本文關(guān)鍵詞：出生前DEHP暴露對大鼠下丘腦及生殖腺GnRH及GnRHR表達(dá)的影響

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【摘要】：目的探討出生前暴露于鄰苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)對子代雌雄鼠生殖神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響及其作用機(jī)制。方法將成功受孕的32只孕鼠隨機(jī)分為溶劑對照組(玉米油)以及2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg DEHP三個劑量組,每組8只。自G14~G19進(jìn)行連續(xù)灌胃染毒。隨機(jī)選取48只子代新生鼠,于出生后24小時內(nèi)稱重、斷頭處死后取下丘腦,提取RNA。其余子代大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)至出生后第21天斷乳,斷乳后雌雄鼠分籠飼養(yǎng)。子代鼠飼養(yǎng)至約70日齡時,從每窩中隨機(jī)選擇雌雄鼠各1只、每組雌雄鼠各8只,將動情間期的雌鼠和雄鼠斷頭處死,取下丘腦及卵巢、睪丸,隨后提取RNA并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。另外,再隨機(jī)選取子代70日齡雌雄大鼠共48只,雌雄各半,每組6只,心臟灌注多聚甲醛后取下丘腦行組織切片。對新生鼠下丘腦、成年雌雄大鼠下丘腦和生殖腺GnRH及GnRHR基因進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR檢測,以及使用免疫熒光法檢測成年雌雄大鼠下丘腦GnRH十肽表達(dá)情況。結(jié)果(1)方差分析結(jié)果顯示,與對照組相比,新生雌鼠下丘腦GnRH及Gn RHR基因相對表達(dá)水平在各組間的改變無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);新生雄鼠下丘腦GnRH基因相對表達(dá)水平在各個處理組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而新生雄鼠下丘腦GnRHR基因在2 mg/kg、10 mg/kg劑量組GnRHR基因相對表達(dá)水平升高,與對照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P0.05);(2)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示,子代雌性大鼠下丘腦POA區(qū)GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)水平在各處理組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);子代雄性大鼠下丘腦GnRHR基因相對表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與對照組相比,2mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg三個劑量組的子代雄性大鼠下丘腦GnRHR基因相對表達(dá)水平均有下降((P0.05);(3)子代成年雌鼠及雄鼠下丘腦GnRH肽的平均光密度在各組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(4)2 mg/kg DEHP處理組的子代成年雌鼠卵巢GnRH基因相對表達(dá)水平升高,與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P0.05),而GnRHR基因相對表達(dá)水平組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);子代成年雄鼠睪丸GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)水平組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論(1)在本研究條件下,未發(fā)現(xiàn)出生前各劑量DEHP暴露影響子代新生鼠及成年鼠下丘腦GnRH基因表達(dá),也未發(fā)現(xiàn)其影響成年鼠下丘腦GnRH肽的表達(dá);在HPG軸的下丘腦水平,出生前短期低劑量DEHP暴露上調(diào)了新生雄鼠、下調(diào)了成年雄鼠的GnRHR基因表達(dá)水平,對雄性的生殖健康存在潛在影響;(2)本實(shí)驗(yàn)染毒劑量下,出生前DEHP暴露對子代大鼠的影響存在性別差異性;(3)出生前DEHP暴露對成年子代雌鼠卵巢的作用可能存在低劑量效應(yīng),但未影響雄鼠睪丸;相關(guān)機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：鄰苯二甲酸二(2-乙基己)酯 出生前暴露 促性腺激素釋放激素 促性腺激素釋放激素受體 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-15
• 研究背景及現(xiàn)狀11-14
• 研究目的、方法14-15
• 材料和方法15-23
• 1.1 材料15-16
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物15
• 1.1.2 主要藥品與試劑15
• 1.1.3 主要儀器與設(shè)備15-16
• 1.1.4 試劑配制16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-23
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動物分組與處理16-17
• 1.2.2 子代鼠下丘腦及生殖腺GnRH及Gn RHR基因表達(dá)水平測定17-21
• 1.2.3 成年后子代大鼠下丘腦ME區(qū)GnRH肽表達(dá)水平測定21-22
• 1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析22-23
• 結(jié)果23-31
• 2.1 子代新生鼠下丘腦GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況23-25
• 2.1.1 子代雌性新生鼠下丘腦GnRH及Gn RHR基因相對表達(dá)情況23-24
• 2.1.2 子代雄性新生鼠下丘腦GnRH及Gn RHR基因相對表達(dá)情況24-25
• 2.2 成年子代大鼠下丘腦POA區(qū)GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況25-27
• 2.2.1 成年子代雌鼠下丘腦POA區(qū)GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況25-26
• 2.2.2 成年子代雄鼠下丘腦POA區(qū)GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況26-27
• 2.3 成年子代大鼠下丘腦GnRH肽表達(dá)情況27-28
• 2.4 成年子代大鼠生殖腺GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況28-31
• 2.4.1 成年子代雌鼠卵巢GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況28-29
• 2.4.2 成年子代雄鼠睪丸GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)情況29-31
• 討論31-40
• 3.1 出生前DEHP暴露對子代新生鼠下丘腦GnRH及GnRHR基因表達(dá)的影響32-33
• 3.2 出生前DEHP暴露對成年子代大鼠下丘腦GnRH、GnRHR基因及GnRH肽表達(dá)的影響33-37
• 3.3 出生前DEHP暴露對子代成年大鼠生殖腺GnRH及GnRHR基因表達(dá)的影響37-38
• 3.4 出生前DEHP暴露對子代大鼠GnRH及GnRHR基因表達(dá)影響的性別差異性38
• 3.5 出生前DEHP暴露的低劑量-非線性效應(yīng)38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-54
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明54-55
• 綜述55-69
• 綜述參考文獻(xiàn)61-69
• 致謝69-71
• 個人簡歷71

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本文編號：999329