目的錳和高脂飲食對腸道菌群的影響及其在神經(jīng)損傷中的作用尚未明確。本研究通過建立錳暴露高脂飲食小鼠模型,探討錳暴露和高脂飲食對小鼠神經(jīng)行為及神經(jīng)炎癥的影響;闡明腸道菌群穩(wěn)態(tài)對短鏈脂肪酸（SCFAs）及調(diào)節(jié)性T細胞（Tregs）的影響;探討多形擬桿菌（BTeta）和丁酸梭菌（CBut）對錳暴露高脂飲食小鼠神經(jīng)行為及神經(jīng)炎癥的改善作用。方法1選取成年雄性SPF級C57BL/6小鼠80只,隨機分為對照組、高脂飲食組（HFD組）、錳暴露組（Mn組）和高脂飲食+錳暴露組（HFD+Mn組）。對照組和Mn組小鼠飼喂普通飼料,HFD組和HFD+Mn組飼喂高脂飼料;Mn組和HFD+Mn組給予10mg/kg/天Mn Cl2溶液,染毒周期12周。應(yīng)用轉(zhuǎn)棒試驗、曠場試驗和高架十字迷宮試驗,檢測小鼠運動協(xié)調(diào)、探究行為及焦慮狀態(tài);應(yīng)用HE染色方法,觀察紋狀體病理損傷情況;采用Western blot技術(shù),測定小鼠紋狀體中IL-6、TNF-α、IL-10和Foxp3的蛋白表達。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù),檢測紋狀體Tregs標志基因PD-1、Ctla4、Helios和Gitr,以及血腦屏障通透性相關(guān)緊密連接蛋... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

錳元素測定標準曲線

華北理工大學(xué)博士學(xué)位論文-16-注：與對照組比較，aP<0.05，與Mn組比較，bP<0.05。圖2實驗小鼠體重情況比較(-x±s,n=20)1.2.2實驗小鼠脂代謝水平的情況對實驗小鼠進行脂代謝水平檢測發(fā)現(xiàn)：與對照組和Mn組比較，HFD組和HFD+Mn組小鼠血清中總膽固醇（T-CHO）和甘油三酯（TG）水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；對照組和Mn組小鼠血清中總膽固醇和甘油三酯水平無明顯差異（P>0.05）；亦未見HFD+Mn組小鼠血清中T-CHO、TG含量較HFD組有明顯變化（P>0.05），如圖3所示。A—總膽固醇B—甘油三酯注：與對照組比較，aP<0.05，與Mn組比較，bP<0.05。圖3實驗小鼠血清總膽固醇和甘油三酯含量變化（-x±s,n=9）

華北理工大學(xué)博士學(xué)位論文-20-經(jīng)HE染色觀察實驗小鼠腦組織紋狀體結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)：對照組小鼠紋狀體組織細胞胞質(zhì)均質(zhì)紅染，核仁清晰（圖8A）。與對照組相比，HFD組，無明顯差異（圖8B）；Mn組部分神經(jīng)元細胞結(jié)構(gòu)不清，細胞核變小且深染，細胞質(zhì)深染（圖8C）。HFD+Mn組小鼠紋狀體細胞核和細胞質(zhì)呈暗色染色；核質(zhì)不均勻，核周間隙增大，深染，鬼影細胞明顯增多；有的細胞呈空泡狀，甚至可見固縮神經(jīng)元細胞，見圖8D。A—對照組；B—HFD組；C—Mn組；D—HFD+Mn組圖8錳暴露對高脂飲食小鼠紋狀體的損傷情況（標尺：20μm）1.2.6錳暴露對高脂飲食小鼠紋狀體促炎因子（TNF-α和IL-6）蛋白表達的影響應(yīng)用Westernblot技術(shù)檢測對實驗小鼠紋狀體組織促炎因子TNF-α和IL-6蛋白表達水平進行檢測發(fā)現(xiàn)，如圖9所示，HFD+Mn組小鼠大腦紋狀體TNF-α和IL-6蛋白表達量在四組小鼠中最高。對條帶進行灰度值分析發(fā)現(xiàn)，Mn組和HFD+Mn組小鼠紋狀體中TNF-α蛋白表達水平顯著高于對照組（P<0.05），分別升高了67.0%和128%。與HFD組小鼠相比，HFD+Mn組小鼠紋狀體中TNF-α蛋白表達水平顯著增加了98.3%（P<0.05）（如圖9B）。如圖9C、D所示，與對照組相比，Mn組和HFD+Mn組小鼠紋狀體中IL-6蛋

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]Correlation of Gut Microbiome Between ASD Children and Mothers and Potential Biomarkers for Risk Assessment[J]. Ning Li,Junjie Yang,Jiaming Zhang,Cheng Liang,Ying Wang,Bin Chen,Changying Zhao,Jingwen Wang,Guangye Zhang,Dongmei Zhao,Yi Liu,Lehai Zhang,Jun Yang,Guimei Li,Zhongtao Gai,Lei Zhang,Guoping Zhao.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2019(01)



本文編號：3312924