALP活性，AE聯(lián)合射線強(qiáng)于AE或射線單獨(dú)作用。 結(jié)論： 1、蘆薈大黃素抑制鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞增殖活性。 2、蘆薈大黃素增強(qiáng)鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞放射敏感性。 機(jī)制：(1)蘆薈大黃素抑制鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞增殖；（2）蘆薈大黃素使鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞G2/M期阻滯，并產(chǎn)生凋亡；（3）蘆薈大黃素聯(lián)合射線誘導(dǎo)并增強(qiáng)鼻咽癌細(xì)胞和宮頸癌細(xì)胞分化。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R730.55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1938679