【摘要】：目的:建立匹配電子煙煙霧尼古丁濃度的實驗裝置。研究載氣吹掃尼古丁長期吸入對大鼠心肺血管功能、氧化應激和炎癥水平的影響并初步探討其機制。方法:載氣吹掃法匹配電子煙煙霧尼古丁濃度的實驗裝置研究:采用氣相色譜質譜(GC-MS)檢測尼古丁,建立尼古丁濃度與峰面積線性方程。同法測定不同流速空氣為載氣吹掃液態(tài)尼古丁形成氣溶膠中尼古丁濃度。將16只雄性清潔級SD大鼠隨機均分為兩組,分別為對照組和尼古丁組,尼古丁組吸入1h/d,連續(xù)12天。用3%無巴比妥鈉(0.1ml/1OOg)腹腔注射麻醉。右總頸靜脈插管取血,離心得血清備用。ELISA法測定尼古丁大鼠體內代謝可替寧濃度。載氣吹掃長期吸入尼古丁對大鼠心血管功能、氧化應激和炎癥水平影響:將40只雄性清潔級SD大鼠隨機均分為四組。實驗組進行載氣吹掃尼古丁法致大鼠吸入,每日分別定時暴露4h、2h、1h,確定為高、中、低劑量組。對照組在標準條件下飼養(yǎng)。每月末測定尾動脈收縮壓(systolic blood pressure SBP),連續(xù)3個月。3個月后,右頸動脈插管測定各組右頸動脈收縮壓和其它血流動力學參數(shù)。收集血樣,低溫離心,獲得血清,-80℃凍存?zhèn)溆�。充分暴露胸腔和腹�?取心臟、胸主動脈、肺、肝臟和腎臟準確測定重量。心肌和胸主動脈標本進行蘇木素-伊紅(hematoxylin and eosin,HE),觀察其病理變化。各實驗組取相同部分胸主動脈(4-5)mm長度進行體外內皮依賴性血管舒張功能實驗。分別采用硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)、硝酸還原酶法、黃嘌呤氧化酶法、比色法測定血清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase GSH-Px)、一氧化氮(nitric oxide,NO)水平。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測心臟、肺、胸主動脈MDA、SOD和GSH-Px。檢測心、肺、血清中內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase eNOS)活性、IL-1β、TNF-α含量。結果:載氣吹掃法匹配電子煙煙霧尼古丁濃度的實驗裝置研究:GC-MS測定尼古丁峰面積與尼古丁濃度高度線性相關(r2=0.9937)。電子煙煙霧尼古丁濃度為0.584μg/ml。條件:25℃尼古丁液面高度為20CM,空氣流1.1L/min時,實驗裝置內的氣溶膠尼古丁濃度與電子煙煙霧匹配。與對照組血清中可替寧濃度(2.05土0.83)ng/ml相比,尼古丁組血清中可替寧濃度(5.31±0.62)ng/ml明顯升高(P0.01)。載氣吹掃長期吸入尼古丁對大鼠心血管功能、氧化應激和炎癥水平影響:長期吸入低、中、高尼古丁組3個月后,與對照組相比,各暴露尼古丁組尾動脈收縮壓和頸動脈收縮壓血壓明顯升高(P0.01)。病理學結果顯示,長期尼古丁 3個月后,中、高劑量尼古丁組部分心肌纖維結構不清,肌漿崩解。低、中、高劑量尼古丁組胸主動脈總面積(total aorta area TAA)中膜面積(medial area MA)中膜厚度(media thickness MT)明顯增大(P0.05,P0.01)。各暴露尼古丁組血清SOD活性明顯降低(P0.01),MDA含量明顯升高(P0.05,P0.01),低、中尼古丁組GSH-Px活性有降低,不明顯,高劑量尼古丁組GSH-Px活性明顯降低。各暴露尼古丁組心、肺、胸主動脈SOD活性明顯降低(P0.05,P0.01),MDA含量明顯升高(P0.05,P0.01),GSH-Px活性明顯降低(P0.05,P0.01)。血清一氧化氮(NO)含量明顯降低(P0.05,P0.01)。血清、心、肺eNOS含量明顯降低(P0.01)。各暴露尼古丁組血清IL-1β有所升高不明顯、TNF-α含量有不同程度的升高(P0.01)。心、肺IL-1β、TNF-α含量有不同程度的升高(P0.01)。結論:建立了與電子煙煙霧尼古丁濃度相匹配的實驗裝置,實驗裝置氣體可以使大鼠感染尼古丁。載氣吹掃長期吸入尼古丁的大鼠血壓升高和心功能存在障礙,發(fā)生機體氧化應激以及心肺的炎癥反應,其機制可能與血管內皮功能的紊亂和交感、副交感系統(tǒng)的同時激活有關。
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安徽醫(yī)科大學碩士學位論文載氣吹掃長期吸入尼古丁對大鼠心血管功能、氧化應激癥水平影響逡逑吸入電子煙煙霧尼古丁濃度對大鼠尾動脈血壓的影響逡逑白對照組相比，尼古丁低劑量組（吸入ｌｈ）、中劑量組（吸入２ｈ）、４ｈ邋）動脈血壓都有明顯的不同程度的上升趨勢，差異具有統(tǒng)計學意圖邋６。逡逑

ｗｅｉｇｈｔ）．＊＊Ｐ＜０．０１邋ｖｓ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑３．４長期吸入電子煙煙霧尼古丁濃度對大鼠心肌的影響逡逑對照組正常心肌，見圖７Ａ；低劑量尼古丁組正常心肌，，見圖７Ｂ；中劑量尼古丁逡逑組部分心肌纖維結構不清，肌漿崩解，見圖７Ｃ；高劑量尼古丁組部分心肌纖維結構逡逑不清，肌漿崩解，見圖７Ｄ。逡逑＿邋＿逡逑圖７長期吸入電子煙煙霧尼古丁濃度對大鼠心肌的影響（Ｘ２００）邋（Ａ）：對照組；（Ｂ）：低劑量尼古逡逑丁組（吸入ｌｈ）；邋（Ｃ）l柤亮磕峁哦∽椋ㄎ耄玻瑁誨澹ǎ模焊嘸亮磕峁哦∽椋ㄎ耄矗瑁�。辶x希疲椋玨澹峰澹牛媯媯澹悖簦簀澹錚駑澹危椋悖錚簦椋睿邋澹茫錚睿悖澹睿簦潁幔簦椋錚鑠澹錚駑澹蹋錚睿玨澹澹簦澹潁礤澹桑睿瑁幔歟幔簦椋錚鑠澹錚駑澹牛歟澹悖簦潁錚睿椋沐澹櫻恚錚耄邋澹錚鑠義希停錚悖幔潁洌椋酰礤澹椋鑠澹遙幔簦螅ǎ玻埃埃╁澹澹ǎ粒哄澹悖錚睿簦潁錚戾澹紓潁錚酰穡唬ǎ攏哄澹歟錚麇澹洌錚螅邋澹睿椋悖錚簦椋睿邋澹紓潁錚酰穡ㄥ澹桑睿瑁幔歟澹溴澹歟瑁�；（Ｃ）：ｍｅｄｉｕｍ辶x希洌錚螅邋澹睿椋悖錚簦椋睿邋澹紓潁錚酰皰澹ǎ桑睿瑁幔歟澹溴澹玻瑁�；（Ｄ）：邋ｈｉ＜倶E澹洌錚螅邋澹睿椋悖錚簦椋睿邋澹紓潁錚酰穡ㄥ澹桑睿瑁幔歟澹溴澹矗瑁義希常黨て諼氳繾友萄濤砟峁哦∨ǘ榷源笫蠖鮒毓溝撓跋戾義希櫻拇笫蟪て詒┞隊諛峁哦�，与对照组相饼x屑亮亢透嘸亮磕峁哦∽樾刂鞫義下鱟苊婊ǎ裕粒粒┖托刂鞫鐾庠舶刖叮ǎ粒遙┟饗栽齟�，测牊有统计学意义（尸［E埃埃擔義希校跡埃埃保�。祱D亮�、中剂量和竾`亮磕峁哦∽樾刂鞫鮒心っ婊ǎ停粒┖托刂鞫義下鮒心ず穸齲ǎ停裕┟饗栽齟

本文編號：2593968