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PMA-實時熒光PCR快速檢測蔬果中金黃色葡萄球菌活菌

發(fā)布時間:2017-06-21 05:00

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【摘要】:目的將疊氮溴化丙錠(PMA)與實時熒光定量PCR(real-time PCR)技術(shù)相結(jié)合,快速檢測蔬果中金黃色葡萄球菌活菌。方法通過對影響PMA作用的關(guān)鍵因素,包括PMA濃度、光照時間以及活、死菌比例混合等進行試驗,確定PMA的作用條件。以金黃色葡萄球菌nuc基因為靶基因,建立PMA-實時熒光定量PCR方法,并構(gòu)建金黃色葡萄球菌重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,用于檢測蔬果中金黃色葡萄球菌活菌。結(jié)果在PMA 30μg/ml濃度下,曝光5 min,可實現(xiàn)PMA篩選金黃色葡萄球菌活菌的作用。由構(gòu)建的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品模板建立標(biāo)準(zhǔn)曲線表現(xiàn)出良好線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r=0.9995,所建立的方法靈敏度可達(dá)到14 copies/μl,且特異性良好。經(jīng)2 h增菌后用PMA進行篩選,再用熒光定量PCR檢測,可實現(xiàn)快速對蔬果樣品中活的金黃色葡萄球菌的檢測。結(jié)論用PMA-實時熒光定量PCR方法可快速檢測蔬果中活的金黃色葡萄球菌,可為食品安全風(fēng)險監(jiān)測提供可靠數(shù)據(jù)。
【作者單位】: 上海市疾病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】疊氮溴化丙啶 熒光定量PCR 金黃色葡萄球菌 活菌 蔬果
【基金】:全球健康-蓋茨基金項目:中國脊髓灰質(zhì)炎病毒在環(huán)境中的監(jiān)測(項目號:OPP1039272)
【分類號】:R155.5
【正文快照】: 金黃色葡萄球菌是一種重要的食源性致病菌,廣泛存在于自然界中,可因污染食物并由其產(chǎn)生的腸毒素造成食物中毒,危及人類生命健康。在我國10年食品安全監(jiān)測報告數(shù)據(jù)中有8.9%的食物中毒案例由金黃色葡萄球菌引起[1]。同時,在各種食物類型中,沙拉、涼拌菜以及鮮榨果汁等金黃色葡萄

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃嶺芳;賴衛(wèi)華;張莉莉;;食品中金黃色葡萄球菌快速檢測方法的研究進展[J];食品與機械;2009年06期

2 王娉;勞華均;胡s,

本文編號:467656


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