目的通過(guò)檢測(cè)己烯雌酚（DES）對(duì)小鼠睪丸引帶細(xì)胞形態(tài)與增殖性影響過(guò)程中松弛素家族肽受體2（RXFP2）的表達(dá)水平,探討RXFP2在外源性雌激素影響小鼠睪丸引帶細(xì)胞中的可能作用機(jī)制。方法小鼠睪丸引帶組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),傳代后隨機(jī)分為正常組、溶劑對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組分別加入DES終濃度為0.01、0.10、1.00、10.00μg/m L作用48 h。觀察細(xì)胞形態(tài)變化,CCK-8檢測(cè)其增殖情況,應(yīng)用免疫熒光和Western Blot對(duì)小鼠睪丸引帶細(xì)胞中RXFP2進(jìn)行定位和蛋白定量分析。結(jié)果正常組細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞型生長(zhǎng),同源性好。各實(shí)驗(yàn)組隨DES劑量增加細(xì)胞數(shù)及細(xì)胞生存率均下降,細(xì)胞增殖明顯受抑制,失去正常形態(tài),胞漿收縮,胞體形態(tài)不規(guī)則。免疫熒光顯示RXFP2高表達(dá)于細(xì)胞膜上。蛋白定量分析發(fā)現(xiàn)各實(shí)驗(yàn)組RXFP2水平與正常組相比表達(dá)降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 DES可影響小鼠睪丸引帶細(xì)胞形態(tài)與增殖性以及RXFP2蛋白的表達(dá),推測(cè)DES可能通過(guò)影響RXFP2信號(hào)系統(tǒng)介導(dǎo)睪丸引帶的發(fā)育,進(jìn)而影響睪丸的下降。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)男科學(xué)雜志. 2020,34(01)CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        （一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        （二）主要試劑
        （三）主要儀器
    二、方法
        （一）小鼠睪丸引帶細(xì)胞的培養(yǎng)及分組
        （二）小鼠睪丸引帶細(xì)胞計(jì)數(shù)及存活率的檢測(cè)
        （三）CCK-8法細(xì)胞增殖抑制檢測(cè)
        （四）細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)
        （五）Western Blot分析
    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、DES對(duì)小鼠睪丸引帶細(xì)胞形態(tài)的影響
    二、DES對(duì)小鼠睪丸引帶細(xì)胞增殖性的影響
    三、RXFP2的亞細(xì)胞定位及DES對(duì)小鼠睪丸引帶細(xì)胞RXFP2表達(dá)的影響
討論



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