本文關鍵詞：氯乙烯作業(yè)工人代謝酶基因甲基化與染色體損傷

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【摘要】：氯乙烯(Vinyl chloride monomer, VCM)是一種重要的化工原料,主要用于合成聚氯乙烯(Polyvinyl chloride, PVC),在全世界有大量的職業(yè)接觸人群。截至2013年12月,我國PVC年產(chǎn)量己達到1529.54萬噸,己成為世界第一大生產(chǎn)國和第一大消費國。VCM是確定的人類致癌物,是多系統(tǒng)、多器官致癌劑。目前認為其致癌機制主要是VCM活性代謝產(chǎn)物使遺傳物質(zhì)損傷,進而啟動致癌過程。世界各國對其相應的職業(yè)衛(wèi)生標準進行了調(diào)整,目前西方發(fā)達國家的VCM的職業(yè)接觸限值多為1ppm(2.79mg/m3),而我國自2002年起VCM時間加權(quán)平均容許濃度(PC-TWA)修訂為10mg/m3,仍是西方發(fā)達國家衛(wèi)生標準的數(shù)倍。在我國現(xiàn)行職業(yè)衛(wèi)生標準下,對氯乙烯能否誘發(fā)接觸工人的遺傳損傷進行探討十分必要。目前研究發(fā)現(xiàn)化學致癌物可致遺傳損傷和表觀遺傳改變。表觀遺傳是DNA序列不變,但功能發(fā)生可遺傳變化,在調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達方面發(fā)揮重要作用,日益受到關注。對DNA CpG島甲基化狀態(tài)的分析將有助于闡明VCM的毒性作用機制。本研究應用作業(yè)場所空氣氯乙烯濃度測定評估VCM作業(yè)工人個體接觸劑量,應用胞質(zhì)分裂阻滯微核試驗(CBMN)檢測氯乙烯所致的染色體損傷,研究氯乙烯接觸與遺傳損傷的劑量-反應關系,應用甲基化特異性聚合酶鏈式反應(MSP, methylation-specific PCR)檢測VCM作業(yè)工人代謝酶基因位點甲基化狀態(tài),探索VCM職業(yè)接觸及其致染色體損傷、代謝酶基因啟動子區(qū)甲基化之間的關系,探尋有效的生物標志以篩選高危人群,為VCM致遺傳損傷的早期預警、早期發(fā)現(xiàn)和早期干預提供有價值的線索,并為氯乙烯職業(yè)衛(wèi)生標準的修訂提供依據(jù)。本次調(diào)查的某工廠自1990年起大部分空氣樣本氯乙烯濃度低于我國職業(yè)衛(wèi)生標準,以2007年為界,1990年至2007年總超標率為3.60%,2007年至今總超標率為1.55%。本研究現(xiàn)況調(diào)查的研究對象是該化工廠139名VCM作業(yè)工人,以95名無職業(yè)接觸VCM及其他有毒有害物質(zhì)的健康志愿者為對照組,根據(jù)歷年車間空氣中VCM濃度檢測結(jié)果、實際接觸時間和工齡以及擴散生活氯乙烯接觸計算累積劑量,將研究對象分為高劑量接觸組(累積接觸劑量12622.16mg)、中劑量接觸組(775.36mmg累積接觸劑量≤12622.16mg)、低劑量接觸組(累積接觸劑量≤775.36rng)和對照組。對VCM接觸工人進行胞質(zhì)分裂阻滯微核實驗調(diào)查其染色體損傷狀況。結(jié)果顯示,氯乙烯作業(yè)工人外周血淋巴細胞微核率顯著高于對照組,FR=2.39(95%CI：2.08-2.71),P0.05。與對照組相比,低、中、高劑量組的微核率均顯著增高,且差異有統(tǒng)計學意義(FR=2.04,95%CI：1.72-2.41,P0.05)；(FR=2.02,95%CI：1.75-2.33,P0.05);(FR=2.86,95%CI：2.39-3.23,P0.05),說明氯乙烯累積接觸劑量組的微核率存在趨勢關系,即隨著VCM暴露量的增加,微核率升高。同時多因素Poisson回歸發(fā)現(xiàn)年齡為微核率升高的危險因素,FR=1.01(95%CI：1.01-1.02),P0.05。本研究提示外周血淋巴細胞微核率作為評價低濃度VCM暴露的效應指標具備一定的推廣應用價值。應用甲基化特異性PCR (MSP)法檢測研究VCM作業(yè)工人的代謝酶基因GSTP1、GSTM1、GSTM3、CYPIAI啟動子區(qū)甲基化狀況。甲基化率的比較采用χ2檢驗,應用Poisson回歸分析代謝酶基因甲基化及相關因素對微核率的影響。在139例VCM作業(yè)工人和95例對照組中檢測到GSTP1基因啟動子區(qū)甲基化率分別為39.6%(55/139),13.7%(13/95)；GSTM1基因啟動子區(qū)甲基化率分別為48.2%(67/139),,35.8%(34/95)；GSTM3基因啟動子區(qū)甲基化率分別為28.8%(40/139),15.8%(15/95)；CYPIAI基因啟動子區(qū)甲基化率分別為15.8%(22/139),22.1%(21/95)。二分類Logistic分析結(jié)果顯示,在校正性別、年齡、吸煙、飲酒等因素后,VCM接觸組GSTP1基因甲基化率顯著高于對照組,OR=5.60(95%CI：2.67-11.75),P0.05,而GSTM1、GSTM3、CYP1A1甲基化率在暴露組和對照組間差異無統(tǒng)計學意義,在本樣本量和實驗研究條件下,尚不能認為氯乙烯接觸是GSTM1、GSTM3、CYP1A1甲基化率升高的危險因素。對接觸組GSTP1甲基化進行χ2檢驗,發(fā)現(xiàn)年齡35歲是VCM作業(yè)工人GSTP1基因甲基化率升高的危險因素,OR=3.18(95%CI：1.56-6.48),P0.05。中劑量組、高劑量組分別與低劑量組甲基化率進行比較,未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異,尚不能確定氯乙烯累積接觸劑量與GSTP1甲基化率之間存在劑量-反應關系。以CBMN作為評價染色體損傷的指標,我們在139例VCM作業(yè)工人中發(fā)現(xiàn),GSTMI基因啟動子非甲基化者72例,微核率為(6.54±3.26)‰,甲基化者67例,微核率為(8.52±4.15)‰,微核率差異有統(tǒng)計學意義,FR值為1.30(95%CI：1.15-1.47),表明GSTM1基因啟動子區(qū)甲基化可能與VCM致染色體損傷有關。多元Poisson回歸分析結(jié)果顯示年齡35歲、VCM暴露以及GSTM1基因啟動子區(qū)甲基化是微核率升高的危險因素(FR=1.01,95%CI:1.01-1.02,P0.05)；(FR=2.32,95%CI：2.02-2.66,P0.05)；(FR=1.22,95%CI：1.09-1.37,P0.05)。綜上所述,在我國當前職業(yè)衛(wèi)生標準下,職業(yè)接觸VCM可造成作業(yè)工人的染色體損傷；VCM接觸和VCM相關代謝酶基因啟動子區(qū)甲基化的綜合作用可能影響染色體損傷的發(fā)生與發(fā)展。
【關鍵詞】：氯乙烯 染色體損傷 胞質(zhì)阻滯雙核微核試驗 代謝酶基因甲基化
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R135
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-16
• 技術(shù)路線16-17
• 第一部分 氯乙烯作業(yè)工人職業(yè)接觸評估和染色體損傷研究17-31
• 第一節(jié) 氯乙烯作業(yè)工人職業(yè)接觸評估17-23
• 1 材料和方法17-18
• 2 結(jié)果18-22
• 3 討論22-23
• 第二節(jié) 氯乙烯作業(yè)工人染色體損傷研究23-30
• 1 對象和方法23-26
• 2 結(jié)果26-28
• 3 討論28-30
• 小結(jié)30-31
• 第二部分 代謝酶基因啟動子區(qū)甲基化與染色體損傷風險研究31-54
• 第一節(jié) 代謝酶基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)檢測31-48
• 1 對象和方法34-38
• 2 結(jié)果38-43
• 3 討論43-48
• 第二節(jié) 代謝酶基因甲基化與氯乙烯致染色體損傷風險的關系48-53
• 1 對象和方法48-49
• 2 結(jié)果49-51
• 3 討論51-53
• 小結(jié)53-54
• 總結(jié)54-56
• 參考文獻56-63
• 致謝63-64
• 附錄一：碩士期間發(fā)表論文64-65
• 附錄二：綜述65-72
• 參考文獻70-72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Yoshihiro Nakata;;β-catenin accumulation in nuclei of hepatocellular carcinoma cells up-regulates glutathione-s-transferase M3 mRNA[J];World Journal of Gastroenterology;2011年13期

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本文編號：917338