發(fā)布時間：2017-06-30 01:00

  本文關(guān)鍵詞：萊菔硫烷對鎘暴露小鼠生精機(jī)能干預(yù)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[背景]鎘(Cd)是一種嚴(yán)重的環(huán)境污染物,可以經(jīng)消化道及皮膚吸收,具有多種器官毒性,鎘能誘導(dǎo)生物體產(chǎn)生大量活性氧自由基而形成氧脅迫,引起一系列脂質(zhì)過氧化反應(yīng),從而使機(jī)體抗氧化體系失衡。萊菔硫烷(Sulforaphane, SFN)是一種有機(jī)硫化合物,是迄今最高效的抗氧化物之一,能有效減少氧化應(yīng)激和組織細(xì)胞的損傷。[目的]本試驗(yàn)主要研究萊菔硫烷通過Nrf2-ARE通路對染鎘雄性小鼠生殖機(jī)能的保護(hù)作用。[方法]購買健康的清潔級雄性昆明系小鼠60只,隨機(jī)分成4組,分別為：空白對照組(H2Oi.p.)、氯化鎘組(2.3 mg/kg CdCl2 i.p.)、萊菔硫烷組(10 mg/kg SFN i.p.).鎘+萊菔硫烷組(10 mg/kg SFN i.p.;2.3 mg/kg CdCl2 i.p.),連續(xù)給藥10 d,檢測小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)功能變化、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的變化。運(yùn)用相對熒光定量PCR及Western blot方法檢測睪丸組織核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)及其靶基因谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、血紅素加氧酶1 (HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)及醌氧化還原酶1(NQO1) mRNA和蛋白水平。[結(jié)果]1.鎘對小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)有一定的破壞,影響其生理功能,萊菔硫烷對小鼠睪丸結(jié)構(gòu)和功能沒有影響,萊菔硫烷對鎘攻毒小鼠的睪丸組織結(jié)構(gòu)具有一定的保護(hù)作用。2.與對照組小鼠相比,鎘會顯著降低小鼠睪丸中GSH含量及T-SOD活性p0.01),顯著提高M(jìn)DA的含量(p＜0.01)。相比空白組萊菔硫烷顯著提高GSH含量及T-SOD活性p0.05),MDA的含量無顯著差異(p＞0.05)。與鎘組相比鎘+萊菔硫烷組顯著升高了GSH含量及T-SOD活性(p＜0.01),顯著降低了MDA的表達(dá)量(p＜0.01)。3.相比正常組小鼠,鎘降低了小鼠睪丸中的Nrf2及其下游靶基因nRNA及蛋白水平(p＜0.01,p＜0.05),萊菔硫烷提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平(p＜0.01,p0.05),與鎘組相比鎘+萊菔硫烷組顯著提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平p0.01,p0.05)。[結(jié)論]鎘會降低睪丸生精機(jī)能,使睪丸組織抗氧化能力減弱,發(fā)生氧化損傷,而萊菔硫烷可拮抗鎘誘導(dǎo)的損傷作用。萊菔硫烷通過激活Nrf2上調(diào)其下游的抗氧化和解毒酶表達(dá)水平,揭示Nrf2-ARE通路參與鎘誘發(fā)的內(nèi)源性應(yīng)激防御機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：氯化鎘 萊菔硫烷 小鼠 睪丸 Nrf-ARE通路
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 中文摘要10-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 引言13-20
• 1.1 研究背景13-14
• 1.2 鎘的防治14-15
• 1.2.1 螯合劑與鎘14
• 1.2.2 金屬硫蛋白與鎘14-15
• 1.2.3 鋅與鎘15
• 1.2.4 鈣與鎘15
• 1.2.5 維生素與鎘15
• 1.2.6 萊菔硫烷與鎘15
• 1.3 萊菔硫烷的化學(xué)作用15-18
• 1.3.1 萊菔硫烷與腫瘤16
• 1.3.2 萊菔硫烷與免疫調(diào)節(jié)16
• 1.3.3 萊菔硫烷與腦和神經(jīng)的損傷16-17
• 1.3.4 萊菔硫烷與抗炎作用17
• 1.3.5 萊菔硫烷與抗氧化損傷17-18
• 1.4 Nrf2-Keap1/ARE信號通路18-19
• 1.4.1 轉(zhuǎn)錄因子核相關(guān)因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)簡介18
• 1.4.2 Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1(Keap1)簡介18-19
• 1.5 本試驗(yàn)?zāi)康呐c意義19-20
• 第二部分 試驗(yàn)部分20-58
• 試驗(yàn)一 鎘對雄性小鼠生精機(jī)能、MDA及T-SOD影響的研究20-27
• 2.1 試驗(yàn)材料20-21
• 2.1.1 試驗(yàn)動物20
• 2.1.2 分組及給藥20
• 2.1.3 主要試劑的配制20
• 2.1.4 試驗(yàn)藥品及試劑20-21
• 2.1.5 主要儀器21
• 2.2 試驗(yàn)方法21-24
• 2.2.1 精液品質(zhì)的檢測21-22
• 2.2.2 總蛋白定量檢測22
• 2.2.3 T-SOD活性的檢測22-23
• 2.2.4 MDA含量的檢測23-24
• 2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析24
• 2.3 試驗(yàn)結(jié)果24-25
• 2.3.1 小鼠的死亡結(jié)果24
• 2.3.2 小鼠精液品質(zhì)的檢測結(jié)果24-25
• 2.3.3 小鼠睪丸T-SOD和MDA的檢測結(jié)果25
• 2.4 討論25-26
• 2.5 小結(jié)26-27
• 試驗(yàn)二 萊菔硫烷對鎘中毒小鼠生精機(jī)能的干預(yù)作用的研究27-37
• 3.1 試驗(yàn)材料27-28
• 3.1.1 試驗(yàn)動物27
• 3.1.2 分組及給藥27
• 3.1.3 試驗(yàn)藥品和試劑27
• 3.1.4 試驗(yàn)儀器27-28
• 3.2 試驗(yàn)方法28-30
• 3.2.1 小鼠精液品質(zhì)的檢測28
• 3.2.2 HE染色28-29
• 3.2.3 血清睪酮含量的檢測29
• 3.2.4 T-SOD、GSH和MDA的檢測29-30
• 3.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析30
• 3.3 試驗(yàn)結(jié)果30-35
• 3.3.1 小鼠睪丸及附睪臟器系數(shù)檢測結(jié)果30-31
• 3.3.2 小鼠精液品質(zhì)檢測結(jié)果31-32
• 3.3.3 小鼠睪丸HE染色結(jié)果32-33
• 3.3.4 小鼠睪酮檢測結(jié)果33
• 3.3.5 小鼠睪丸組織內(nèi)T-SOD、GSH以及MDA的檢測結(jié)果33-35
• 3.4 討論35-36
• 3.5 小結(jié)36-37
• 試驗(yàn)三：SFN對鎘暴露小鼠睪丸中Nrf2及下游靶基因mRNA和蛋白水平的影響37-58
• 4.1 試驗(yàn)材料37-39
• 4.1.1 試驗(yàn)動物37
• 4.1.2 試驗(yàn)動物的分組及給藥37
• 4.1.3 試驗(yàn)主要試劑的配制37-38
• 4.1.4 試驗(yàn)藥品與試劑38-39
• 4.1.5 試驗(yàn)主要儀器39
• 4.2 試驗(yàn)方法39-48
• 4.2.1 RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄39-40
• 4.2.2 PCR反應(yīng)40-42
• 4.2.3 qPCR反應(yīng)42-43
• 4.2.4 試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算43-44
• 4.2.5 蛋白的提取及定量44
• 4.2.6 Western blot檢測蛋白表達(dá)量44-48
• 4.2.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析48
• 4.3 試驗(yàn)結(jié)果48-54
• 4.3.1 小鼠睪丸組織中各基因引物的特異性檢測結(jié)果48
• 4.3.2 各基因qPCR引物中的特異性及標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果分析48-49
• 4.3.3 小鼠睪丸組織mRNA和蛋白水平檢測結(jié)果49-54
• 4.4 討論54-57
• 4.5 小結(jié)57-58
• 結(jié)論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-65
• 附錄65-69
• 英文縮寫詞表69-70
• 致謝70-71
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的文章71

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 夏薇,趙秀娟,吳坤,苑林宏;北方12種蔬菜中萊菔硫烷含量的測定[J];疾病控制雜志;2005年03期

2 孫超,仉郁芝;硫烷硫代謝庫[J];醫(yī)教研究;1995年03期

3 李斕;喻姍姍;李玲玉;吳曉穎;陳宴林;趙敬;;萊菔硫烷對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2012年04期

4 林娜;單毓娟;趙瑞芳;袁超;王舒然;;萊菔硫烷對血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)影響[J];中國公共衛(wèi)生;2009年03期

5 張國良;趙秀娟;張宇秋;趙艷;張海金;吳坤;;蔬菜中萊菔硫烷提取工藝的正交優(yōu)選[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年06期

6 胡麗貞;李雅杰;薛宏鳳;王舒然;;萊菔硫烷對高脂環(huán)境下心肌細(xì)胞保護(hù)作用[J];中國公共衛(wèi)生;2013年10期

7 胡曄;梁浩;袁其朋;;十字花科植物種子中萊菔硫烷的薄層色譜鑒別[J];北京化工大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2006年02期

8 王麗紅;劉娟;王桂艷;杜娟;;光果葶藶中萊菔硫烷的提取及含量測定[J];中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué);2010年04期

9 張小林;翁惠萍;張海燕;;蘿卜硫烷的研究進(jìn)展[J];化工中間體;2008年12期

10 張小林;;蘿卜硫烷的研究進(jìn)展[J];化工中間體;2010年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 張國良;趙秀娟;張宇秋;吳坤;;蔬菜中萊菔硫烷的提取與純化技術(shù)[A];第四屆第二次中國毒理學(xué)會食品毒理學(xué)專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

2 王敏;李延青;陳建;高艷景;于濤;楊曉云;袁孟彪;;萊菔硫烷誘導(dǎo)鼠結(jié)腸代謝酶活性及生物學(xué)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

3 潘萌;黃睿;何燦霞;趙越;單毓娟;;萊菔硫烷通過p38-NF-κB通路抑制環(huán)氧化酶-2的表達(dá)[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

4 楊方星;莊樹林;張超;戴和平;劉維屏;;萊菔硫烷對二VA英毒性的保護(hù)作用[A];第七次全國分析毒理學(xué)大會暨第四屆分析毒理專業(yè)委員會第二次會議論文摘要集[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉霞;花椰菜能對抗老年癡呆癥[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 梁浩;萊菔硫烷的制備及其抗癌活性的研究[D];北京化工大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李琳;Nrf2、HO-1、VEGF在糖尿病大鼠腎臟中表達(dá)情況及萊菔硫烷對其干預(yù)作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 高鋒;萊菔硫烷對鎘暴露小鼠生精機(jī)能干預(yù)作用的研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 肖倩;萊菔硫烷的穩(wěn)定性及胃漂浮片的研究[D];北京化工大學(xué);2007年

4 李揚(yáng);西蘭花芽苗菜中萊菔硫烷的分離純化及抗癌活性的測定[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2009年

5 王慧;萊菔硫烷載藥體系的制備與評價[D];北京化工大學(xué);2011年

6 付建飛;萊菔硫烷對高脂膳食小鼠糖代謝的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];寧波大學(xué);2014年

7 李椿方;大孔吸附樹脂和逆流色譜分離純化萊菔硫烷的研究[D];北京化工大學(xué);2008年

8 閆旭;高純度萊菔硫烷的制備及其工業(yè)化放大研究[D];北京化工大學(xué);2011年

9 張勝智;西蘭花種子中硫代葡萄糖苷的提取及高純度萊菔硫烷的制備工藝研究[D];北京化工大學(xué);2012年

10 李斕;萊菔硫烷對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：萊菔硫烷對鎘暴露小鼠生精機(jī)能干預(yù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：499941