外泌體分泌在1,4-苯醌誘導(dǎo)的HL-60細(xì)胞凋亡中起保護(hù)作用
發(fā)布時間:2023-04-23 07:43
慢性苯暴露損害造血系統(tǒng),可引起再生障礙性貧血,甚至白血病。外泌體(exosomes)是細(xì)胞分泌的納米級膜泡,在許多生理和病理過程中發(fā)揮重要作用。然而,苯及其代謝產(chǎn)物對外泌體分泌的影響仍不清楚。本研究旨在觀察苯的活性代謝產(chǎn)物1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,1,4-BQ)能否引起人早幼粒白血病細(xì)胞HL-60外泌體分泌量的變化以及外泌體釋放在1,4-BQ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中的作用。應(yīng)用不同濃度1,4-BQ處理細(xì)胞24 h,超高速離心法提取細(xì)胞培養(yǎng)基中的外泌體,結(jié)果發(fā)現(xiàn)1,4-BQ能促進(jìn)外泌體分泌,呈劑量反應(yīng)關(guān)系。進(jìn)一步應(yīng)用外泌體抑制劑GW4869抑制外泌體分泌,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率、蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測抑凋亡蛋白質(zhì)Bcl-2、凋亡通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表達(dá),探討外泌體分泌對1,4-BQ所致細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果顯示:與對照組相比,1,4-BQ單獨(dú)處理組的凋亡率、Bcl-2、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表達(dá)均顯著增高(P<0.05),而1,4-BQ+GW4869組的凋...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與分組
1.3 外泌體的提取
1.4 電鏡鑒定
1.5 納米粒徑分析
1.6 Western 印跡檢測
1.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
1.8 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 外泌體的鑒定
2.2 1,4-BQ 增加HL-60細(xì)胞外泌體的釋放量
2.3 釋放外泌體在1,4-BQ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮保護(hù)作用
3 討論
本文編號:3799391
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1 材料與方法
1.1 材料
1.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與分組
1.3 外泌體的提取
1.4 電鏡鑒定
1.5 納米粒徑分析
1.6 Western 印跡檢測
1.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
1.8 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 外泌體的鑒定
2.2 1,4-BQ 增加HL-60細(xì)胞外泌體的釋放量
2.3 釋放外泌體在1,4-BQ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮保護(hù)作用
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