發(fā)布時間：2020-10-17 05:15

　　 目的：探討職業(yè)性氟暴露致工人外周血淋巴細胞的DNA損傷及影響因素。 方法：選擇廣西某大型鋁廠160名男性氟暴露作業(yè)工人作為氟暴露組，根據(jù)不同的氟暴露水平，分別為高氟暴露組（80名）和低氟暴露組（80名）。根據(jù)不同的工齡，將高氟暴露組男性作業(yè)工人分為3個工齡組（10a、10～15a、15a）。另選該廠60名非氟暴露男性作業(yè)工人為對照組。用氟離子選擇電極法測定各組工人血清氟濃度，單細胞凝膠電泳法(SCGE)檢測工人淋巴細胞DNA損傷程度，流式細胞術(FCM)檢測細胞凋亡率，用酶聯(lián)免疫法檢測外周血淋巴細胞端粒酶含量，用衰減全反射傅立葉變換紅外光譜法(ATR-FTIR)在包括RNA/DNA標識波長在內的波段（900/1900cm-1）進行掃描，檢測氟暴露工人外周血淋巴細胞蛋白質、核酸、糖蛋白和蛋白磷酸化等遺傳物質化學結構的變化。用多重線性回歸分析氟暴露致淋巴細胞DNA損傷及端粒酶活性表達水平的影響因素。 結果: 1.高氟暴露組空氣氟平均濃度為0.35mg/m3(0.29~0.43mg/m3)、低氟暴露組空氣中氟平均濃度為0.25mg/m3(0.17~0.43mg/m3)。對照組車間未檢測出氟。 2.與對照組相比，高氟暴露組和低氟暴露組工人血清氟濃度、淋巴細胞彗星發(fā)生率、彗尾DNA百分率、彗星尾長、細胞凋亡率分別增加了88.9%、139.6%、230.8%、135.6%、128.4%和60.0%、72.5%、85.2%、88.3%、100.9%，差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 3.校正了年齡，吸煙水平后，氟作業(yè)低（10a）、中（10～15a）和高（15a）工齡組相比對照組的彗星細胞率、彗尾DNA百分率、彗星尾長、細胞凋亡率分別增加了66.7%、70.6%、62.6%、49.9%，,150.7%、262.6%、139.2%、124.8%和190.6%、288.7%、169.3%、171.8%。組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 4.與對照組相比，校正了年齡，工齡，吸煙水平后，高氟暴露組氟作業(yè)中（10～15a）和高（15a）工齡組相比,外周血淋巴細胞端粒酶含量增加，端粒酶活性呈低水平表達，組間比較差異有統(tǒng)計學意義。 5.高氟暴露組不同工齡組工人外周血淋巴細胞ATR光譜圖在1650cm-1、1550cm-1、1380cm-1、1260cm-1、1225cm-1、1155cm-1、1080cm-1、1030cm-1、970cm-1、930cm-1紅外線吸收峰對應的A值均低于對照組（P0.05），工齡越高，相應的每個吸收峰峰值下降程度越大，呈劑量－效應關系。 5.主成分分析結果顯示，與對照組比較，氟中、高工齡組淋巴細胞化學成分的差異以第一主成分因子為主（反映細胞的氨基酸、核酸磷酸二酯(VsPO2)、糖蛋白水平的綜合指標），而低工齡組的差異以第二主成分因子為主（反映細胞胞漿蛋白磷酸水平的化學成分改變）。 5.將氟暴露工人淋巴細胞DNA損傷及端粒酶活性表達水平分別作為因變量，血清氟濃度，工種，工齡，年齡，吸煙量作為自變量，建立多重線性回歸模型進行分析，模型的每一個自變量的回歸系數(shù)估計值的檢驗結果顯示血清氟、工種，工齡、吸煙量對因變量的影響差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)，由標準回歸系數(shù)可見，影響淋巴細胞DNA損傷效應大小的因素依次是血清氟、工種、年齡、工齡、吸煙量；影響淋巴細胞端粒酶活性表達水平的因素依次是血清氟濃度、工齡、年齡、吸煙量、工種。結論: 1.氟暴露水平與血清氟呈劑量－效應關系，血清氟可以作為內暴露指標評價職業(yè)性氟暴露工人的個體接觸水平。 2.氟暴露致作業(yè)工人外周血淋巴細胞DNA鏈斷裂，彗星發(fā)生率增加，細胞凋亡率升高，并激活外周血淋巴細胞端粒酶的活性；ATR光譜圖顯示在900/1900cm-1波段內的10個波峰吸光度降低，提示氟可導致淋巴細胞遺傳功能相關化學物質的含量改變。 3.DNA損傷程度會隨著氟暴露年限的升高而上升，氟所造成的工人的DNA損傷是有累積效應的，彗星尾長、彗尾DNA百分率可以作為評價職業(yè)性氟暴露累積暴露劑量的生物標志物。 4.氟致淋巴細胞DNA損傷的多重線性回歸分析結果表明，影響其DNA損傷效應大小的因素依次是血清氟、工種、年齡、工齡、吸煙量。 5.氟致淋巴細胞端粒酶活性表達水平的多重線性回歸分析結果表明，影響其端粒酶活性表達水平的因素依次是血清氟濃度、工齡、年齡、吸煙量、工種。
【學位單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2014
【中圖分類】：R135
【部分圖文】：

圖 1-1 氟致淋巴細胞遺傳物質化學成分變化的 ATR-FTIR 曲線圖Figure 1-1 Fluoride-induced lymphocyte genetic material changes in the chemical composition of ATR-FTIRspectra工人外周血淋巴細胞 ATR-FTIR 光譜數(shù)據(jù)輸入 SPSS，經主成分分析，10 個紅外吸收峰值在第一主成分、第二主成分二維圖上不同貢獻率見圖 1-2（前 k 個主成分的累積貢獻率>70%，主成分 Zi 的特征值 i≥1），第 1、2主成分因子對整體的貢獻率依次為:69.537%，15.930%。第一主成分表達式見公式(1)，第一主成分因子系數(shù)絕對值較大的是 x3~x10，反映細胞氨基酸、核酸磷酸二酯(VsPO2)、糖蛋白水平的綜合指標；第二主成分表達式見公式(2)，在第二主成分因子系數(shù)絕對值較大的是 x2，反映細胞胞漿蛋白磷酸水

反映低工齡組首先導致此 2 種化學成分增加，磷酸化增加可能會細胞代謝酶活力。主成分分析結果表明，氟暴露水平越高（不同工齡組巴細胞磷酸化水平增加，其作用機理這可能是氟致淋巴細胞的損傷后有關;高暴露水平的氟（高工齡作業(yè)工人）可致淋巴細胞糖蛋白、Ⅲ型酸增加，影響蛋白質的合成與代謝。氟暴露水平下，淋巴細胞糖原、蛋白磷酸水平增高，以此使得淋巴細胞磷酸化增加、代謝酶的活力增與 DNA 損傷后的自我修復。

10~15a 工齡組 >15a 工齡組圖 1-5 氟對淋巴細胞凋亡的影響Figure 1-5 Effects of fluoride on lymphocyte apoptosis2.6 氟暴露致工人外周血淋巴細胞端粒酶含量的影響隨年齡的增大, 端粒酶活性有下降的趨勢，考慮到年齡因素對端粒酶含量的影響，用協(xié)方差分析校正了年齡，工齡后統(tǒng)計結果如表 1-4，與對照組相比，氟作業(yè)中（10～15a）和高（>15a）工齡組血清淋巴細胞端粒酶含量增加，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。氟低（<10a）工齡組與對照組血清端粒酶含量相近，差異沒有統(tǒng)計學意義。有數(shù)據(jù)顯示，正常人體外周血淋巴細胞端粒酶含量平均值為 0.52±0.28（ng/mL）。在本實驗中，對照組與<10工齡組外周血淋巴細胞端粒酶含量在正常值相近，而氟作業(yè)中（10～15a）
【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 萬桂敏,王守智,徐春蓓,于光前,王育文,葉平,張麗虹,張志瑜,石玉霞;血清中無機氟測定標準方法的研究[J];中國地方病防治雜志;2000年05期

2 李杰,周好樂,楊茜,劉桂榮,王金峰;實驗性氟中毒小鼠微核率的研究[J];中國地方病防治雜志;2000年06期

3 郭英杰,張愛君;氟化物的致畸作用[J];中國地方病防治雜志;2001年06期

4 呼亞偉,崔炳元,張津旗,章和平,陳福尊,李桂云,曹麗;氟中毒大鼠肝腎細胞凋亡與p53的關系[J];中國地方病防治雜志;2002年03期

5 張麗虹,劉忠杰,白淑琴;血清中氟化物標準分析方法—氟離子選擇電極法的驗證[J];中國地方病防治雜志;2002年06期

6 卜麗莎,張文嵐,薄立華,尹文京,李廣生;過量氟對大鼠肝細胞內鈣水平和肝細胞凋亡的影響[J];中國地方病防治雜志;2003年05期

7 井玲;齊玲;趙志濤;李廣生;;染氟成纖維細胞內Ca~(2+)水平的變化及其意義[J];中國地方病防治雜志;2007年01期

8 徐輝;井玲;李相軍;李廣生;;GSH/GSSG在染氟成骨細胞中的變化[J];中國地方病防治雜志;2008年02期

9 徐琳,王乃巖,霸書紅,王云龍;傅里葉變換衰減全反射紅外光譜法的應用與進展[J];光譜學與光譜分析;2004年03期

10 李羨筠,陳曉琴,翟日洪,黃曙海,陳婷婷,甘永金,廖瑞慶,潘瑞輝;鋁電解作業(yè)對工人細胞遺傳學影響的研究[J];廣西預防醫(yī)學;2003年04期

相關博士學位論文 前1條

1 龐偉毅;應用生物光譜技術研究細胞損傷和組織生長的生物分子特征性變化[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

本文編號：2844331