鎘干擾脂代謝轉(zhuǎn)運蛋白表達及其抑制自噬的細胞毒性機制
發(fā)布時間：2022-01-15 05:18
環(huán)境中的鎘污染被認為與慢性肝病和腎病、高血壓等多種疾病的發(fā)生相關(guān)。很多實驗結(jié)果已證實了鎘在致動脈粥樣硬化中的作用,包括抑制細胞增殖、促進凋亡而增加內(nèi)皮細胞滲透性,以及改變機體脂代謝。然而,針對鎘引起脂代謝紊亂的研究,主要是發(fā)現(xiàn)了鎘暴露導致血清中膽固醇、甘油三酯水平上升的現(xiàn)象,但其分子機制仍舊不清楚。本課題則從脂代謝問題入手,研究鎘對脂代謝轉(zhuǎn)運蛋白的表達影響,并通過分子生物學方法解釋鎘誘導脂轉(zhuǎn)運蛋白ABCA1（ATP-binding cassette transporter A1）表達增加的機理和鎘對抑制蛋白降解的生物毒性機制。在本研究中,我們用含有不同鎘劑量的飼料喂養(yǎng)ICR小鼠28天,建立小鼠模型模擬環(huán)境鎘污染現(xiàn)象;結(jié)合熒光定量PCR和Western Blotting對脂代謝相關(guān)基因進行檢測,分析鎘對脂代謝轉(zhuǎn)運蛋白表達的影響。蛋白穩(wěn)定性分析發(fā)現(xiàn)鎘增加HepG2細胞中ABCA1蛋白是主要通過抑制溶酶體降解途徑形成的,這也是鎘抑制自噬流產(chǎn)生細胞毒性的原因。鎘處理后小鼠肝臟中負責脂代謝轉(zhuǎn)運蛋白的表達發(fā)生變化:1.負責甘油三酯轉(zhuǎn)運的MTTP（Microsomal triglyceride tr...
【文章來源】：江蘇大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
RT-qPCR檢測鎘處理小鼠組織NPC1L1mRNA的表達
圖 2.1 RT-qPCR 檢測鎘處理小鼠組織 NPC1L1 mRNA 的表達Fig2.1 RT-qPCR detection of NPC1L1 mRNA expression in mice tissue with Cd treatment*表示在統(tǒng)計學上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計學上有非常顯著的差異（p<0.01）。微粒體甘油三脂轉(zhuǎn)運蛋白（MTTP）的功能是負責甘油三酯轉(zhuǎn)運和參與合成極低密度脂蛋白（VLDL）。肝臟和小腸中 mRNA 水平檢測發(fā)現(xiàn)，該基因表達明顯上調(diào)。小腸組織 100 ppm 和 1000 ppm 組中該基因表達顯著增加，分別增加 2倍和 4 倍（圖 2.2A）。肝臟組織中，100 ppm 和 1000 ppm 處理組 MTTP 的表達上調(diào)，分別增加約 2.3 倍和 2.1 倍（圖 2.2 B）。
圖 2.3 RT-qPCR 檢測鎘處理小鼠肝臟組織 HMGCR 和 Srebp2 mRNA 的表達Fig2.3 RT-qPCR detection of HMGCR and Srebp2 mRNA expression in mice liver with Cdtreatment*表示在統(tǒng)計學上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計學上有非常顯著的差異（p<0.01）。B 類Ⅰ型清道夫受體（SR-B1）是高密度脂蛋白（HDL）的配體，和低密度脂蛋白受體LDLR一樣參與介導膽固醇轉(zhuǎn)運。我們對肝臟組織中SR-B1 進行檢測，發(fā)現(xiàn)與前期實驗對低密度脂蛋白受體 LDLRmRNA 表達的檢測結(jié)果相比，SR-B1的表達無明顯變化（圖 2.4A）。（圖 2.4 B 來自季星岐鎘誘導小鼠血清膽固醇增加及其分子機制的研究）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]溶酶體膜上的離子通道[J]. 曲莉麗,辛競,倉春蕾. 中國科學:生命科學. 2017(01)
[2]Regulation of lysosomal ion homeostasis by channels and transporters[J]. Jian Xiong,Michael X.Zhu. Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[3]土壤鎘污染現(xiàn)狀及其治理措施研究進展[J]. 盧紅玲,肖光輝,劉青山,彭新德. 南方農(nóng)業(yè)學報. 2014(11)
[4]LDL受體介導的血漿低密度脂蛋白膽固醇的內(nèi)吞[J]. 范麗娟,李仲. 生命的化學. 2014(03)
[5]鎘的應用和鎘污染[J]. 鄧玉良. 化學世界. 2012(11)
[6]鎘毒性研究進展[J]. 劉莉莉,林嵐,殷霄,陳潤濤,羅巧,謝植偉,陳曉燕,蔡婷峰,陸豐榮. 中國職業(yè)醫(yī)學. 2012(05)
[7]氧化應激在鎘致大鼠肝細胞凋亡中的作用[J]. 汪紀倉,劉學忠,袁燕,裔傳卉,卞建春,劉宗平. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2011(18)
[8]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家. 遺傳. 2012(01)
[9]土壤鎘污染現(xiàn)狀及危害研究進展[J]. 冉烈,李會合. 重慶文理學院學報(自然科學版). 2011(04)
[10]微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白脂代謝作用及表達與調(diào)節(jié)[J]. 陳仕均,唐海蓉,王哲,孫玉成,鄧俊良. 畜牧與獸醫(yī). 2008(03)
本文編號：3589977
【文章來源】：江蘇大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
RT-qPCR檢測鎘處理小鼠組織NPC1L1mRNA的表達
圖 2.1 RT-qPCR 檢測鎘處理小鼠組織 NPC1L1 mRNA 的表達Fig2.1 RT-qPCR detection of NPC1L1 mRNA expression in mice tissue with Cd treatment*表示在統(tǒng)計學上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計學上有非常顯著的差異（p<0.01）。微粒體甘油三脂轉(zhuǎn)運蛋白（MTTP）的功能是負責甘油三酯轉(zhuǎn)運和參與合成極低密度脂蛋白（VLDL）。肝臟和小腸中 mRNA 水平檢測發(fā)現(xiàn)，該基因表達明顯上調(diào)。小腸組織 100 ppm 和 1000 ppm 組中該基因表達顯著增加，分別增加 2倍和 4 倍（圖 2.2A）。肝臟組織中，100 ppm 和 1000 ppm 處理組 MTTP 的表達上調(diào)，分別增加約 2.3 倍和 2.1 倍（圖 2.2 B）。
圖 2.3 RT-qPCR 檢測鎘處理小鼠肝臟組織 HMGCR 和 Srebp2 mRNA 的表達Fig2.3 RT-qPCR detection of HMGCR and Srebp2 mRNA expression in mice liver with Cdtreatment*表示在統(tǒng)計學上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計學上有非常顯著的差異（p<0.01）。B 類Ⅰ型清道夫受體（SR-B1）是高密度脂蛋白（HDL）的配體，和低密度脂蛋白受體LDLR一樣參與介導膽固醇轉(zhuǎn)運。我們對肝臟組織中SR-B1 進行檢測，發(fā)現(xiàn)與前期實驗對低密度脂蛋白受體 LDLRmRNA 表達的檢測結(jié)果相比，SR-B1的表達無明顯變化（圖 2.4A）。（圖 2.4 B 來自季星岐鎘誘導小鼠血清膽固醇增加及其分子機制的研究）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]溶酶體膜上的離子通道[J]. 曲莉麗,辛競,倉春蕾. 中國科學:生命科學. 2017(01)
[2]Regulation of lysosomal ion homeostasis by channels and transporters[J]. Jian Xiong,Michael X.Zhu. Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[3]土壤鎘污染現(xiàn)狀及其治理措施研究進展[J]. 盧紅玲,肖光輝,劉青山,彭新德. 南方農(nóng)業(yè)學報. 2014(11)
[4]LDL受體介導的血漿低密度脂蛋白膽固醇的內(nèi)吞[J]. 范麗娟,李仲. 生命的化學. 2014(03)
[5]鎘的應用和鎘污染[J]. 鄧玉良. 化學世界. 2012(11)
[6]鎘毒性研究進展[J]. 劉莉莉,林嵐,殷霄,陳潤濤,羅巧,謝植偉,陳曉燕,蔡婷峰,陸豐榮. 中國職業(yè)醫(yī)學. 2012(05)
[7]氧化應激在鎘致大鼠肝細胞凋亡中的作用[J]. 汪紀倉,劉學忠,袁燕,裔傳卉,卞建春,劉宗平. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2011(18)
[8]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家. 遺傳. 2012(01)
[9]土壤鎘污染現(xiàn)狀及危害研究進展[J]. 冉烈,李會合. 重慶文理學院學報(自然科學版). 2011(04)
[10]微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白脂代謝作用及表達與調(diào)節(jié)[J]. 陳仕均,唐海蓉,王哲,孫玉成,鄧俊良. 畜牧與獸醫(yī). 2008(03)
本文編號：3589977
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