目的:鉛是工業(yè)上廣泛運(yùn)用的重金屬,因其化學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定,可在自然環(huán)境中長期穩(wěn)定存在,故鉛污染是我國面臨的嚴(yán)重環(huán)境問題之一。鉛對人體的多個(gè)系統(tǒng)均有毒性效應(yīng),其中尤以神經(jīng)系統(tǒng)最為嚴(yán)重,然而目前鉛所致神經(jīng)毒性的機(jī)制尚未完全明確,有研究認(rèn)為氧化應(yīng)激是鉛致神經(jīng)毒性的關(guān)鍵因素。褪黑素（melatonin,MT）是目前市面上常見的膳食補(bǔ)充劑,研究發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤等多項(xiàng)生理功能,但其是否能夠減輕鉛引起的神經(jīng)損傷仍不清楚。本研究以PC12細(xì)胞作為研究對象探究褪黑素是否對鉛所致神經(jīng)毒性具有保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。方法:用不同劑量的褪黑素（25μM、50μM、100μM、200μM、400μM或800μM）處理細(xì)胞,CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的存活率。PC12細(xì)胞分為對照組、25μM醋酸鉛（Lead acetate,PbAc）染毒組、50μM MT處理組和50μM MT預(yù)處理+25μM PbAc組,處理24小時(shí)后CCK-8和LDH實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞存活率和損傷率;Hoechst染色實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞凋亡;免疫熒光法檢測Cleaved-Caspase-3和細(xì)胞色素C（Cytochrome C,Cyto... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
全文縮寫詞
中文摘要
Abstract
前言
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 設(shè)備
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 細(xì)胞處理
    1.5 CC-8 實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞存活率
    1.6 LDH實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞損傷率
    1.7 Hoechst染色檢測細(xì)胞凋亡率
    1.8 免疫熒光檢測Cleaved-Caspase-3和Cyto C的表達(dá)
    1.9 熒光染色檢測細(xì)胞和線粒體內(nèi)ROS水平
    1.10 蛋白提取
    1.11 蛋白定量
    1.12 Western Blot檢測Nrf2和HO-1 蛋白水平
    1.13 GSH含量測定
    1.14 SOD酶活力測定
    1.15 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 褪黑素減少鉛所致PC12 細(xì)胞死亡
    2.2 褪黑素減少鉛所致PC12 細(xì)胞核損傷
    2.3 褪黑素抑制Cleaved-Caspase-3 激活和Cyto C釋放
    2.4 褪黑素抑制鉛所致PC12 細(xì)胞ROS水平升高
    2.5 褪黑素抑制鉛所致GSH含量減少和SOD酶活力下降
    2.6 褪黑素提高PC12 細(xì)胞HO-1 和胞核Nrf2 蛋白的水平
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3426533