目的:以改變飲食中的蛋白質(zhì)濃度作為干預(yù)因素,長期飼養(yǎng)中老年小鼠,通過檢測各組小鼠肝臟和結(jié)腸的組織學(xué)改變,以及脾臟淋巴細胞含量的變化情況,來探究低蛋白飲食對中老年小鼠非特異性炎癥反應(yīng)的影響,并簡要探究這一過程可能的機制。方法:將14月齡健康雌性KM小鼠隨機分為四組,分別為對照組、低蛋白組、高蛋白組、高蛋白+雷帕霉素組。對照組給予標準小鼠飼料,低蛋白組給予低蛋白飲食,高蛋白組給予高蛋白飲食,高蛋白+雷帕霉素組在給予高蛋白飲食的同時隔日腹腔注射雷帕霉素（2mg/Kg）。實驗時間為三個月,實驗期間所有小鼠自由進食進水。實驗三個月末使用頸椎脫臼法處死小鼠,取小鼠的肝臟、結(jié)腸和脾臟組織。使用HE染色觀察各組中老年小鼠肝臟和結(jié)腸的組織學(xué)改變,使用免疫組織化學(xué)檢測法檢測肝臟組織CD68和mTOR蛋白的表達情況,使用流式細胞術(shù)檢測脾臟CD4⁺T、CD8⁺T細胞百分比,使用免疫印跡法檢測肝臟mTOR蛋白的表達水平。結(jié)果:1.中老年小鼠肝組織中肝小葉結(jié)構(gòu)依然完整,但肝細胞胞漿疏松淡染,肝竇廣泛擴張,長期低蛋白飲食可以減輕中老年小鼠肝臟的以上改變,高蛋白飲食作用相反... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)（HE染色，400×，bar=500μm）A為Ctrl組，B為LPG組，C為HPG組，D為HPRG組

圖 2 小鼠肝臟 CD68 分子的表達（免疫組織化學(xué)染色，400×，bar=500μm）A 為 Ctrl 組，為 LPG 組，C 為 HPG 組，D 為 HPRG 組，E 為統(tǒng)計圖：*代表與 Ctrl 組相比差異顯著（p＜0.05）#代表與 HPRG 組相比差異顯著（p＜0.05）。2.1.3 結(jié)腸組織學(xué)觀察光鏡下可見標準飼料喂養(yǎng)的中老年小鼠結(jié)腸組織中腸粘膜改變，隱窩變淺，個別部位甚至有上皮細胞的缺失，杯狀細胞數(shù)量增多（圖 3A）；長期低蛋白飲食能夠減輕中老年小鼠結(jié)腸的時間相關(guān)性改變（圖 3B）；長期高蛋白飲食會加重中老年小鼠結(jié)腸的以上改變，視野中固有層淋巴細胞浸潤明顯（圖 3C）；高蛋白飲食喂養(yǎng)的小鼠同時給予雷帕霉素腹腔注射后結(jié)腸的以上時間相關(guān)性改變會明顯減輕（圖 3D）

12圖 3 小鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)（HE 染色，左側(cè)為 200×，右側(cè)為 400×，bar=500μm） A1、A2為Ctrl 組，B1、B2為 LPG 組，C1、C2為 HPG 組，D1、D2為 HPRG 組。2.2 脾臟 T 淋巴細胞含量改變2.2.1 脾臟 CD4+T 淋巴細胞百分比改變采用流式細胞儀計數(shù)脾臟 CD4+T 淋巴細胞百分比，發(fā)現(xiàn)中老年小鼠的脾臟CD4+T 淋巴細胞數(shù)量明顯偏低（圖 4A）；長期給予低蛋白飲食后，發(fā)現(xiàn) LPG 組小鼠脾臟 CD4+T 淋巴細胞百分比有所回升（圖 4B）；長期高蛋白飲食對小鼠的 CD4+

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effect of ageing on colonic mucosal regeneration[J]. Ferenc Sipos,Katalin Leiszter,Zsolt Tulassay.  World Journal of Gastroenterology. 2011(25)



本文編號：2930641