SD-PMA-ddPCR檢測(cè)食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌
發(fā)布時(shí)間:2017-09-13 09:43
本文關(guān)鍵詞:SD-PMA-ddPCR檢測(cè)食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌
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【摘要】:【目的】檢測(cè)食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌活菌!痉椒ā坷妹撗跄懰徕c(SD)對(duì)受損細(xì)胞預(yù)處理,然后使疊氮溴化丙錠(PMA)進(jìn)入受損細(xì)胞與DNA發(fā)生共價(jià)交聯(lián),提取細(xì)菌基因組DNA進(jìn)行微滴式數(shù)字PCR(dd PCR)檢測(cè)!窘Y(jié)果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA協(xié)同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR擴(kuò)增。經(jīng)過(guò)SD和PMA對(duì)樣品預(yù)處理,dd PCR可以在死菌存在條件下,定量檢測(cè)雞肉中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假陽(yáng)性"結(jié)果的出現(xiàn)。活菌靈敏度檢測(cè)結(jié)果顯示:SD-PMA-dd PCR的靈敏度為2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和穩(wěn)定性良好!窘Y(jié)論】SD-PMA-dd PCR在檢測(cè)食源性致病菌方面有巨大的發(fā)展空間。
【作者單位】: 威海出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;山東出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】: 疊氮溴化丙錠 脫氧膽酸鈉 微滴式數(shù)字PCR 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌
【基金】:國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2014IK114)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R155.5
【正文快照】: 隨著社會(huì)的發(fā)展和人們對(duì)健康的關(guān)注,食品安全已經(jīng)成為影響廣泛而深遠(yuǎn)的社會(huì)性問(wèn)題。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種常見(jiàn)的食源性致病菌,生命力很強(qiáng),人感染后可導(dǎo)致腦膜炎、胃腸炎、敗血癥等[1-3],嚴(yán)重危害人們身體健康。因此,定量檢測(cè)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌引起各國(guó)的高度關(guān)注,
本文編號(hào):842941
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