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苯并[a]芘和脂多糖聯(lián)合作用對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響及分子機(jī)制

發(fā)布時間:2023-05-07 07:38
  目的:研究苯并[a]芘(BaP)聯(lián)合脂多糖(LPS)對心血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響及其分子機(jī)制,為科學(xué)地評價大氣多環(huán)芳烴(PAHs)及其微生物污染對公眾心血管系統(tǒng)的影響提供基礎(chǔ)科學(xué)數(shù)據(jù)。方法:以心血管生理或病理研究的模式細(xì)胞——人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)為細(xì)胞模式,選擇ET-1、eNOS、TF、PAI-1、IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4、IL-10等表征內(nèi)皮細(xì)胞功能及炎癥狀態(tài)的目標(biāo)蛋白為生物標(biāo)志物,分別采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)和免疫印跡(Western Blot)等技術(shù),檢測LPS和BaP單獨(dú)或聯(lián)合作用下上述目標(biāo)蛋白的表達(dá),以探討LPS和BaP聯(lián)合作用對心血管內(nèi)皮細(xì)胞功能與炎癥的影響,并選擇AhR、NF-?B、p38、Erk1/2、JNK等信號通路的關(guān)鍵蛋白為目標(biāo)來探討其聯(lián)合作用的分子機(jī)制。結(jié)果:(1)ELISA結(jié)果顯示,LPS單獨(dú)作用下,HUVEC細(xì)胞內(nèi)IL-6、IL-8、MCP-1的表達(dá)顯著上升;BaP單獨(dú)作用下,IL-6和MCP-1的表達(dá)降低;LPS和BaP聯(lián)合作用下,IL-6、IL-8和MCP-1的表達(dá)較LPS組降低,IL-4、IL10和ET-1的表達(dá)無明顯變化...

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 LPS與PAHs
        2.1.2 細(xì)胞系
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑與耗材
        2.1.5 主要試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 ELISA檢測IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4 和IL-10的表達(dá)
        2.2.3 ELISA檢測ET-1的表達(dá)
        2.2.4 Western Blot法檢測eNOS、PAI-1、TF、AhR、NF-?B等蛋白的表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)分析處理
第3章 結(jié)果
    3.1 LPS、BaP對內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子的影響
        3.1.1 LPS對IL-6、IL-8、MCP-1表達(dá)的影響
        3.1.2 BaP對IL-6、MCP-1表達(dá)的影響
        3.1.3 LPS、BaP聯(lián)合作用對IL-6、IL-8、MCP-1、IL-4、IL-10表達(dá)的影響
        3.1.4 LPS、IYP聯(lián)合作用對IL-8、MCP-1表達(dá)的影響
        3.1.5 LPS、NAP聯(lián)合作用對IL-8、MCP-1表達(dá)的影響
    3.2 LPS、Ba P對內(nèi)皮細(xì)胞功能相關(guān)蛋白的影響
    3.3 潛在的分子機(jī)制
        3.3.1 LPS、BaP對AhR蛋白表達(dá)的影響
        3.3.2 LPS、BaP對內(nèi)皮細(xì)胞MAPK信號通路相關(guān)蛋白的影響
        3.3.3 LPS、BaP聯(lián)合作用對IKKβ和NF-κB蛋白表達(dá)的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號:3810571

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