發(fā)布時(shí)間：2023-05-28 10:44

　　為探討AlCl₃抑制大鼠骨形成及BMP/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用機(jī)制本實(shí)驗(yàn)以Wistar大鼠為研究對(duì)象,將200只4周齡大鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組:實(shí)驗(yàn)組大鼠通過飲水染鋁(AlCl₃·6H₂O),飲用水中Al3+終濃度為64mg/kg?體重;對(duì)照組大鼠飲用蒸餾水。各組大鼠采用大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料常規(guī)飼養(yǎng),自由采食飲水,所有用具均不使用含鋁制品。實(shí)驗(yàn)設(shè)染鋁后30d、60d、90d、120d四個(gè)檢測(cè)點(diǎn),每次以乙醚麻醉、眼球放血的方式處死實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠各25只,取血清及股骨組織。采用火焰原子吸收分光光度法測(cè)定血清和骨組織中鋁含量;采用雙能X線骨密度儀檢測(cè)骨密度(BMD);q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)BMP-2、BMPRI/II、Smad4、Runx2、Osterix、ALP、Col I、BGP mRNA的表達(dá);western blot方法檢測(cè)BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8、Runx2、Osterix蛋白的表達(dá);免疫共沉淀方法檢測(cè)p-Smad1/5/8/4復(fù)合物的入核情況,結(jié)果表明:(1)染鋁組大鼠血清和骨中鋁...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 鋁對(duì)骨的毒性作用
    1.2 鋁與骨形成
        1.2.1 鋁與B-ALP
        1.2.2 鋁與Col I
        1.2.3 鋁與BGP
    1.3 鋁對(duì)骨中BMP/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用
        1.3.1 BMP-2 與骨形成
        1.3.2 BMP-2 與Smad家族
        1.3.3 BMP/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與骨形成
    1.4 細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子與骨形成
        1.4.1 Runx-2 與骨形成
        1.4.2 Osterix與骨形成
    1.5 研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及樣品采集
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 樣品采集及處理
    2.3 檢測(cè)項(xiàng)目與方法
        2.3.1 血清和股骨中鋁含量的檢測(cè)
        2.3.2 骨密度(BMD)的檢測(cè)
        2.3.3 骨中ALP、Col I、BGP、BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4、Runx2、OSX mRNA表達(dá)的檢測(cè)
        2.3.4 骨中BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表達(dá)的檢測(cè)
        2.3.5 骨中p-Smad1/5/8/4 復(fù)合物入核情況的檢測(cè)
        2.3.6 骨中核轉(zhuǎn)錄因子Runx2和OSX蛋白表達(dá)量的檢測(cè)
    2.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析及統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果與分析
    3.1 血清和骨中鋁的含量
    3.2 AlCl₃對(duì)骨密度的影響
    3.3 AlCl₃對(duì)骨組織B-ALP、BGP、Col I mRNA表達(dá)的影響
    3.4 AlCl₃對(duì)骨組織中BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4mRNA表達(dá)的影響
    3.5 AlCl₃對(duì)骨組織BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表達(dá)的影響
    3.6 AlCl₃對(duì)骨中p-Smad1/5/8/4 復(fù)合物入核情況的影響
    3.7 AlCl₃對(duì)骨中Runx2、Osterix mRNA和蛋白表達(dá)的影響
        3.7.1 AlCl₃對(duì)骨中Runx2、Osterix mRNA表達(dá)的影響
        3.7.2 AlCl₃對(duì)骨中Runx2、Osterix蛋白表達(dá)影響
4 討論
    4.1 AlCl₃對(duì)骨形成的影響
    4.2 AlCl₃對(duì)BMP/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    4.3 AlCl₃對(duì)細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3824439