本文關(guān)鍵詞：食品包裝材料中納米銀對(duì)腸上皮細(xì)胞（Caco-2）安全性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：納米銀具有非常優(yōu)良的抗菌性。隨著納米銀在食品產(chǎn)業(yè)中應(yīng)用增加，其對(duì)人體的潛在毒性開始引起人們的關(guān)注，納米銀能抑制成膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞染色體分離，造成DNA損傷和染色體畸變，但是納米銀對(duì)人腸上皮細(xì)胞（Caco-2）的體外細(xì)胞毒性和分子機(jī)制還不清楚。為了探討納米銀是否具有細(xì)胞毒性，選擇腸上皮細(xì)胞（Caco-2）為實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株，粒徑相近的納米氧化鋅作為強(qiáng)毒性的陽(yáng)性對(duì)照，研究了三種不同粒徑銀粒子對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性和氧化應(yīng)激損傷。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： （1）利用掃描電鏡和納米粒徑分析儀對(duì)三種銀粒子的形態(tài)和粒徑分布進(jìn)行了表征，結(jié)果表明，三種銀粒子的形態(tài)近似球形。同種銀粒子的粒徑并不完全相同，不同粒徑大小的銀粒子數(shù)量呈正態(tài)分布，它們的平均粒徑分別為35.48nm，76.29nm，265.2nm，根據(jù)納米材料的定義可知，前兩種銀粒子為納米銀，第三種銀粒子為微米銀。 （2）為了探討納米銀（35.48nm）是否具有細(xì)胞毒性，，選取人腸上皮細(xì)胞Caco-2細(xì)胞株作為研究對(duì)象，采用細(xì)胞毒性較強(qiáng)的納米氧化鋅（26.21nm）為陽(yáng)性對(duì)照，不加入納米材料的正常細(xì)胞為空白對(duì)照，通過AO/EB雙染法、WST-1法初步探究納米材料的細(xì)胞毒性。使用氧化應(yīng)激的方法，通過檢測(cè)Caco-2細(xì)胞內(nèi)ROS、SOD、GSH釋放量，來探討納米銀對(duì)細(xì)胞的氧化損傷作用及可能機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，35.48nm的銀粒子在低劑量（50μg/mL）時(shí)對(duì)腸上皮細(xì)胞的活性沒有影響，不會(huì)造成氧化應(yīng)激損傷；在染毒劑量為75μg/mL和100μg/mL對(duì)腸上皮細(xì)胞（Caco-2）的毒性存在劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)，并對(duì)細(xì)胞造成了程度較弱的氧化應(yīng)激損傷。 （3）為了探討納米銀（76.29nm）是否具有細(xì)胞毒性，選取人腸上皮細(xì)胞Caco-2細(xì)胞株作為研究對(duì)象，采用細(xì)胞毒性較強(qiáng)的納米氧化鋅（90.81nm）為陽(yáng)性對(duì)照，不加入納米材料的正常細(xì)胞為空白對(duì)照，通過AO/EB雙染法、CCK-8法初步探究究納米材料的細(xì)胞毒性。使用氧化應(yīng)激的方法，通過檢測(cè)Caco-2細(xì)胞內(nèi)ROS、SOD、GSH釋放量的影響，來探討納米銀對(duì)細(xì)胞的氧化損傷作用及可能機(jī)制。結(jié)果表明76.29nm的銀粒子（200μg/mL）對(duì)Caco-2細(xì)胞的活性沒有明顯影響，對(duì)Caco-2細(xì)胞沒有氧化應(yīng)激損傷,但是使細(xì)胞的抗氧化力極顯著或顯著增強(qiáng)，隨著納米銀濃度的升高，細(xì)胞抗氧化力減弱。 （4）為了更全面地探究納米銀對(duì)腸上皮細(xì)胞的安全性，對(duì)微米級(jí)銀離子的細(xì)胞毒性進(jìn)行了探討，作為探究納米銀細(xì)胞毒性的補(bǔ)充和對(duì)照。選取微米銀（265.2nm）和人腸上皮細(xì)胞Caco-2細(xì)胞株作為研究對(duì)象，不加入微米銀粒子的正常細(xì)胞為空白對(duì)照，通過AO/EB雙染法、MTT法初步探究微米銀的細(xì)胞毒性。使用氧化應(yīng)激的方法，通過檢測(cè)Caco-2細(xì)胞內(nèi)ROS、SOD、GSH釋放量，來探討微米銀對(duì)細(xì)胞的氧化損傷作用及可能機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，根據(jù)AO/EB雙染可知，265.2nm的銀粒子在劑量為200μg/mL時(shí)，部分細(xì)胞的細(xì)胞膜受損，出現(xiàn)凋亡。在測(cè)定的劑量范圍內(nèi)（0-200μg/mL），沒有檢測(cè)到銀粒子對(duì)Caco-2細(xì)胞的活性有明顯影響。銀粒子染毒劑量為0-50μg/mL時(shí)，不會(huì)造成細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷，在染毒劑量為100μg/mL和200μg/mL時(shí)，引起了腸上皮細(xì)胞（Caco-2）的氧化應(yīng)激反映，造成了細(xì)胞內(nèi)的氧化還原失衡。
【關(guān)鍵詞】：納米銀 腸上皮細(xì)胞 安全性 納米氧化鋅 細(xì)胞毒性 氧化應(yīng)激
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)計(jì)量學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：TS206.4;R114
【目錄】：

• 致謝5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 目次10-13
• 圖清單13
• 附表清單13-14
• 1 緒論14-20
• 1.1 前言14
• 1.2 納米銀的研究現(xiàn)狀和應(yīng)用14-16
• 1.2.1 納米銀研究現(xiàn)狀14-15
• 1.2.2 納米銀在食品相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用15-16
• 1.3 毒理學(xué)領(lǐng)域納米銀的研究現(xiàn)狀16-18
• 1.3.1 納米銀的體內(nèi)毒性16
• 1.3.2 納米銀的細(xì)胞毒性16-18
• 1.4 展望18-19
• 1.5 本課題的研究?jī)?nèi)容及目的19-20
• 1.5.1 研究目的和意義19
• 1.5.2 研究?jī)?nèi)容19-20
• 2 納米銀的表征20-24
• 2.1 前言20
• 2.2 材料與儀器20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 2.4 結(jié)果與討論21-24
• 2.4.1 電鏡掃描21
• 2.4.2 銀粒子粒徑分析21-24
• 2.5 本章小結(jié)24
• 3 納米銀（35.48 nm）對(duì) Caco-2 細(xì)胞安全性探究24-36
• 3.1 前言24
• 3.2 材料與儀器24-25
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料24-25
• 3.2.2 主要儀器25
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 3.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)及納米材料預(yù)處理25-26
• 3.3.2 納米材料表征26
• 3.3.3 AO/EB 雙染26
• 3.3.4 WST-1 法細(xì)胞毒性分析26-27
• 3.3.5 氧化應(yīng)激27-28
• 3.3.5.1 細(xì)胞內(nèi) ROS 水平檢測(cè)27
• 3.3.5.2 SOD 和 GSH 水平檢測(cè)27-28
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論28-35
• 3.4.1 納米材料的形態(tài)和粒徑分布28-29
• 3.4.2 AO/EB 雙染對(duì)細(xì)胞的影響29-31
• 3.4.3 WST-1 法檢測(cè)的細(xì)胞活性31-33
• 3.4.4 細(xì)胞的氧化應(yīng)激33-35
• 3.5 本章小結(jié)35-36
• 4 納米銀（76.29 nm）對(duì) Caco-2 細(xì)胞安全性探究36-44
• 4.1 前言36
• 4.2 材料與儀器36-37
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料36-37
• 4.2.2 主要儀器37
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法37-38
• 4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)及納米材料預(yù)處理37
• 4.3.2 納米材料表征37
• 4.3.3 AO/EB 雙染37
• 4.3.4 CCK-8 法細(xì)胞毒性分析37-38
• 4.3.5 氧化應(yīng)激38
• 4.3.5.1 細(xì)胞內(nèi) ROS 水平檢測(cè)38
• 4.3.5.2 SOD 和 GSH 水平檢測(cè)38
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論38-44
• 4.4.1 納米材料的形態(tài)和粒徑分布38-39
• 4.4.2 AO/EB 雙染對(duì)細(xì)胞的影響39-41
• 4.4.3 CCK-8 法檢測(cè)的細(xì)胞活性41-42
• 4.4.4 細(xì)胞的氧化應(yīng)激42-44
• 4.5 本章小結(jié)44
• 5 微米銀（2 65.2 nm）對(duì) Caco-2 細(xì)胞安全性探究44-51
• 5.1 前言44-45
• 5.2 材料與儀器45
• 5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料45
• 5.2.2 主要儀器45
• 5.3 實(shí)驗(yàn)方法45-46
• 5.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)及微米銀預(yù)處理45
• 5.3.2 AO/EB 雙染45-46
• 5.3.3 MTT 法細(xì)胞毒性分析46
• 5.3.4 氧化應(yīng)激46
• 5.3.4.1 細(xì)胞內(nèi) ROS 水平檢測(cè)46
• 5.3.4.2 SOD 和 GSH 水平檢測(cè)46
• 5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論46-50
• 5.4.1 AO/EB 雙染對(duì)細(xì)胞的影響46-48
• 5.4.2 MTT 法檢測(cè)的細(xì)胞活性48-49
• 5.4.3 細(xì)胞的氧化應(yīng)激49-50
• 5.5 本章小結(jié)50-51
• 6 論文總結(jié)、創(chuàng)新點(diǎn)與展望51-54
• 6.1 論文總結(jié)51-53
• 6.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)53
• 6.3 問題與展望53-54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 作者簡(jiǎn)歷59-60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：食品包裝材料中納米銀對(duì)腸上皮細(xì)胞（Caco-2）安全性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：381499