本文關(guān)鍵詞：胸腺細(xì)胞分化抗原-1DNA甲基化在硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞纖維化中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 硫酸鈹 胸腺細(xì)胞分化抗原-1 膠原蛋白 α-平滑肌肌動蛋白 肺纖維化 DNA甲基化 組蛋白乙�；� 人胚肺成纖維細(xì)胞

【摘要】：目的觀察硫酸鈹(Be SO4)刺激下人胚肺成纖維細(xì)胞(MRC-5)中胸腺細(xì)胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化改變情況,Thy-1m RNA及蛋白的變化,纖維化相關(guān)因子膠原蛋白Ⅰ、膠原蛋白Ⅲ、α-SMA m RNA及蛋白的改變,探討Thy-1DNA甲基化在Be SO4致肺纖維化中的作用。用甲基化轉(zhuǎn)移酶酶抑制劑5-氮雜胞苷(AZC)干預(yù)MRC-5進(jìn)一步驗(yàn)證Thy-1DNA甲基化變化。使用組蛋白乙酰化酶抑制劑曲古抑菌素A(TSA),觀察MRC-5中是否同時存在組蛋白乙�；Ｍ瑫r觀察在這兩種抑制劑的作用下,纖維相關(guān)因子和Thy-1的表達(dá)情況。方法建立離體MRC-5培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以終濃度分別為1.0、10.0、100.0μmol/L的Be SO4染毒(設(shè)為低、中、高劑量組),對照組不作染毒處理;另設(shè)AZC干預(yù)組,終濃度為10.0μmol/L的硫酸鈹和10.0μmol/L AZC混合液處理組(Be SO4+AZC組)和TSA干預(yù)組,終濃度為10.0μmol/L的硫酸鈹和0.5μmol/L TSA混合液處理組(Be SO4+TSA組)。分別在染毒24、48和72 h后收集細(xì)胞,采用實(shí)時定量式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測膠原蛋白Ⅰ、膠原蛋白Ⅲ和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和Thy-1 m RNA相對表達(dá)水平;巢式降落式甲基化特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測Thy-1 DNA甲基化水平;蛋白免疫印跡法(western-blot)檢測膠原蛋白Ⅰ、膠原蛋白Ⅲ、α-SMA和Thy-1蛋白的相對表達(dá)水平。結(jié)果1.MRC-5細(xì)胞中膠原蛋白Ⅰ、膠原蛋白Ⅲ和α-SMA的m RNA的蛋白相對表達(dá)水平均呈隨染毒劑量增加而增加的趨勢(P0.05或P0.01));低、中、高劑量組膠原蛋白Ⅰ、膠原蛋白Ⅲ和α-SMA的m RNA和蛋白相對表達(dá)水平均呈隨著染毒時間的增加而升高的趨勢(P0.05或P0.01));AZC和TSA干預(yù)后,24、48、72h時間點(diǎn),Be SO4+AZC組、Be SO4+TSA組3個指標(biāo)的蛋白相對表達(dá)水平均低于中劑量組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2.24、48、72h時間點(diǎn)上,中、高劑量組Thy-1 DNA甲基化水平均高于對照組(P0.05或P0.01);低、中、高劑量組Thy-1 DNA甲基化水平呈隨染毒劑量增加而增加趨勢(P0.05);AZC和TSA干預(yù)后,48、72h時間點(diǎn)上,Be SO4+AZC組、Be SO4+TSA組Thy-1DNA甲基化水平均低于中、高劑量(P0.05);3.24、48、72h時間點(diǎn)上,低、中、高劑量組MRC-5細(xì)胞Thy-1 m RNA和蛋白的相對表達(dá)水平均低于對照組(P0.01或P0.01);AZC和TSA干預(yù)后,48、72h時間點(diǎn)上,Be SO4+AZC組、Be SO4+TSA組Thy-1蛋白的相對表達(dá)水平均高于中劑量組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論在硫酸鈹刺激下可導(dǎo)致MRC-5細(xì)胞纖維化的發(fā)生,該過程中Thy-1DNA甲基化程度升高,Thy-1m RNA表達(dá)水平降低,可能是硫酸鈹致肺纖維化的重要機(jī)制之一,在該過程中可能同時存在組蛋白乙�；�
【關(guān)鍵詞】：硫酸鈹 胸腺細(xì)胞分化抗原-1 膠原蛋白 α-平滑肌肌動蛋白 肺纖維化 DNA甲基化 組蛋白乙�；� 人胚肺成纖維細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-8
• 符號說明8-11
• 前言11-15
• 材料與方法15-29
• 結(jié)果29-40
• 討論40-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 綜述 表觀遺傳學(xué)的DNA甲基化和組蛋白修飾52-63
• 綜述參考文獻(xiàn)58-63
• 致謝63-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張朝暉;王淑娟;駱金俊;黃煉;李程;廖永紅;;硫酸鈹致小鼠肝線粒體功能障礙研究[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2012年05期

2 廖永紅;黃煉;王淑娟;胡立丹;張朝暉;;內(nèi)源性硫化氫對硫酸鈹致大鼠肺組織急性損傷影響[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2013年05期

3 王光俊;劉志宏;安曉丹;張曉宇;張勇;劉賀榮;朱玲勤;馬小梅;;硫酸鈹對人胚肺成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性和遺傳毒性[J];癌變.畸變.突變;2009年03期

4 譚滇湘;張朝暉;王淑娟;黃煉;;硫酸鈹對小鼠腎臟氧化損傷的誘導(dǎo)[J];實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);2012年06期

5 駱蓉;劉志宏;;硫酸鈹對小鼠體外脾淋巴細(xì)胞DNA損傷的劑量效應(yīng)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年09期

6 張志遠(yuǎn);劉志宏;安曉丹;朱玲勤;劉賀榮;張勇;王光俊;;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞氧化損傷及枸杞多糖的抗氧化效應(yīng)[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2012年02期

7 ;鈹?shù)亩拘栽囼?yàn)[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào);1978年03期

8 張朝暉;黃煉;譚滇湘;駱金俊;李程;王淑娟;廖永紅;;小鼠腹腔注射硫酸鈹?shù)牟±硇螒B(tài)學(xué)觀察[J];中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào);2012年05期

9 嚴(yán)青;劉志宏;龔愛紅;張慶鋒;;硫酸鈹對小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖及T細(xì)胞亞群的影響[J];寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年12期

10 安曉丹;劉志宏;張志遠(yuǎn);王光俊;朱玲勤;張勇;;C-myc、H-ras及p16癌基因在硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞損傷下的表達(dá)[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2010年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 駱金俊;廖永紅;張朝暉;;硫酸鈹致小鼠肝毒性的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國自由基醫(yī)學(xué)與毒理學(xué)學(xué)術(shù)交流大會論文（摘要）集[C];2011年

2 張志遠(yuǎn);劉志宏;安曉丹;朱玲勤;劉賀榮;張勇;王光俊;;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞氧化損傷及枸杞多糖的抗氧化效應(yīng)[A];中國活性氧生物學(xué)效應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文集（第一冊）[C];2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 王瑤;胸腺細(xì)胞分化抗原-1DNA甲基化在硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞纖維化中的作用研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2016年

2 王光俊;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2009年

3 駱金俊;硫酸鈹致小鼠肝毒性的線粒體損傷機(jī)制[D];南華大學(xué);2012年

4 黃煉;硫酸鈹致小鼠肺線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔高通透性開放及其后續(xù)效應(yīng)研究[D];南華大學(xué);2013年

5 張志遠(yuǎn);硫酸鈹誘發(fā)人胚肺細(xì)胞凋亡機(jī)制及枸杞多糖保護(hù)作用的初步研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2012年

6 嚴(yán)青;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

7 王淑娟;硫酸鈹對小鼠肝組織DNA甲基化及p53、c-Fos、c-Jun蛋白表達(dá)的影響[D];南華大學(xué);2013年

8 龔愛紅;IP_3RⅢDNA甲基化調(diào)控對硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

，

本文編號：688128