【摘要】：目的汞作為一種具有神經(jīng)毒性和發(fā)育毒性的環(huán)境污染物,其不僅能夠通過胎盤屏障直接影響胚胎正常的生長(zhǎng)發(fā)育,且能夠透過血睪屏障抑制精子生成、降低精子產(chǎn)能。近期研究提示,父源性汞暴露能誘發(fā)不良的出生結(jié)局。然而,汞的致畸毒性相關(guān)的機(jī)制目前尚不明確。基因印記是一個(gè)獨(dú)特的表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)方式,在胎兒以及出生后的生長(zhǎng)發(fā)育方面起著重要作用。而印記基因DNA甲基化對(duì)環(huán)境致畸物十分敏感,有研究指出煙草、酒精和苯并芘等能使印記基因DNA甲基化水平發(fā)生改變。而父源性汞暴露與精子DNA印記基因甲基化水平關(guān)系的人群研究尚無(wú)報(bào)道。本課題擬通過流行病學(xué)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室分析相結(jié)合,研究男性環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露狀況及與精子DNA印記基因H19、Peg3和Meg3甲基化水平之間的相關(guān)關(guān)系,探討出生缺陷的父源性環(huán)境暴露相關(guān)的表觀遺傳學(xué)機(jī)制,進(jìn)而為出生缺陷的一級(jí)預(yù)防提供理論依據(jù)。方法1.現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查從2015年4月和2016年3~4月來(lái)山西省婦幼保健院生殖中心和山西大醫(yī)院男科門診中進(jìn)行婚前檢查或孕前檢查的男性作為調(diào)查對(duì)象。采用橫斷面調(diào)查的方法,對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行問卷調(diào)查。了解調(diào)查對(duì)象的年齡、受教育水平、個(gè)人或家族出生缺陷史和遺傳病史、吸煙飲酒情況、飲食習(xí)慣(如水產(chǎn)品攝入狀況)等。最終,納入研究的共618人。2.生物樣品收集和檢測(cè)2.1收集男性中段尿樣,采用全自動(dòng)雙通道的氫化物發(fā)生原子熒光光度計(jì)AFS-9700測(cè)定尿中總汞含量。2.2收集男性精液,采用異硫氰酸胍法提取精子基因組DNA。進(jìn)一步采用焦磷酸測(cè)序法分別檢測(cè)精子DNA印記基因H19、Peg3和Meg3甲基化水平。3.統(tǒng)計(jì)分析采用Epi Data3.1軟件進(jìn)行平行雙錄入建立數(shù)據(jù)庫(kù),運(yùn)用SPSS19.0軟件對(duì)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用非參數(shù)檢驗(yàn)比較不同人口學(xué)特征組間尿汞水平分布;采用單因素Spearman秩相關(guān)分析和多重線性回歸方法分析尿汞水平與精子DNA印記基因H19、Peg3、Meg3甲基化之間相關(guān)性。結(jié)果1.調(diào)查對(duì)象環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露狀況調(diào)查對(duì)象尿汞水平中位數(shù)為9.14μg/l(四分位數(shù)間距:5.56~12.52μg/l;濃度范圍:0.16~71.35μg/l)。按照美國(guó)CDC指南中非職業(yè)汞暴露人群的尿汞水平正常范圍(小于10μg/l),本調(diào)查對(duì)象中共有42.7%的男性尿汞水平超過此范圍。非參數(shù)檢驗(yàn)分析結(jié)果顯示,不同人口學(xué)特征(包括年齡、是否吸煙、是否飲酒、是否食用水產(chǎn)品及受教育水平)組間男性尿汞水平分布比較未發(fā)現(xiàn)差異。2.調(diào)查對(duì)象尿汞水平與精子DNA印記基因甲基化水平的關(guān)系2.1單因素Spearmen秩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),尿汞水平與精子DNA印記基因H19甲基化水平呈負(fù)相關(guān),即尿汞水平增加與H19去甲基化相關(guān)聯(lián)。然而未觀察到尿汞水平與精子DNA印記基因Peg3和Meg3甲基化水平有關(guān)。2.2多重線性回歸分析發(fā)現(xiàn),在排除年齡、是否吸煙、是否飲酒、是否食用水產(chǎn)品及受教育水平混雜因素的干擾后,尿汞水平僅對(duì)精子DNA印記基因H19甲基化有影響,兩者之間呈負(fù)相關(guān)。這提示尿汞水平增加和精子DNA印記基因H19去甲基化的獨(dú)立地相關(guān)。結(jié)論1.本研究中的調(diào)查對(duì)象環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露處于較高水平;2.尿汞水平與精子DNA印記基因H19甲基化之間呈負(fù)相關(guān),即尿汞水平增加與精子印記基因H19去甲基化相關(guān)聯(lián),提示精子DNA表觀遺傳修飾對(duì)環(huán)境污染物極為敏感。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R114
【圖文】：

精子DNAH19、Peg3和Meg3甲基化平均水平（均值±標(biāo)準(zhǔn)差）

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 魏炎;李鍇男;畢經(jīng)旺;;表觀遺傳學(xué)在結(jié)直腸癌中的應(yīng)用進(jìn)展[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2016年08期

2 李建波;李博;梁新新;王s

本文編號(hào)：2753039