發(fā)布時間：2018-05-18 23:36

  本文選題：小鼠 + 基因敲除��； 參考：《軍事醫(yī)學》2015年06期

【摘要】：目的構建紅細胞分化相關基因(EDAG)敲除小鼠并研究其對低劑量輻射損傷的敏感性。方法利用鋅指核酸酶技術(ZFNs)建立EDAG敲除小鼠模型;通過外周血細胞計數(shù)、骨髓細胞的DNA損傷和集落形成能力評價低劑量輻射損傷。對野生型及EDAG敲除小鼠進行劑量率為0.31 Gy/min的X線照射,1 min/d,連續(xù)照射7 d,小鼠累計照射劑量為2.17 Gy。在X線照射后第1、3、5、7天稱重并進行血常規(guī)檢測(n=7);照射后第3天分離小鼠骨髓細胞,利用免疫熒光實驗檢測DNA損傷標志物p-H2A.x的表達水平(n=3);照射后第5天分離小鼠骨髓細胞,接種集落并于7 d后進行集落計數(shù)(n=3)。結果成功建立了EDAG敲除小鼠模型并在蛋白水平進行了敲除效果的鑒定;X線照射后第3天,與野生型相比,EDAG敲除小鼠白細胞明顯減少,敲除小鼠骨髓細胞DNA損傷標志物p-H2A.x表達水平增加;X線照射7 d后骨髓細胞的集落形成能力降低。結論研究發(fā)現(xiàn)EDAG敲除小鼠對低劑量輻射誘導的損傷更加敏感,表現(xiàn)為血細胞數(shù)量減少,骨髓細胞成集落能力下降,DNA損傷增加。表明EDAG敲除小鼠作為一種對輻射高度敏感的動物模型,可作為低劑量輻射損傷生物學效應評價的有力工具。
[Abstract]:Objective to construct erythrocyte differentiation related gene (EDAG) knockout mice and study its sensitivity to low dose radiation injury. Methods EDAG knockout mice model was established by zinc-finger nuclease technique, and low dose radiation damage was evaluated by peripheral blood cell count, DNA damage and colony forming ability of bone marrow cells. Wild type and EDAG knockout mice were irradiated at a dose rate of 0.31 Gy/min for 1 min / d for 7 days, and the cumulative dose was 2.17 Gy. The mice bone marrow cells were isolated on the third day after irradiation, and the expression level of the DNA damage marker p-H2A.x was detected by immunofluorescence assay. The bone marrow cells were isolated on the 5th day after irradiation. The colony was inoculated and counted 7 days later. Results the mouse model of EDAG knockout was successfully established and the effect of knockout was confirmed at the protein level. On the 3rd day after irradiation, the leukocyte of EDAG knockout mice was significantly decreased compared with that of wild type mice. The expression level of DNA damage marker p-H2A.x in knockout mice increased the colony forming ability of bone marrow cells decreased after X-ray irradiation for 7 days. Conclusion the EDAG knockout mice were more sensitive to the damage induced by low dose radiation, showing that the number of blood cells decreased, the colony forming ability of bone marrow cells decreased and the damage of bone marrow cells increased. As a highly sensitive animal model, EDAG knockout mice can be used as a powerful tool to evaluate the biological effects of low dose radiation damage.
【作者單位】： 天津大學化工學院;軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(30570781,81222005)
【分類號】：R811.5

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 劉自民;于洪升;崔復憲;;低劑量輻射誘導適應性反應的研究進展[J];齊魯醫(yī)學雜志;2007年03期

2 董小明;鄭巍薇;尹榮華;詹軼群;楊曉明;李長燕;;利用ChIP-seq技術研究轉錄因子EDAG在全基因組的結合譜[J];中國生物化學與分子生物學報;2013年06期

3 鄭巍薇;楊揚;張美江;董小明;唐劉軍;王曉輝;詹軼群;于淼;葛常輝;寧紅梅;李長燕;楊曉明;;敲低EDAG加強NPM1蛋白的降解并增加AML病人對藥物的敏感性(英文)[J];生物化學與生物物理進展;2013年09期

【共引文獻】

相關期刊論文 前7條

1 石洋;馬小彤;;胚胎發(fā)育相關基因(EDAG)的研究進展[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2005年05期

2 劉影;;基于智能控制的微管電泳檢測技術[J];基因組學與應用生物學;2015年05期

3 周穎,凌斌,陳崢崢,王群華,沈國棟,朱園園,陳敏,許恬怡,姚鳳球;胚胎發(fā)育相關基因在子宮內膜異位癥組織中的表達[J];中國臨床保健雜志;2005年05期

4 趙海波;龍騰河;甘莉;楊偉江;王國棟;羅煥江;潘忠誠;;CT低劑量掃描在顱腦損傷和腦出血復查中的必要性[J];中國輻射衛(wèi)生;2008年04期

5 張元梅;于洪升;劉自民;魏國菁;張煒;孫偉華;;低劑量輻射誘導Lewis細胞適應性反應的觀察[J];齊魯醫(yī)學雜志;2011年05期

6 林正怡;孟慶勇;;p53基因和蛋白質表達在低劑量輻射誘導適應性反應中的研究進展[J];中國輻射衛(wèi)生;2012年04期

7 畢俊杰;董小明;鄭巍薇;詹軼群;葛志強;楊曉明;李長燕;;敲低EDAG抑制乳頭狀甲狀腺癌細胞的增殖[J];中國生物化學與分子生物學報;2014年06期

相關博士學位論文 前5條

1 徐誠望;EDAG調控造血的分子機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2008年

2 郭蔚瑩;低劑量輻射聯(lián)合多種干預因素促進糖尿病皮膚創(chuàng)面修復的研究[D];吉林大學;2008年

3 左雅慧;輻射誘發(fā)HL-7702細胞基因組不穩(wěn)定性研究[D];蘇州大學;2010年

4 張杰;TCTP在低劑量電離輻射適應性反應中的作用及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2009年

5 趙銀龍;二維及三維培養(yǎng)條件下電離輻射誘導成纖維細胞適應性反應及其機制研究[D];吉林大學;2015年

相關碩士學位論文 前8條

1 韓榮飛;馬鞍型輻射劑量—效應曲線和低能離子濺射作用的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2010年

2 石洋;胚胎發(fā)育相關基因-EDAG的誘導表達及蛋白純化[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

3 李揚;THAP11作為多聚谷氨酰胺疾病候選致病基因及候選抑癌基因的功能研究[D];安徽醫(yī)科大學;2008年

4 佟青s，

本文編號：1907726