三聚氰胺免疫層析試紙的研制和應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2017-10-04 09:33
本文關(guān)鍵詞:三聚氰胺免疫層析試紙的研制和應(yīng)用
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【摘要】:在生物醫(yī)學(xué)和食品安全的領(lǐng)域中,我們有時(shí)需要對(duì)某些特定的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。截止到目前,已知的檢測(cè)方法有很多種,主要分為傳統(tǒng)檢測(cè)方法和試紙檢測(cè)法。傳統(tǒng)檢測(cè)的方法主要是利用一些儀器,人工操作完成檢測(cè)任務(wù),而試紙檢測(cè)法則是通過(guò)應(yīng)用免疫層析技術(shù)來(lái)達(dá)到檢測(cè)的目的。免疫層析試紙檢測(cè)技術(shù)和傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比具有簡(jiǎn)單、方便、快捷的優(yōu)點(diǎn),F(xiàn)如今,免疫層析試紙檢測(cè)技術(shù)因其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)已成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和食品安全檢測(cè)的有效手段。本文成功制備了膠體金,并以膠體金標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體,在免疫層析技術(shù)的基礎(chǔ)上成功研制出三聚氰胺膠體金免疫層析試紙。 本實(shí)驗(yàn)的主要目的和意義是研制一種特異性強(qiáng)、靈敏度高,且操作簡(jiǎn)單方便,對(duì)樣品經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理即可進(jìn)行檢測(cè)的快速試紙檢測(cè)方法。在實(shí)驗(yàn)中通過(guò)改變檸檬酸鈉的加入量制備出不同粒徑的金顆粒,最終選擇出質(zhì)量報(bào)告良好的膠體金顆粒,并將其作為標(biāo)記物偶聯(lián)三聚氰胺單克隆抗體。分別把三聚氰胺/OVA的偶聯(lián)物和羊抗鼠IgG點(diǎn)在硝酸纖維素膜(NC)上作為檢測(cè)線(T線)和質(zhì)控線(C線),制作成免疫層析試劑條。將該試紙條對(duì)三聚氰胺溶液進(jìn)行加標(biāo),檢測(cè),觀察結(jié)果。三聚氰胺膠體金免疫層析試紙條的檢測(cè)靈敏度較高,特異性和穩(wěn)定性良好,可長(zhǎng)期保存使用。
【關(guān)鍵詞】:三聚氰胺 偶聯(lián)物 膠體金 免疫層析 試紙檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R155.5
【目錄】:
- 摘要3-4
- Abstract4-9
- 1 引言9-13
- 1.1 三聚氰胺簡(jiǎn)介9
- 1.2 膠體金免疫層析技術(shù)簡(jiǎn)介9-12
- 1.2.1 膠體金的制備10
- 1.2.2 膠體金的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)10-11
- 1.2.3 膠體金的性質(zhì)11
- 1.2.4 膠體金作為標(biāo)記物的優(yōu)勢(shì)11
- 1.2.5 膠體金免疫層析技術(shù)的原理11-12
- 1.2.6 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用發(fā)展12
- 1.3 本文主要研究的內(nèi)容和目的12-13
- 2 三聚氰胺膠體金免疫層析試紙條的研制及應(yīng)用13-28
- 2.1 主要試劑和材料13
- 2.2 主要儀器13-14
- 2.3 實(shí)驗(yàn)過(guò)程14-17
- 2.3.1 膠體金的制備14-15
- 2.3.2 金標(biāo)單抗的制備15-16
- 2.3.2.1 金探針標(biāo)記單抗的原理15
- 2.3.2.2 金標(biāo)單抗的制備方法15-16
- 2.3.3 膠金墊的制作16
- 2.3.4 試紙條的制作16-17
- 2.3.5 膠體金免疫層析試紙卡的制作17
- 2.4 結(jié)果分析17-28
- 2.4.1 膠體金的質(zhì)量鑒定17-20
- 2.4.1.1 肉眼觀察17-18
- 2.4.1.2 紫外-分光光度計(jì)掃描鑒定18-19
- 2.4.1.3 粒徑分布19-20
- 2.4.2 膠體金鑒定結(jié)果20-23
- 2.4.2.1 目測(cè)結(jié)果20-21
- 2.4.2.2 紫外掃描鑒定21
- 2.4.2.3 粒度分布鑒定21-22
- 2.4.2.4 原子力顯微鏡觀察22-23
- 2.4.2.5 濃度計(jì)算23
- 2.4.3 金標(biāo)單抗的質(zhì)量鑒定及與金標(biāo)液的對(duì)比23-25
- 2.4.3.1 紫外-分光光度計(jì)掃描鑒定23-24
- 2.4.3.2 金標(biāo)單抗粒徑分布24-25
- 2.4.4 試紙卡試驗(yàn)25-28
- 2.4.4.1 二抗和偶聯(lián)物的選擇25
- 2.4.4.2 試驗(yàn)結(jié)果及判定依據(jù)25-26
- 2.4.4.3 特異性檢測(cè)26-27
- 2.4.4.4 靈敏度檢測(cè)27-28
- 2.4.4.5 穩(wěn)定性檢測(cè)28
- 3 討論28
- 4 結(jié)論28-29
- 5 展望29-30
- 致謝30-31
- 參考文獻(xiàn)31-34
- 作者簡(jiǎn)介34
【參考文獻(xiàn)】
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1 許媛媛;邊超;陳紹鳳;夏善紅;;基于微機(jī)電系統(tǒng)技術(shù)和納米金自組裝膜的安培型免疫傳感器研究[J];分析化學(xué);2006年05期
2 何艷玲;林松;王陸迪;唐慧林;劉振;王靜;李瑾;;膠體金免疫層析法檢測(cè)水產(chǎn)品中O_1群霍亂弧菌方法的建立與優(yōu)化[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2007年01期
3 焦Z,
本文編號(hào):969909
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